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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
4℃
- 保质期:
一年
- 英文名:
Cell counting KIT-8
- 库存:
875
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应北京CCK-8试剂盒多少钱,我公司销*(代"售")高质量、高纯度的生化试剂,同时价格极具竞争力,满心期待您的咨询订购。
名称:北京CCK-8试剂盒多少钱
编号:QN1293
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
本试剂盒为MTT法的替代方法,是一种基于WST(水溶性四唑盐,化学名:2-(2-甲氧基-4-硝*基)-3-(4-硝*基)-5-(2,4-二磺基*)-2H-四唑单*盐)的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。可用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏等试验。
使用说明:
一、制作标准曲线(测定细胞具体数量时)
1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞。
2、按比例依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做3-5个细胞浓度梯度,每组3-6个复孔。
3、接种后培养至细胞贴壁,然后加CCK-8试剂培养一定时间后测定OD 值,制作出一条以细胞数量为横坐标(X 轴),OD 值为纵坐标(Y 轴)的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量(试用此标准曲线的前提是实验的条件要一致,便于确定细胞的接种数量以及加入CCK-8后的培养时间。)
二、细胞活性检测
1、在96孔板中接种细胞悬液(100μL/孔)。将培养板放在培养箱中预培养(在37℃,5% CO2的条件下)。
2、向每孔加入10μL CCK-8溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。
3、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
4、用酶标仪测定在450nm处的吸光度。
5、如果暂时不测定OD值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl或者1%SDS(W/V)溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。
三、细胞增值-毒性检测
1、在96孔板中配置100 μL 的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养24小时(在37℃,5% CO2的条件下)。
2、向培养板加入10μL不同浓度的待测物质。在培养箱孵育一段适当的时间(例如:6、12、24或48小时)。
3、向每孔加入10 μL CCK-8溶液(注意不要在孔中生成气泡,它们会影响OD值的读数)。如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK-8之前更换新鲜培养基(除去培养基,并用培养基洗涤细胞两次,然后加入新的培养基),去掉药物影响。
4、将培养板在培养箱内孵育1-4小时。
5、用酶标仪测定在450 nm处的吸光度。
6、如果暂时不测定OD 值,打算以后测定的话,可以向每孔中加入10μL 0.1M的HCl或者1%SDS(W/V)溶液,并遮盖培养板避光保存在室温条件下。在24小时内吸光度不会发生变化。
活力计算:.
细胞活力(%)=[A(加药)-A(空白)]/[ A(0加药)-A(空白)]×100
A(加药):具有细胞、CCK-8溶液和药物溶液的孔的吸光度
A(空白):具有培养基和CCK-8溶液而没有细胞的孔的吸光度
A(0 加药):具有细胞、CCK-8溶液而没有药物溶液的孔的吸光度
细胞活力:细胞增殖活力或细胞毒性活力
注意事项:
①建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK-8试剂后的培养时间。
②白细胞可能需要培养较长时间。
③当使用标准96 孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1 ,000个/孔 (100 μL培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,500 个/孔 ( 100 μL培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10% 加入CCK-8溶液。
④如果没有450nm的滤光片,可以使用吸光度在430-490 nm 之间的滤光片,但是450nm检测灵敏度最高。
⑤培养基中酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不会对检测造成影响。
储存条件:4℃,有效期一年
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·L-乳酸脱*酶
编号:QN0484
英文名称:L-Lactic Dehydrogenase
规格:2.5KU
本L-乳酸脱*酶常用于检定丙*(代"酮")酸盐。
别名:L-LDH
CAS号:9001-60-9
分子量:140kDa(由四个亚基组成)
性状:类白色冻干粉或硫*(代"酸")铵的结晶悬浮液
类型:Type II
酶活性:≥300U/mg
pI:8.4~8.6
最适pH:7.5
储存条件:2~8℃
单位定义:37℃,pH 7.5,每分钟将1.0 μmol 丙*(代"酮")酸还原成L-乳酸的酶量为1单位。
·葡聚糖T-70
编号:QN0150
英文名称:Dextran T- 70
规格:10g
分子量:70000
储存条件:RT
·无水*化*
编号:QN0820
英文名称:Lithium chloride
规格:500g
CAS号:7447-41-8
·胆红素
编号:QN0823
英文名称:Bilirubin
规格:1g
CAS号:635-65-4
·丙*(代"酸")*倍他索
编号:QN0830
英文名称:Clobetasol propionate
规格:1g
CAS号:25122-46-7
·莫能霉素*
编号:QN0083
英文名称:Monensin Sodium
规格:1g
本品常用作Na+离子载体,阻断糖蛋白分泌,可能诱导嗜铬细胞儿茶酚胺的分泌,用于碱金属离子复合物的电位和光谱学研究。
CAS:22373-78-0
分子式:C36H61NaO11
分子量:692.86
储存条件:2~8℃
纯度:90%
别名:莫能菌素*盐
Monensin中文名莫能霉素,一种天然离子载体(ionophore),可选择性结合单价阳离子如Li+、Na+、K+、Rb+、Ag+和Tl+,并把这些阳离子转运到细胞膜内,通过影响pH值或Na+-K+平衡来促使革兰氏阴性菌死亡(如Micrococcus, Bacillus, 和 Staphylococcus),减缓P. falciparum和Coccicdium protozoa的增殖,以及抑制一些病毒的复制等。此外,monensin还可破坏高尔基体,抑制细胞内的蛋白转运,因此,常用作蛋白转运抑制剂,用于抑制细胞因子等分泌型蛋白的分泌,或免疫染色时通过抑制分泌来增强分泌型蛋白的染色。
莫能霉素为*盐形式,分别以粉末(Cat#50501ES60)和溶液(Cat#50501ES03, Cat#50501ES08)供货。莫能霉素粉末,可用有机溶剂如乙醇(25mg/ml)、DMSO(25mg/ml)配制成储存液。溶液形式的莫能霉素为溶于乙醇的1000×浓缩液(浓度为2mM)。莫能霉素微溶于水,为了增强其水溶性,可将其储存液稀释于缓冲液或等渗盐溶液。但如后续进行生物学实验,需确保其有机试剂残留量降低到不影响实验的限度,因为有机溶剂在即使很低的浓度也会影响生理学效应。建议莫能霉素水溶液现配现用,存放不超过1天。
莫能霉素常见使用浓度范围为1-5μM。用于增强分泌蛋白的免疫染色的常用使用浓度为2μM,预处理1小时左右即可。具体浓度依实验应用而定。
北京CCK-8试剂盒多少钱关键词:CCK-8试剂盒,Cell counting KIT-8,QN1293
5486-84-0 Fast Blue BB Salt 固蓝BB盐
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