- ￥420
- 南京万木春生物
- 国产
- BC111-01
- 2025年11月27日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
零下70℃
- 保质期：
6个月
- 英文名：
DB3. 1 大肠杆菌克隆感受态细胞
- 库存：
大量
- 供应商：
南京万木春生物
- 规格：
100μl ×20
DB3.1 大肠杆菌克隆感受态细胞
产品信息：
组成 BC111-01
DB3.1 Competent cells 20×100µl
DB3.1 Competent cells 20×100µl
pUC19（0.1ng/µl） 5µl
储存条件：-70℃保存，避免反复冻融。
产品介绍：
本公司生产的大肠杆菌DB3.1细胞含有gyrA462基因，对λ噬菌体的ccdB基因产物的毒性具有抵抗作用，特
别适用于转化和扩增包含ccdB基因的质粒载体。使用pUC19质粒检测，转化效率可达107 cfu/µg，-70℃保存几
个月转化效率不发生改变。每支感受态可以酌情分装使用，降低了实验的成本。质量稳定，使用方便，质优价
廉。
基因型：
F-gyrA462endA1Δ(sr1-recA)mcrBmrrhsdS20(rB-,mB-)supE44ara-14galK2lacY1proA2rpsL20(SmR )xyl-5λ-leumtl1
抗生素耐药性：细胞具有链霉素抗性。
操作步骤（以下操作均按无菌条件的标准进行）：
提示
感受态细胞应保存在-70℃，不可多次冻融和放置时间过长，以避免降低感受态细胞的转化效率。
进行转化操作时，应根据相应温度及无菌条件的要求进行。
为防止转化实验不成功，可以保留部分连接反应液，以重新转化，将损失降到最低。
1. 取感受态细胞置于冰浴中，如需分装可将刚融化细胞悬液分装到无菌预冷的离心管中，置于冰浴中。
（一次转化感受态细胞的建议用量为 50-100μl，可以根据实际情况分装使用。应注意所用 DNA体积
不要超过感受态细胞悬液体积的十分之一。)以下实验以 100μl 感受态细胞为例。
2. 向感受态细胞悬液中加入目的 DNA，轻轻旋转离心管以混匀内容物，在冰浴中静置 30 分钟。
3. 将离心管置于 42℃水浴中放置 60 秒钟，然后快速将管转移到冰浴中，使细胞冷却 2 分钟，该过程不
要摇动离心管。（此步骤也可将离心管置于室温进行，时间不需十分准确，夏季或室温较高时，可放
置
5-8 分钟左右；如果室温较低，可延长时间至 8-15 分钟左右。条件允许建议使用 42℃热激方法。）
4. 向每个离心管中加入500μl 无菌的 SOC 或 LB 培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃ ,150rpm，摇
床振荡培养 60 分钟，目的是使质粒上相关的抗性标记基因表达，使菌体复苏。
5. 无菌条件下，取适量菌液加到含相应抗生素的 LB 固体培养基平板上，用无菌的细菌涂布器或玻璃珠将
细胞均匀涂开。等平板中的液体完全吸收后，倒置平板，37℃培养 12-16 小时。（涂布用量可根据具
体实验来调整。转化质粒在 10ng 左右，90mm 平皿涂布 100µl，55mm 平皿涂布 50µl；连接产物的转
化菌液建议离心后倒掉大部分上清，余 200µl，取 100µl 用于涂布。）
6. 保留剩余的菌液于 4℃冰箱中，视平板上菌落生长情况决定去留。
相关试剂及培养基的制备方法：
1. LB 液体培养基：称取 10g Tryptone，5g Yeast Extract 和 10g NaCl 置于1L 烧杯中。加入约 800ml 的去
离子水，完全溶解后用 2mol/L 的 NaOH 溶液调节 pH 值至 7.0。加去离子水定容至 1L。分装
后，121℃高压灭菌 20 分钟。
2. SOB 和 SOC 培养基：称取 20g Tryptone，5g Yeast Extract，0.5g NaCl 置于 1L 烧杯中加入约 800ml 的
去离子水，完全溶解后再补加 10ml 250mM KCl 溶液，滴加 5M NaOH（约 0.2ml）调 pH 至 7.0。加
入去离子水将培养基定容至 1L。121℃灭菌 20 分钟。使用时加入5ml 灭菌的 2M MgCl2溶液（此种培
养基称为 SOB）。再补加经 0.22µm 过滤除菌的 1M 葡萄糖溶液2ml（此种培养基为 SOC）。
3. 转化复苏细菌用的液体 LB 培养基或 SOC 培养基：可以一次高压 50ml 液体培养基，无菌状态按 1ml
每管分装于高压灭菌的 1.5ml 离心管中，装于自封袋中，冻存于-20℃中，每次用一支。可以极大地避
免培养基污染和减少劳动量。
4. LB 固体选择培养基：100ml LB 液体培养基中加入1.5g 琼脂粉，摇匀后，121℃高压灭菌 20 分钟。冷
却至 50℃左右时加入相应浓度的抗生素（如 AMP 浓度通常为 100µg/ml），混匀后倒在细菌用的无菌
培养皿中，等琼脂凝固后即可使用。
5. IPTG：称量 1.9g IPTG（MW=238.31）充分溶解于40ml 灭菌水，浓度为200mmol/L。用无菌0.22μm过
滤膜过滤除菌。小份分装后，-20℃保存。
6. X-gal：用 DMF（二甲基甲酰胺）配制成 20mg/ml，小份分装（1ml/份）后，-20℃避光保存。
E 、感受态细胞 |
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| E-1 、大肠杆菌克隆感受态细胞 | |||
| 货号 | 产品名称 | 规格 | 单位 |
| BC101-01 | TOP10 感受态细胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC101-02 | 100μl ×20 | 包 | |
| BC102-01 | DH5α 感受态细胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC102-02 | DH5α 感受态细胞 | 100μl ×20 | 包 |
| BC103-01 | JM109 感受态细胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC103-02 | 100μl ×20 | 包 | |
