Phusion DNA聚合酶价格

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名称：Phusion DNA聚合酶价格
英文名：Phusion DNA Polymerase
编号：BTN130429
规格：100U
品牌：百奥莱博
本产品是Phusion DNA Polymerase基因经过原核表达，并经多次纯化分离得到。该酶是由高保真Pfu DNA聚合酶和独特的双链DNA结合蛋白Sso7d融合而成，其结构示意图如下：


产品特点：
1．极强的DNA 持续合成能力，合成DNA 能力分别是Pfu DNA聚合酶和Taq DNA聚合酶的10倍和2倍。
2．快速，相比常用的DNA聚合酶，合成时间大大缩短，延伸速率为15-30s/kb。
3．可以短时间内高效、高保真扩增长片段DNA，最长可以扩增20Kb。
4．具有 5´-3´和3´-5´核酸外切酶活性，是目前保真度最高的热稳定性聚合酶，保真性是Taq DNA聚合酶的50倍，Pfu DNA聚合酶的6倍。
5．Phusion DNA聚合酶扩增的PCR产物为钝端双链DNA，不能直接用于AT克隆。

产品组成：

 

成分	规格
Phusion DNA Polymerase，2U/μL	50μl
5×Phusion HF Buffer	2×1.5ml
5×Phusion GC Buffer	1.5ml
50mM MgCl2 Solution	1.5ml
5×PCR Enhancer	500μl
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

自备试剂：DNA 模板、引物、dNTP、超纯水等。

使用方法：(以50μL的PCR反应体系为例)

1．设置PCR反应,在一干净的PCR管中，依次加入下列成分：

5×Phusion HF Buffer	10μL
DNA 模板(自备)	＜250ng
dNTP(2mM each)(自备)	5μL
PCR引物(自备)	10pmol each
5×PCR Enhancer(选择添加)	1.5μL
Phusion DNA Polymerase	0.5μL
补超纯水到	50μL

注：
⑴ 如果反应体系不是50μL，各成分需按等比例增加或减少，也可根据PCR特点自行调节Phusion DNA Polymerase、模板和引物的用量，进行体系优化。
⑵ 对于扩增困难或序列较长的模板(如富含GC的或具有复制二级结构的)，可用5×Phusion GC Buffer 代替5×Phusion HF Buffer来进行PCR反应。
⑶ 请最后将Phusion DNA Polymerase 加入到反应体系内，防止该酶具有的外切酶活性降解引物。
⑷ 5×Phusion HF Buffer中已含有1.5mM MgCl2。如有需要，可根据PCR反应特点额外添加MgCl2。
⑸ 对于GC含量较高的模板，可选择性加入5×PCR Enhancer。

2．PCR反应参数：

过程	温度	时间
预变性	98℃	30s-3min
PCR反应(25-35个循环)	98℃	5-10s
	45-72℃	10-30s
	72℃	15-30s/kb
最后延伸	72℃	5-10min

3．反应结束后取5-10μL反应产物，琼脂糖凝胶电泳分析。

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Phusion DNA聚合酶价格关键词：BTN130429,Phusion DNA Polymerase,Phusion DNA聚合酶

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·生物素化的蛋白G
编号：BTN131098
英文名称：Biotin-Protein G
规格：0.5mg
本产品为生物素标记的蛋白G，可用于生物素化二抗的替代物。可以检测或定位位于细胞表面或组织中免疫球蛋白。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

·柱式昆虫DNA提取试剂盒
编号：BTN81101
英文名称：Insect DNA column extraction kit
规格：50次
本试剂盒是专门用于从昆虫、节肢动物、蛔虫、扁形虫和一些富含多糖的动物组织中提取基因组DNA的试剂盒。其原理是基于去垢剂在适当的离子强度条件下，特异地跟基因组DNA结合形成沉淀，然后在用硅胶膜离心吸附法进行进一步纯化得到DNA。

产品特点：
1.适用于用常规方法难以提取的、各种富含多糖的动物，包括昆虫、节肢动物、蛔虫、扁形虫等。
2. 除新鲜样品外，还适合于各种保存状态的样品，包括冷冻的样品、用乙醇保存的样品和福尔马林保存的样品。
3. 提取到的基因组DNA完整性，长度一般在20-50 Kb。
4. DNA纯净，OD260/280一般都在1.8左右，可直接用于PCR、酶切、杂交等。
5. 操作简单，整个过程约30分钟。
6. 安全无毒，本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
溶液C	50ml
离心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脱液2.0	10ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

使用方法：
1. 称取0.1-0.3 g昆虫样品转移到塑料研钵中，液氮研磨成粉后转移到一个干净的1.5mL塑料离心管中。
 注意：最好避免使用含二氧化硅的玻璃研钵，因为DNA会吸附在表面，影响得率。
2.在离心管中加入1mL 65℃预热的溶液A并用移液枪头充分吹打混匀(如果溶液A有沉淀，需先在65℃加热溶解后摇匀再使用)。
3. 65℃保温5-30分钟，其间最好吹打混匀2-3次。
4. 12000～15000g室温离心3分钟。
5. 将不超过0.75mL的上清转移到新离心管中。有时候上清液中还会有少量细小悬浮物，但对后续操作没有影响，不必进行特殊处理。
6.在上清液中加入等体积的溶液B，上下颠倒30秒充分混匀，溶液将呈白色混浊状。
7. 将其置于冰浴中放置5-10分钟。
8. 12000～15000g室温离心3分钟，转移上清到新的1.5mL塑料离心管中。
9. 加入0.2mL的*仿(自备)，震荡器上充分振荡30秒混匀。
10. 12000～15000g室温离心3分钟，两相交界面将有白色膜状物，小心转移上清到新1.5-5mL塑料离心管中。注意：由于下一步要加1.5倍体积的溶液C，所以新的离心管的体积要足够大。
11. 加入1.5倍体积的溶液C，上下颠倒30秒混匀，然后分多次的将混合液转移到离心吸附柱中。
12. 每次转移0.7-0.8mL混合液后，室温放置5-10分钟。
13. 12000～15000g室温1分钟，弃穿透液。
14. 对需要多次上柱的样品，可以在此将剩余的样品加到离心吸附柱式中，重复第12-14步的操作。
15. 将0.7mL通用洗柱液加入离心柱，室温离心1分钟，弃穿透液。
16.在离心吸附柱中加入0.3mL的通用洗柱液，12000～15000g离心半分钟(此步为第二次洗涤)。
17. 空甩1分钟去除残留液体。
18. 将离心柱放置在一新的1.5mL塑料离心管中，加入30-100μl DNA洗脱液2.0。
19.室温放置5分钟后离心1分钟，管底即为昆虫DNA溶液，可立即使用，也可长期保存在－20℃。
20.可以重复上步一次，以洗脱更多的DNA。

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