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- NEB
- M0370
- 2026年03月02日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
| 品牌 | 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 |
|---|---|---|---|
| NEB | M0370 | 瞬时粘性末端连接酶预混液 | Instant Sticky-end Ligase Master Mix |
| 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
| M0370L | 瞬时粘性末端连接酶预混液 | Instant Sticky-end Ligase Master Mix | 250 reactions |
| M0370S | 瞬时粘性末端连接酶预混液 | Instant Sticky-end Ligase Master Mix | 50 reactions |
产品特点
瞬时粘性末端连接酶预混液将连接以下底物：
双链 DNA
切刻的 DNA/RNA
瞬时粘性末端连接酶预混液是一种即用型 2X 溶液，内含 T4 DNA 连接酶、专有连接增强剂和经优化的反应缓冲液，专门用于瞬时连接粘性末端（2 – 4 bp）底物和提高转化率。
- 无需温育即可高效连接
- 由于该预混液在 -20℃ 条件下储存时仍保持液体状态，使用时无需解冻
- 优化了酶和缓冲液组分的比例，简化反应体系的建立
- 此外，当 DNA 量少且浓度低时仍可进行亚克隆连接，为用户节省了宝贵的 DNA 样本，并且无需稀释，可直接转化到多种化学感受态大肠杆菌菌株中。
- 其它 T4 DNA 连接酶产品包括快速连接试剂盒、Salt-T4、Hi-T4 和平末端/TA 连接酶预混液
- 不确定选择哪种连接酶？ 请参阅 DNA 和 RNA 连接酶特性表或 DNA 连接酶选择指南
瞬时粘性末端连接酶预混液是一种即用型 2X 预混液，内含 T4 DNA 连接酶、专有连接增强剂和经优化的反应缓冲液。该预混液专为瞬时连接粘性末端（2 – 4 bp）底物和提高转化效率而设计，还简化了建立反应体系所需的步骤，并优化了酶和缓冲液组分的比例。由于该预混液在 -20℃ 条件下储存时为液体状态，使用时无需解冻*，并且无需温育即可高效连接亚克隆粘性末端底物。反应时仅需将预混液添加到互补末端的 DNA 中，混匀后转化，因此可节省常规连接所需的宝贵时间。此外，可在 DNA 浓度低的小体系中进行亚克隆连接，为用户节省了宝贵的 DNA 样品，并且无需稀释，可直接转化到多种化学感受态大肠杆菌菌株中。
* 冰箱的实际内部温度会有所不同。我们的测试表明，该预混液在 -20℃ 条件下储存时为液体状态。在 -70℃ 条件下进行的冻融测试则表明，该预混液反复冻融 20 次后，性能并无明显变化。
产品来源
从大肠杆菌菌株中纯化获得，其携带有编码 T4 DNA 连接酶的重组基因。- 产品类别:
- DNA 连接酶产品
- 应用:
- Cloning Ligation,
- Fast Cloning: Accelerate your cloning workflows with reagents from NEB
备注：以上仅为 M0370 的部分产品信息，如需NEB货号 M0370 的完整产品信息及相关的实验操作手册等等，请通过NEB官网查找对应的货号获取。
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文献和实验【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
因为看到园子中使用NEB T4 DNA连接酶的老师和同学比较多，也经常就一些连接的问题进行讨论和沟通。今天发一个关于NEB T4 DNA连接酶的一个专题，就使用过程中一些常见问题跟大家讨论一下。也希望各位老师同学能够踊跃参与，如果大家有什么疑问或者好的建议欢迎。 一、关于NEB M0202 T4 DNA 连接酶的使用方法和常见问题及解答 1、产品特性和使用方法 产品说明：该酶催化契合的双链DNA或RNA的5'-磷酸末端和3'-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平滑
，而这种"限制"病毒生存的办法则可归功于细胞内部可摧毁外源DNA的限制性内切酶。首批被发现的限制性内切酶包括来源于大肠杆菌的EcoR I和EcoR II，以及来源于Haemophilus influenzae的Hind II和Hind III。这些酶可在特定位点切开DNA，产生可体外连接的基因片段。研究者很快发现内切酶是研究基因组成、功能及表达非常有用的工具。 当限制性内切酶的应用在上世纪七十年代流传开来的时候，以NEB为代表的许多公司开始寻找更多的限制性内切酶。除了某些病毒以外，限制
期是8小时。两者的保真性能是Taq DNA聚合酶的5-15倍。由于具有3"→5"的外切酶活性，可去除错配的碱基，从而使延伸反应顺利地进行下去，因此，更适用于long PCR 反应。 在不断寻找新酶的基础上，NEB还致力于对原有酶的修饰和改造，VentR(exo-)和 Deep VentR(exo-) DNA聚合酶就是在原有酶的基础上，去除其3"→5"的外切酶活性，使其更适用于双脱氧法测序和高效率的PCR。虽然保真性能比VentR和Deep VentR有所降低
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