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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
干冰运输、-80℃保存
- 保质期:
长期
- 英文名:
E.coli DB3.1 Chemical Competent Cell
- 库存:
304
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京大肠杆菌DB3.1化学感受态细胞厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:北京大肠杆菌DB3.1化学感受态细胞厂家
品牌:百奥莱博
规格:10*100μl
编号:BTN140218
产地:国产|进口
本产品是采用大肠杆菌DB3.1细胞含有gyrA462基因,对λ噬菌体的ccdB基因产物的毒性具有抵抗作用,特别适合用于转化和扩增包含ccdB基因的质粒载体。
产品特点:
1. 使用pUC19质粒检测,转化效率可达107,-80℃保存几个月转化效率不发生改变。
2. DB3.1感受态细胞具有链霉素抗性。
3. DB3.1菌株基因型:F- gyrA 462endA1 Δ(sr1-recA)mcrB mrr hsdS20(rB-,mB-)supE44Ara-14 galK2 lac Y1 proA2 rpsL20(SmR)xy1-5 λ- leu mtl1
4. 本产品质量稳定,使用方便,质优价廉。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、SOC或LB培养基等
使用方法:
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl,可以根据实际情况分装使用。
以下实验以100μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30分钟。
3. 42℃热击90秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含有相应抗生素的LB 固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12-16小时。
注意事项:
1、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多,可取少量转化产物涂布平板;若转化的DNA 总量较少,可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少,可通过离心(4,000rpm ,2分钟)后吸除部分培养液,悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2、新制备的固体培养基不易涂干,可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3、涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的转化菌落数过少,可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
北京大肠杆菌DB3.1化学感受态细胞厂家正在火爆热销,除此之外,为您推荐下别热销产品:
·HRP标记内参抗体(β-Tubulin)
编号:BTN130594
英文名称:HRP Conjugated Loading Control Antibody(β-Tubulin)
规格:20μL
本产品包含三种最常用的HRP标记内参抗体,β-actin-HRP-Mouse mAb(BTN130592)、GAPDH-HRP-Mouse mAb(BTN130593)、β-Tubulin-HRP Mouse mAb(BTN130594),该系列抗体无需二抗孵育,可缩短实验周期,节约实验成本,大幅降低背景信息强度。
抗体类型:小鼠IgG1
应 用:Western blotting
建议浓度:1:1000~10000
交叉反应性:人,大鼠,小鼠
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期两年。
·3M乙酸*溶液(pH5.2)(RNase-Free)
编号:BTN60703
英文名称:HRP Conjugated Loading Control Antibody(β-Tubulin)
规格:250mL
本产品包含三种最常用的HRP标记内参抗体,β-actin-HRP-Mouse mAb(BTN130592)、GAPDH-HRP-Mouse mAb(BTN130593)、β-Tubulin-HRP Mouse mAb(BTN130594),该系列抗体无需二抗孵育,可缩短实验周期,节约实验成本,大幅降低背景信息强度。
抗体类型:小鼠IgG1
应 用:Western blotting
建议浓度:1:1000~10000
交叉反应性:人,大鼠,小鼠
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期两年。
·人基因组DNA(女性)
编号:BTN131032
英文名称:Human Genomic DNA(Female)
规格:100μg
本产品为人基因组DNA,来源于多位匿名的捐献者,其中BTN131031为男性基因组DNA;BTN131032为女性基因组DNA。利用脉冲电场凝胶电泳测量,90%以上的DNA的大小大于50kb。该DNA适用于Southern blot杂交,基因组分析(包括PCR)及基因组文库构建等实验。。
储存条件:低温运输、4℃保存、有效期一年。
·柱式DNA清除剂
编号:BTN90318
英文名称:Column DNA Scavenger
规格:50次
用Trizol等方法提取的总RNA样品中经常会含有基因组DNA污染,这些污染会影响下游的RT-PCR和Northern杂交等实验。目前最常用的RNase-free DNase处理方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整性而具有很大缺陷。
本产品是非酶DNA清除剂-2的柱式升级产品,可用于细胞总RNA样品中基因组DNA污染的去除。目前最常用的RNase-free DNase处理方法因DNase中所含残留的RNase能破坏RNA完整性而具有很大缺陷。柱式非酶DNA清除剂不但彻底避免了RNase-free DNase的这一缺陷,同时还具有比非酶DNA清除剂-2操作上更快速的特点。
产品特点:
1. 操作更加简单快速,全部操作只需要几分钟。
2. 回收率高达80%以上。
3.高效,能使总RNA中的基因组DNA污染降低到电泳检测不到的水平,而RNA分子完整性不受任何影响。
4. 本身不含RNase污染。
5. 稳定,本产品为非酶产品,可以常温运输和4℃长期保存;而RNase-free DNase的运输和长期保存必须在低温进行。
6. 性价比高,单位成本远低于RNase-free DNase。
产品组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 2.5ml |
| 溶液B | 50ml |
| 溶液C | 50ml |
| 离心吸附柱 | 50套 |
| 通用洗柱液 | 50ml |
| RNA洗脱液 | 10ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存。
使用方法:
1. 将50μl总RNA溶液与溶液A按1:1的比例混合,充分震荡半分钟。注意:RNA溶液中盐(如*离子)的浓度不能高于0.2 M,如果RNA溶液的量不足50μl,最好加无RNase水补足到50μl以便后续操作。
2. 加入相当于RNA溶液和溶液A混合液总体积9倍体积的溶液B,颠倒数次充分混匀。注意:溶解溶液B沉淀。溶液B在4℃放置后可能会产生沉淀,使用前必须放在65℃水浴使沉淀彻底溶解并充分摇匀后再取用。
3. 将混合液转移到离心吸附柱中,室温12000rpm离心半分钟,弃穿透液。
4. 加0.7mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
5.一次洗涤一般足够去除杂质。如果有必要,可以再加0.3mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12000rpm室温离心半分钟并弃穿透液。一般情况,此步可以省略。
6. 加0.7mL溶液C到离心吸附柱中,12000rpm室温离心半分钟,弃穿透。
7.室温12000rpm离心半分钟。此步十分重要,否则会影响RNA的使用。
8. 将离心吸附柱转移到一个新的1.5mL离心管中,加入30-50μl RNA洗脱液,室温放置1-2分钟。室温12000rpm离心半分钟,离心管中溶液即为RNA样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
疑难解答:
Q:能否用本产品对同一样品进行反复处理?
A:可以。
Q:本产品跟DNA Scavenger-2(BTN70801)有何区别?
A:本产品为柱式升级产品,比DNA Scavenger-2更快速清除RNA样品中的DNA污染。
北京大肠杆菌DB3.1化学感受态细胞厂家关键词:BTN140218,大肠杆菌DB3.1化学感受态细胞,E.coli DB3.1 Chemical Competent Cell
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北京大肠杆菌DB3.1化学感受态细胞厂家关键词:BTN140218,大肠杆菌DB3.1化学感受态细胞,E.coli DB3.1 Chemical Competent Cell
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文献和实验实验目的1.了解转化的概念及其在分子生物学研究中的意义。2.学习氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞的方法。3.学习将外源质粒 DNA 转入受体菌细胞并筛选转化体的方法。实验原理转化( Transformation )是将异源 DNA 分子引入另一细胞品系,使受体细胞获得新的遗传性状的一种手段,它是微生物遗传、分子遗传、基因工程等研究的基本实验技术。转化中的受体细胞: 转化过程所用的受体细胞一般是限制性修饰系统缺陷的变异株,即不含限制性内切酶和甲基化酶的突变株,常用 RM 符号表示。转化方法:电击
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