北京现货T4连接酶供应

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名称：北京现货T4连接酶供应
规格：28KU
编号：JN0066
英文名：T4 DNA Ligase
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
  T4 DNA连接酶常用于催化双链DNA平末端或互补粘性末端之间的 连接反应，也能催化双链RNA 5´-磷酸末端和3´-羟基末端间的连接。还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切口。以上反应均需消耗ATP。

产品组成：

 

组份	体积
T4 DNA连接酶 （350U/μl）	80μl
2×Quick Ligation Buffer	1ml
10×T4 DNA Ligation Buffer	1ml

产品特点：
随酶附带10×T4 DNA Ligation Buffer及独特配方的2×Quick Ligation Buffer提供给您更多的选择：而使用10×T4 DNA Ligation Buffer，16℃过夜连接可获得最高的连接效率；使用快连Buffer在室 温(25℃)下，仅需5分钟即可完成粘性末端或平滑末端DNA片段的连接 反应。

产品用途：
1、DNA片段和载体DNA的连接。（参见实验方案）。
2、DNA片段和Linker或Adaptor DNA的连接。

使用建议：
1、粘末端的连接反应：插入片段和载体的摩尔浓度比特别重要，此比例在2-6之间最好，低于2:1就会导致较低的连接效率，高于6:1则会导致多个插入。摩尔比请按载体与插入片段DNA浓度及分子大小来计算。
2、平滑末端的连接反应：平滑末端的连接反应与突出末端相比反应较慢(其Km值约为突出末端的100倍)。进行平滑末端的连接反应时，可提高DNA浓度，将使用酶量增加到突出末端量的2～5倍左右。
3、向粘粒或噬菌体进行连接反应：可使载体和插入DNA的摩尔比调整为1:1，同时增大DNA浓度以便取得良好效果。(0.05～0.1μg／μl以上)
4、反应温度： 该酶的最适温度为37℃，由于热稳定性较差，因此 长时间反应时通常需在16℃下进行。若反应1-2小时左右的话也可在室 温下进行反应。
5、抑制剂：T4 DNA连接酶要求Mg2+，因此螯合Mg2+的EDTA的存在会阻碍反应。将溶解于含有高浓度EDTA缓冲液中的DNA准备作为样品使用，最好先用灭菌蒸馏水或TE缓冲液进行置换。

应用实例：

图 例 1 ） 在25℃，用不同活性单位（2U、4U、6U）T4 DNA连接酶与λDNA/Hind III 片段作用10分钟后的结果以及连接产物灭活T4连接酶后再次使用Hind III酶切结果。
泳道1：λDNA/Hind III；
泳道2：λDNA/Hind III+2U T4 Ligase；
泳道3：λDNA/Hind III+4U T4 Ligase；
泳道4：λDNA/Hind III+6U T4 Ligase；
泳道5：λDNA/Hind III ,T4 Ligase连接产物，Hind III酶切

活性定义：在20μl的连接反应体系中, 6μg的λDNA-Hind III的分解物在16℃下反应30分钟时, 有90%以上的DNA片段被连接所需要的酶量定义为1个单位。

质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。

快速连接步骤：
1、取50 ng载体和3倍摩尔量的插入片段，用双蒸水调整总体积为10μl。
2、加入10μl 2×Quick Ligation Buffer，混匀。
3、加入0.5～1μl T4 DNA连接酶，充分但轻柔混匀（切勿剧烈震荡，可能导致酶部分失活）。
4、稍事离心，置于室温 (25℃) 作用5分钟。
5、冰上放置，转化（如不立即进行转化实验请冻 存于-20℃）

北京现货T4连接酶供应正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·重组人ZNF22(锌指蛋白22)
编号：JN0916
英文名称：Recombinant Human Zinc Finger Protein 22
规格：10μg|50μg|500μg|1mg
本品由我们的大肠杆菌表达系统制备而成，目的基因编码的Met1-Arg224在C端含有His标签。

ZNF22质量控制：＞95%(还原性SDS-PAGE)

ZNF22制剂：冻干品

ZNF22保存：
冻干蛋白置于-20℃以下可长期保存，室温条件下可稳定保存3周。
复溶蛋白溶液可在4～7℃保存2～7天，可分装后置于-20℃保存三个月。

ZNF22复溶：
打开试剂管前请先离心。
复溶浓度推荐大于100 μg/ml。
冻干蛋白请溶于ddH2O。
复溶后，请根据用量分装冻存，避免反复冻融。

关于ZNF22：
Zinc finger protein 22 (ZNF22) belongs to the krueppel C2H2-type zinc-finger protein family and contains 5 C2H2-type zinc fingers. ZNF22 binds DNA through the consensus sequence 5-CAATG-3. May be involved in transcriptional regulation and may play a role in tooth formation. In the embryo, it expressed in developing craniofacial structures including dental epithelium of maxillary molar tooth organs, tongue epithelium and muscle, and craniofacial bone osteoblasts. In the adult, it expressed in mesoderm-derived tissues such as skeletal muscle, heart, kidney and liver. Intermediate expression in spleen, thymus and brain. Low levels in endoderm-derived tissues such as intestine and colon.


北京现货T4连接酶供应关键词：T4 DNA Ligase,JN0066,T4连接酶

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北京现货T4连接酶供应关键词：T4 DNA Ligase,JN0066,T4连接酶

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