9°N DNA连接酶

特别提示：包括9°N DNA连接酶在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：9°N DNA连接酶
英文名称：9°N DNA Ligase
产品货号：MT0061
产品规格：2000U|20000U

9°N DNA连接酶能够催化磷酸二酯键的形成，使与同一互补靶 DNA 链杂交的两条相邻寡核苷酸链的5′-磷酸末端和3′-羟基末端通过磷酸二酯键相连。该酶来源于极度耐热的海底超嗜热古菌（Thermococcus sp.）9°N 菌株中克隆的连接酶基因，在45℃-90℃ 范围内均有活性。该酶进一步经基因工程基因突变，使得耐受更高的温度，在90℃孵育15分钟仍然保留50%以上的活性。

产品组成：

组分	2000U
9°N DNA Ligase(40U/μl)	50μl
10×9°N DNA Ligase Buffer	250μl

储存条件：-20℃可保存两年，长期储存请置于-70℃。

产品应用：
· 高温条件下，连接DNA链上的切刻位点；
· 与PCR 反应条件兼容可用连接酶检测反应；
· 连接酶链式反应，对等位基因进行特异性检测。

活性定义：1 单位指 50μl 反应体系中，45℃ 条件下，15 分钟内能使 50%的1μg 经 BstEII 消化的λDNA 片段（12 bp 粘性末端）发生连接所需要的酶量。

1×9°N DNA Ligase Buffer：10 mM Tris-HCl，600μM ATP，2.5 mM MgCl2，2.5 mM DTT，0.1% Triton X-100（pH 7.5 @ 25℃），45℃ 温育。

除了9°N DNA连接酶,，我公司还供应以下相关产品：



名称：β-琼脂糖酶Ⅰ
货号：BTN120623
规格：100U
 β-琼脂糖酶切割琼脂糖亚单位或未置换的新琼脂乙糖(3,6-酐-α-L-吡喃型半乳糖基-1-3-D-半乳糖)生成新琼脂-寡糖(1)。β-琼脂糖酶 I 消化琼脂糖，形成不能再成胶的碳水化合物分子，同时释放所俘获的DNA。通常残留的碳水化合物分子或β-琼脂糖酶 I 不会影响随后的限制性内切酶消化、连接反应及转化反应等 DNA操作。反应原理如下：

 本产品来源重组E.coli菌株，此菌株的质粒上携带有β-琼脂糖酶I的基因编码。
 本产品无核酸内、外切酶或核酸酶污染，可用于从琼脂糖凝胶中提取DNA。

活性单位定义：1单位指42℃、1小时条件下，消化200μl低熔点琼脂糖或NuSieve琼脂糖生成可溶性新琼脂-寡糖所需的酶量。

热失活：95℃,2分钟或65℃,15分钟温育可使50单位的β-琼脂糖酶I失活。β-琼脂糖酶I可以在45-50℃保持几个小时的活性。反应体系中存在琼脂糖可以稳定β-琼
脂糖酶I。

储存条件：低温运输，-20℃ 保存，有效期一年。

备注：
➤ 琼脂糖：由于在反应温度42℃条件下，溶液必需要呈液态，所以仅低熔点琼脂糖适合于用β-琼脂糖酶I消化。
➤ pH值的敏感性：β-琼脂糖酶I在pH6.5时有zuì适酶活力，在pH5.0-8.5范围内可以保持>75%的酶活力。
➤ 对盐的敏感性：NaCl或Na2 EDTA浓度在50到500mM之间不影响β-琼脂糖酶I活性。

名称：BsgI限制性内切酶
货号：SV0177
规格：250U|50U
在不同反应缓冲液的活性
BalbBuffer 1.1: 25%
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: 25%
CutSmart Buffer: 100%
特性
CutSmart、重组酶、省时酶。
反应条件
CutSmart 缓冲液 + SAM，37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度
5,000units/ml。
甲基化敏感性
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
注意事项
该酶要获得zuì佳活性需加入 SAM(随 酶提供)，没有 SAM 酶仅有 25% 活性。

名称：EcoRV-HF限制性内切酶
货号：SV0360
规格：20KU|20KU|4KU|4KU|2KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 25%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶、基因工程改造酶、省时酶、高保真酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
20,000和100,000units/ml。
甲基化敏感性:
对哺乳动物基因组DNA CpG甲基化敏感。
注意事项:
该酶切割 pBR322的四环素抗性基因，产生一个可连接的平末端。

名称：SacI限制性内切酶
货号：SV0645
规格：10KU|10KU|2KU|1KU
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 100%
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
重组酶、省时酶。
反应条件:
BalbBuffer 1.1，37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
20,000和100,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
注意事项:
当盐浓度:高于 10mM 时，Sacl的活性被抑制。小量制备 DNA 中残留的盐会阻碍 Sacl的酶切作用。用70% 乙醇漂洗或透析可以除去盐分。

名称：SmlI限制性内切酶
货号：SV0704
规格：2500U|500U
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 25%
BalbBuffer 2.1: 75%
BalbBuffer 3.1: 25%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
CutSmart、重组酶。
反应条件:
CutSmart 缓冲液，55℃。
浓度:
10,000units/ml。
37℃ 时活性:
10%。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。

