北京限制性内切酶SpeI(BcuI)厂家价格

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百奥莱博专业生产销*(代"售")北京限制性内切酶SpeI(BcuI)厂家价格，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京限制性内切酶SpeI(BcuI)厂家价格
规格：400U
产地：国产|进口
编号：BTN17-0270
品牌：百奥莱博
Spe I限制性内切酶识别位点：
5´...A↓C T A G　T...3´
3´...T　G A T C↑A...5´

产品组成：

 

成分	规格
Spe I，10U/μL	40μl
Buffer B，10×	1ml
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

贮存Buffer：Spe I储存液组成为：10mM Tris-HCl(pH7.5 at 25℃)，300mM KCl，1mM DTT，0.1mM EDTA，0.2mg/mL BSA and 50% glycerol。

1×Buffer B：33mM Tris-acetate(pH7.9 at 37℃)，10mM magnesium acetate，66mM potassiu*(代"m") acetate，0.1mg/ml BSA。

活性定义：一个活性单位是指50μl反应体系中，37℃条件下，1小时内将1μg的对照组 DNA完全分解所需的酶量。对照组DNA为插入Spe I识别位点的pUC19载体。

热灭活：80℃孵育20分钟不能灭活该酶。

使用方法：
1．单酶切DNA：
①在离心管中加入下列溶液：

成分	用量
Spe I	0.5-2μL
10× Buffer B	2μL
DNA(0.5-1μg/μL)	1μL
nuclease-free water	16L

②轻柔混匀，短暂离心。
③37℃孵育1-16小时。
2．双酶切或多酶切DNA：
需选择适当的可以兼容两个或多个内切酶的缓冲液(一般Buffer B可作为双酶切Buffer)，然后参考上表设置反应体系。如果没有合适的缓冲液可以选择，可以在一种酶消化完毕后进行纯化，纯化完毕后再进行另外一种酶切反应。
3．直接酶切PCR产品：
①在离心管中加入下列溶液：

成分	用量
PCR reaction mixture	10μL(~0.1-0.5μg of DNA)
nuclease-free water	18μL
10×Buffer B	2μL
SpeI	1-2μL

②轻柔混匀，短暂离心。
③37℃孵育1-16小时。

更多有关北京限制性内切酶SpeI(BcuI)厂家价格的价格及使用说明等，请联系我们的业务经理王欣女士咨询，我公司还销*(代"售")以下产品：

·Sulfolobus DNA聚合酶IV
编号：BTN131182
英文名称：Sulfolobus DNA Polymerase IV
规格：100U
Sulfolobus DNA聚合酶IV是一种热稳定的Y家族DNA聚合酶，能在复制过程中绕过DNA损伤，因而能以多种损伤DNA为模板合成DNA。

产品特点：
1．以损伤DNA为模板合成DNA。
2．DNA修复。

产品组成：

成份	规格
Sulfolobus DNA聚合酶IV(2000U/mL)	50μL
10×Buffer	1.5mL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。


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·MALDI蛋白样品处理试剂盒
编号：BTN111007
英文名称：MS Sample Preparation Kit
规格：500次
本产品用于基质辅助激光解吸离子化(Matrix Assisted Laser Desorption Ionization)分析，所含的基质液是MALDI分析的必不可少的关键成分，其主要作用一是起到分子溶剂的作用，使样品分子分开，但又不会使蛋白质发生共价修饰；而是能从激光脉冲中吸收能量，使蛋白质发生瞬间相变，用于质谱分析。

产品特点：
1．即开即用，用户不需要单独准备各种成分。
2．经过优化，可用于各种样品的MALDI分析。可以选择CCA(羟基*丙*(代"烯")酸)、DHB(2,5-二羟基*甲*(代"酸"))和SA(芥子酸)三种不同的基质。
 CCA适用于分子量在5Kd一下的蛋白质和多肽分析(肽指纹图谱)；
 DHB适合于一般蛋白质、多肽、低聚糖、脂和合成多聚物的分析；
 SA适合分子量在3Kd-150Kd的蛋白质分析。

试剂盒组成：

成分	规格
MS专用溶解液	50ml
基质液成份一	50mg
基质液成份二	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：

一、样品准备
1．将蛋白样品真空冻干后加入MS专用溶解液100μL，溶解半小时(期间可以按下步配制基质液)。蛋白质的终浓度最好在1-10 pmol/μL之间。如果是Reverse-Phase-HPLC制备的样品，则可以不加MS专用溶解液而直接使用。注意：一定要在蛋白质样品真空冻干前将其中的缓冲液、盐、去污剂和变性剂等去除，否则它们会严重影响蛋白质晶体的形成，没有蛋白晶体的形成就不能进行MALDI分析。
2．称量1mg左右的基质干粉到一干净的EP管中，按每mg CCA加100μL基质液成份二的比例加入基质液成份二，混匀后离心。注意：此是用于结晶用的饱和溶液，可能有沉淀，故需要离心。注意：基质液最好新鲜配制。本试剂盒提供50mg，足够配50次 200μL的基质液。
3．选用下面两种上样法之一上样。也可以自选其他的上样方法。

