北京Phusion DNA聚合酶价格

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北京Phusion DNA聚合酶价格的品牌：百奥莱博，是优质的工具酶产品，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多Phusion DNA聚合酶等工具酶产品请联*(代"系")我司咨询订购。

名称：北京Phusion DNA聚合酶价格
编号：BTN130429
规格：100U
英文名：Phusion DNA Polymerase
品牌：百奥莱博
产地：北京
本产品是Phusion DNA Polymerase基因经过原核表达，并经多次纯化分离得到。该酶是由高保真Pfu DNA聚合酶和独特的双链DNA结合蛋白Sso7d融合而成，其结构示意图如下：


产品特点：
1．极强的DNA 持续合成能力，合成DNA 能力分别是Pfu DNA聚合酶和Taq DNA聚合酶的10倍和2倍。
2．快速，相比常用的DNA聚合酶，合成时间大大缩短，延伸速率为15-30s/kb。
3．可以短时间内高效、高保真扩增长片段DNA，最长可以扩增20Kb。
4．具有 5´-3´和3´-5´核酸外切酶活性，是目前保真度最高的热稳定性聚合酶，保真性是Taq DNA聚合酶的50倍，Pfu DNA聚合酶的6倍。
5．Phusion DNA聚合酶扩增的PCR产物为钝端双链DNA，不能直接用于AT克隆。

产品组成：

 

成分	规格
Phusion DNA Polymerase，2U/μL	50μl
5×Phusion HF Buffer	2×1.5ml
5×Phusion GC Buffer	1.5ml
50mM MgCl2 Solution	1.5ml
5×PCR Enhancer	500μl
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

自备试剂：DNA 模板、引物、dNTP、超纯水等。

使用方法：(以50μL的PCR反应体系为例)

1．设置PCR反应,在一干净的PCR管中，依次加入下列成分：

5×Phusion HF Buffer	10μL
DNA 模板(自备)	＜250ng
dNTP(2mM each)(自备)	5μL
PCR引物(自备)	10pmol each
5×PCR Enhancer(选择添加)	1.5μL
Phusion DNA Polymerase	0.5μL
补超纯水到	50μL

注：
⑴ 如果反应体系不是50μL，各成分需按等比例增加或减少，也可根据PCR特点自行调节Phusion DNA Polymerase、模板和引物的用量，进行体系优化。
⑵ 对于扩增困难或序列较长的模板(如富含GC的或具有复制二级结构的)，可用5×Phusion GC Buffer 代替5×Phusion HF Buffer来进行PCR反应。
⑶ 请最后将Phusion DNA Polymerase 加入到反应体系内，防止该酶具有的外切酶活性降解引物。
⑷ 5×Phusion HF Buffer中已含有1.5mM MgCl2。如有需要，可根据PCR反应特点额外添加MgCl2。
⑸ 对于GC含量较高的模板，可选择性加入5×PCR Enhancer。

2．PCR反应参数：

过程	温度	时间
预变性	98℃	30s-3min
PCR反应(25-35个循环)	98℃	5-10s
	45-72℃	10-30s
	72℃	15-30s/kb
最后延伸	72℃	5-10min

3．反应结束后取5-10μL反应产物，琼脂糖凝胶电泳分析。

我公司的北京Phusion DNA聚合酶价格，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·长效期SDS-PAGE还原剂
编号：BTN100910
英文名称：SDS-PAGE Reducing Agent
规格：10mL
在蛋白质PAGE电泳中，还原剂的作用是打断二硫键，可以使蛋白质变性。但是在常规的SDS-PAGE中只有上样液中含有还原剂，PAGE胶中并没有还原剂，蛋白质会在电泳过程中重新形成二硫键，因此电泳条带不清晰。本产品可以克服蛋白电泳此缺点。将本品加入到电泳液中，使蛋白在电泳过程中无法重新形成二硫键。

储存条件：常温运输、4℃保存，有效期一年。

·BAL 31核酸酶
编号：BTN120409
英文名称：BAL 31 Nuclease
规格：50U
BAL 31核酸酶纯化自埃氏交替单胞菌BAL-31培养物。BAL-31核酸外切酶降解双链DNA的3´和5´末端，不切割分子内部。该酶同时还是高度特异性的单链核酸内切酶，在切刻、缺口、双链DNA单链区和双链RNA的单链区进行切割。其工作原理图如下：


产品特点：
1．从两端逐步对双链DNA进行切割，缺失的长度适合于100～1000个碱基左右。
2．加入EGTA可失活。
3．限制性酶切图谱的构建。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1单位指在50μl反应体系，1X核酸酶BAL-31反应缓冲液，30℃条件下，10分钟从线性双链φX174 DNA(40μg/ml)的两端各切下200个碱基对所需要的酶量。

使用方法：
1．在离心管中加入下列溶液：

成分	用量
pBR322 -Ava I fragment	3μg(2.0pmol)
2×反应 Buffer	37.5μl
BAL 31 Nuclease	3～6U
H2O	up to 75μl

2．30℃保温。分别于1、2、3 min时各取样25μl。
3．加入20mM EGTA，65℃加热10分钟灭活酶。
4．用1% Agarose电泳确认DNA片段。

注意事项：
1．该核酸外切酶的双链产物是平齐末端和粘性末端的混合物。尽管要达到最佳连接效率需要用合适的聚合酶修复粘性末端，但该混合物仍可以直接进行克隆。
2．如果需要，可以在使用前用反应缓冲液稀释该酶。
3．只有在20mM EGTA存在条件下，酶的热失活才有效。


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