名称：5′ 去腺苷化酶
货号：SV1372
规格：1KU
特性:
DNA 和 RNA 5´ 末端的去腺苷化
Aprataxin 依赖的 DNA 修复检测
分析双核苷*磷酸
概述:
酵母 5´ 去腺苷化酶是组氨酸三聚体（HIT）家族中的一员，属于组氨酸三聚体核苷结合蛋白（Hint ）的分支。它是 aprataxin 在酵母中的直系同源物。人 aprataxin 的突变会导致神经系统疾病，如共济失调性动眼神经失用症。通过从 DNA 的 5´ 末端去除 AMP（AMP-DNA 水解酶活性），人源 5´ 去腺苷化酶可以去除未连接中间体，它还可以通过去除 3´ -磷酸和 3´ -磷酸乙醇酸修复 DNA 的 3´ 末端损伤。人 aprataxin 作用于小分子，如核苷多磷酸双腺苷*磷酸（AppppA）和 lysyl-AMP。
5´ 去腺苷化酶是由酿酒酵母（S. cerevisiae）的 HNT3 基因编码。我公司研究显示该蛋白能从 DNA 和 RNA 的 5´ 末端去腺苷化，余下 5´ 末端磷酸。它也能切割 AppppA 生成 ATP 和 AMP。未见其对 lysyl-AMP有任何作用。
来源:
从携带编码酿酒酵母 5´ 去腺苷化酶质粒的 E. coli 菌株中纯化而得。
反应条件:
20 μl 反应体系:1X BalbBuffer 2
[50 mM NaCl，10 mM Tris-HCl，10 mM MgCl2，1 mM DTT (pH 7.9 @ 25℃) ]，5–50 pmol 腺苷化 DNA (AMPDNA)，30℃ 温育。
热失活:70℃ 20 分钟。
单位定义:
1 单位指 30℃ 条件下，10 分钟从 5´ 腺苷化 DNA 寡聚体中去除 10 pmol AMP 所需的酶量。
浓度:
20,000 units/ml。

名称：核酸外切酶I
货号：MT0087
规格：1500U|15000U
核酸外切酶I具有从3’-5’方向降解单链 DNA的外切酶活性，能够逐步释放脱氧核糖核酸5"单磷酸，并留下完整的5"端二核苷酸。该酶来源于携带有E. coli exo I 基因的质粒，经重组表达纯化而得。Exonuclease I多用于PCR扩增后降解消化引物，该酶对于双链DNA和磷酰或乙酰基团封闭的3’OH末端DNA链无活性。

产品组成：

组分	1500U
Exonuclease I(20 U/μl)	75μl
10×ExoI Buffer	1ml

保存条件：置于-20℃，可保存3年。

单位定义：1 单位指在37℃ 条件下，30 分钟内催化释放 10nmol的酸溶性核苷释放所需要的酶量。

产品应用：
·从PCR混合物中去除引物；
·PCR产物测序之前用于在单管中使用大引物进行的PCR诱变反应；
·从核酸混合物中去除含有3"羟基末端的单链DNA；
·检测含有3"羟基末端的单链DNA的存在。

使用注意事项：
1．1×ExoI Buffer：67mM Glycine-KOH pH 9.5，6.7mM MgCl2，10mM 2-巯基乙*。该酶在常规PCR Buffer中也具有活性。
2．该酶的zuì佳反应温度为37℃，80℃ 20分钟可失活。
3．该酶不能切割双链DNA，因此含有二级结构的单链DNA需要变性后才能完全消化。

核酸酶选择指南：

货号	酶	消化活性	底物	产物	用途
MT0068	Benzonase核酸酶	核酸内切酶活性	任何形式的DNA/RNA	3-5bp寡核苷酸	消化任何形式的核酸; 去除蛋白样品中的核酸污染。
MT0084	T5核酸外切酶	5"-3"核酸外切酶活性	单链和双链DNA	dNMP至6寡核聚体	DNA消化和Gibson组装
MT0085	T7核酸外切酶	5"-3"核酸外切酶活性	双链DNA	ssDNA和二核苷酸	消化双链DNA
MT0086	λ核酸外切酶	5"-3"核酸外切酶活性	单链和双链DNA	ssDNA和dNMP	消化双链DNA
MT0087	核酸外切酶I	3"-5"单链外切酶活性	单链DNA	dNMP、二核苷	PCR扩增后降解消化引物
MT0088	热敏双链DNA核酸酶)	双链DNA核酸酶活性	双链DNA	2-8bp寡核苷酸	去除RNA样品中的DNA污染。
MT0089	Rnase H	核糖核酸内切酶活性	杂交到DNA链上的RNA	ssDNA和2-8bp的 5"磷酸寡核苷酸	除去杂交到poly(dT)上的mRNA poly(A); 在cDNA第二链合成时除去mRNA。
MT0090	Dnase I	核酸内切酶活性	单链和双链DNA	2-3bp寡核苷酸	蛋白样品中DNA的去除
MT0091	Rnase A	核酸内切酶活性	单链RNA	3"-核苷磷酸	质粒或基因组中RNA污染的去除
MT0092	DNA损伤修复酶	核酸外切酶活性	DNA		DNA修复