二、Dried-Droplet法上样
1．将1μL蛋白质样品与1μL新配的饱和基质液混匀。注意：可以多做几个不同的蛋白质样品和基质液的比例，在1:1-10:1均可。
2．用移液器将1μL混合液点到MS仪器的样品靶上，让液体在室温下挥发干净。注意：不要有气泡，枪头也不要触及靶面，也不能搅动上样后的混合液，在未结晶之前不要摇晃。样品靶必须充分清洗干净，以免上次试验的残留样品的干扰。
3．如果样品中含有非挥发性杂质，在此步可以用自备的MilliQ水洗涤晶体一次。
4．将样品靶插入质谱仪内，后续操作按MALDI-TOF仪器使用手册进行。
5．同样方法处理自备对照样品(一般仪器厂家提供)。

三、Thin-Layer法上样
1．用移液器将1μL基质液点到MS仪器的样品靶上，在基质液挥发前迅速进入下一步操作。
2．迅速用移液器将1μL样品点到MS仪器的样品靶上，让液体在室温下挥发干净，一般需要5分钟。
3．将样品靶插入质谱仪内，后续操作按仪器使用手册进行。
4．同样方法处理自备对照样品(一般仪器厂家提供)。
5．同样方法处理标准品(仪器厂商提供)。



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·真菌DNA提取试剂盒
编号：BTN60304
英文名称：Fungus DNA extraction kit
规格：50次
本试剂盒是基于液氮研磨法的真菌基因组DNA快速提取试剂盒，尤其适用于从真菌的菌丝体和子实体提取DNA(如果提取孢子和有坚硬细胞壁的单个真菌细胞，则建议选用本公司的玻璃珠法柱式真菌DNA提取试剂盒)，提取过的真菌包括酵母(如：Saccharomyces cerevisiae、Schizosaccharomyces pomb、Pichia pastoris)、动物病原真菌(如：Candida albicans、Aspergillus niger)和植物病原真菌(如：Collectotrichum musae、Fusarium oxysporum)。

试剂盒特点：
1. DNA 纯净，OD260/280一般都在1.9左右，可直接用于PCR、酶切、杂交等。DNA大小在50 Kb左右。
2. 操作简单，整个过程约30分钟左右，比大多数同类产品短。
3.液体培养物处理量在0.1-3mL 之间，真菌菌丝、子实体的处理量在0.1-0.5 g 之间。
4. 价廉物美，与国外同类产品相比质量相当，但价格便宜。
5. 安全无毒，不需要使用*化苄等有毒物质，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
RNase A溶液(10mg/ml)	0.75ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

使用方法：
1. 先将全部RNase A溶液全部加入到溶液A中，摇匀后再取用，未用完的溶液A最好在4℃保存。
2. 称取0.1-0.5g 湿的真菌菌丝、子实体或0.1-3mL液体培养物离心得到的沉淀，转移到塑料研钵中，液氮研磨成粉后转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中。注意：最好避免使用含二氧化硅的玻璃研钵，因为DNA 会吸附在表面，影响得率。如果菌丝或子实体等已经十分干燥，则使用量最好比上面推荐的使用量低5-10倍；如果需要预先从环境中对真菌进行纯化(如从血液病原真菌中提取DNA，则需要先去除红细胞等成份)，请按相关的标准方法先将该真菌预纯化出来，以沉淀物的形式放液氮研磨。
3.在离心管中加入1mL 65℃预热的溶液A并用移液枪头充分吹打混匀(如果溶液A有沉淀，需先在65℃加热溶解后摇匀再使用)。
4. 65℃保温5-30分钟，其间最好吹打混匀2-3次。
5. 12000～15000g室温离心3分钟，将不超过0.75mL的上清转移到新离心管中。有时候上清液中还会有少量细小悬浮物，但对后续操作没有影响，不必进行特殊处理。
6.在上清液中加入等体积的溶液B，上下颠倒30秒充分混匀，溶液将呈白色混浊状，将其置于冰浴中放置5-10分钟。
7. 12000～15000g室温离心3分钟，转移上清到新离心管中。
8. 加入0.2mL的*仿(自备)，震荡器上充分振荡30秒混匀。
9. 12000～15000g室温离心3分钟，两相交界面将有白色膜状物，小心转移上清到新离心管中。
10. 重复第7-第8 步操作一次。
11. 加入0.6-1倍体积的异丙醇(自备)，上下颠倒30秒混匀，12000～15000g离心5分钟，弃上清，管底将有微小DNA沉淀。
12. 用1mL 70%乙醇清洗沉淀2次后(一次洗涤是指加入70%乙醇震荡，12000～15000g室温离心3分钟，小心吸弃上清)，再短暂离心一次，吸弃残留的液体(约50μL。吸出残留的乙醇很重要，否则它会严重影响后续的电泳上样、酶切、杂交等实验)。
13. 加入50-100μl自备缓冲液(如TE)和5-15μl RNase A溶液溶解沉淀(由于基因组DNA较大，一般需要过夜溶解)。DNA 即可用于电泳，酶切和PCR等反应。如果需要测OD，则必须乙醇沉淀去除降解的RNA。

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