| BC104-01 | XL1-Blue 感受态细胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC104-02 | 100μl ×20 | 包 | |
| BC105-01 | Mach 1-T1 感受态细胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC105-02 | 100μl ×20 | 包 | |
| BC117-01 | Turbo 感受态细胞 | 100ul ×10 | 包 |
| BC117-02 | 100ul ×20 | 包 | |
| BC118-01 | Stable 感受态细胞 | 100ul ×20 | 包 |
| BC106-01 | DH10B 感受态细胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC106-02 | 100μl ×20 | 包 | |
| BC107-01 | OmniMAX2-T1 感受态细胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC107-02 | 100μl ×20 | 包 | |
| BC108-01 | Stbl3 感受态细胞 | 100μl ×20 | 包 |
| BC115-01 | Stbl4 感受态细胞 | 100μl ×20 | 包 |
| BC109-01 | XL10-Gold 感受态细胞 | 100μl ×20 | 包 |
| BC110-01 | JM110 感受态细胞 | 100μl ×20 | 包 |
| BC111-01 | DB3. 1 感受态细胞 | 100μl ×20 | 包 |
| BC112-01 | DH10BAC 感受态细胞 | 100μl ×20 | 包 |
| BC113-01 | NEB 10-beta 感受态细胞 | 100μl ×20 | 包 |
| BC114-01 | BJ5183-AD- 1 感受态细胞 | 100μl ×20 | 包 |
| E-2 、大肠杆菌表达感受态细胞 | |||
| 货号 | 产品名称 | 规格 | 单位 |
| BC201-01 | BL21(DE3) 感受态细胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC201-02 | 100μl ×20 | 包 | |
| BC202-01 | BL21(DE3) pLysS 感受态细胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC202-02 | 100μl ×20 | 包 | |
| BC203-01 | M15 感受态细胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC203-02 | 100μl ×20 | 包 | |
| BC204-01 | Rosetta(DE3) 感受态细胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC204-02 | 100μl ×20 | 包 | |
| BC205-01 | OrigamiB(DE3) 感受态细胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC205-02 | 100ul ×20 | 包 | |
| BC206-01 | T7 表达感受态细胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC206-02 | 100μl ×20 | 包 | |
| BC207-01 | T7pLysY 感受态细胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC207-02 | 100μl ×20 | 包 | |
| BC208-01 | Shuffle T7-K12 感受态细胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC208-02 | 100μl ×20 | 包 | |
| BC209-01 | Shuffle T7-B 感受态细胞 | 100μl ×10 | 包 |
| BC209-02 | 100μl ×20 | 包 | |
| E-3 大肠杆菌电转感受态细胞 | |||
| 货号 | 产品名称 | 规格 | 单位 |
| BC401-01 | NEB 10-beta 电转感受态细胞 | 50μl ×20 | 包 |
| BC402-01 | BJ5183 电转感受态细胞 | 50μl ×20 | 包 |
| BC403-01 | BJ5183-AD- 1 电转感受态细胞 | 50μl ×20 | 包 |
| BC404-01 | TOP10 电转感受态细胞 | 50μl ×20 | 包 |
| BC405-01 | DH5α 电转感受态细胞 | 50μl ×20 | 包 |
| E-4 农杆菌感受态细胞 | |||
| 货号 | 产品名称 | 规格 | 单位 |
| BC301-01 | LBA4404 农杆菌感受态细胞 | 100ul ×20 | 包 |
| BC302-01 | AGL1 农杆菌感受态细胞 | 100ul ×20 | 包 |
| BC303-01 | EHA105 农杆菌感受态细胞 | 100ul ×20 | 包 |
| BC304-01 | GV3101 农杆菌感受态细胞 | 100ul ×20 | 包 |
| E-5 、农杆菌电转感受态细胞 | |||
| 货号 | 产品名称 | 规格 | 单位 |
| BC305-01 | LBA4404 农杆菌电转感受态细胞 | 50μl ×20 | 包 |
| BC306-01 | AGL1 农杆菌电转感受电转态细胞 | 50μl ×20 | 包 |
| BC307-01 | EHA105 农杆菌电转感受态细胞 | 50μl ×20 | 包 |
| BC308-01 | GV3101 农杆菌电转感受态细胞 | 50μl ×20 | 包 |
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文献和实验该产品被引用文献
DB3. 1 大肠杆菌克隆感受态细胞
技术资料文献支持
DB3. 1 大肠杆菌克隆感受态细胞
￥420
