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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
低温运输
- 保质期:
长期
- 英文名:
BAL 31 Nuclease
- 库存:
618
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产供应BAL 31核酸酶怎么卖,我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂,价格优惠,欢迎广大科研工作者垂询订购。
名称:BAL 31核酸酶怎么卖
品牌:百奥莱博
英文名:BAL 31 Nuclease
编号:BTN120409
产地:国产|进口
BAL 31核酸酶纯化自埃氏交替单胞菌BAL-31培养物。BAL-31核酸外切酶降解双链DNA的3´和5´末端,不切割分子内部。该酶同时还是高度特异性的单链核酸内切酶,在切刻、缺口、双链DNA单链区和双链RNA的单链区进行切割。其工作原理图如下:

产品特点:
1.从两端逐步对双链DNA进行切割,缺失的长度适合于100~1000个碱基左右。
2.加入EGTA可失活。
3.限制性酶切图谱的构建。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指在50μl反应体系,1X核酸酶BAL-31反应缓冲液,30℃条件下,10分钟从线性双链φX174 DNA(40μg/ml)的两端各切下200个碱基对所需要的酶量。
使用方法:
1.在离心管中加入下列溶液:
| 成分 | 用量 |
| pBR322 -Ava I fragment | 3μg(2.0pmol) |
| 2×反应 Buffer | 37.5μl |
| BAL 31 Nuclease | 3~6U |
| H2O | up to 75μl |
2.30℃保温。分别于1、2、3 min时各取样25μl。
3.加入20mM EGTA,65℃加热10分钟灭活酶。
4.用1% Agarose电泳确认DNA片段。
注意事项:
1.该核酸外切酶的双链产物是平齐末端和粘性末端的混合物。尽管要达到最佳连接效率需要用合适的聚合酶修复粘性末端,但该混合物仍可以直接进行克隆。
2.如果需要,可以在使用前用反应缓冲液稀释该酶。
3.只有在20mM EGTA存在条件下,酶的热失活才有效。
关于BAL 31核酸酶怎么卖的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·pNPP干粉
编号:BTN131116
英文名称:p-nitrophenyl phosphate,disodiu*(代"m") salt
规格:1g
pNPP在ELISA应用中作为检测碱性磷酸酶的底物而被广泛使用。当碱性磷酸酶与PNPP反应后,形成黄色水溶性反应产物。该产物在405nm有光吸收,并可使用传统方法终止反应。其反应原理如下:
储存条件:常温运输,避光保存,有效期一年。
·生物素化山羊抗亲和素
编号:BTN131103
英文名称:Biotin Goat Anti Avidin Antibody
规格:0.5mg
本产品为生物素标记的山羊抗亲和素抗体,通过抗原表位或生物素结合位点与亲和素结合。本产品可以用来放大荧光信号。也是组织染色或细胞分选分析应用的理想选择。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·柱式酱油DNA提取试剂盒
编号:BTN130956
英文名称:Soy sauce DNA column extraction kit
规格:10次
本产品为生物素标记的山羊抗亲和素抗体,通过抗原表位或生物素结合位点与亲和素结合。本产品可以用来放大荧光信号。也是组织染色或细胞分选分析应用的理想选择。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
·无机焦磷酸酶(PPase)(酵母)
编号:BTN130658
英文名称:Inorganic Pyrophosphatase(yeast)
规格:10U
无机焦磷酸酶催化无机焦磷酸盐水解生成正磷*(代"酸")盐,转录过程中可提高RNA的产量,其反应原理如下:
产品组成:
| 组份 | 规格 |
| 无机焦磷酸酶(100U/mL) | 100μL |
| 10×Buffer | 1mL |
| 使用手册 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
活性定义:1单位指标准反应条件下,[0.5ml反应体系中,100mM Tricine(pH7.2),2mM MgCl2和2mM PPi,于25℃反应10分钟]每分钟催化从无机焦磷酸盐生成1μmol磷酸盐的酶量。
BAL 31核酸酶怎么卖关键词:BAL 31 Nuclease,BAL 31核酸酶,BTN120409
·核酸稀释液,测OD专用
编号:BTN131179
英文名称:Diluent for NA OD Detection
规格:250mL
测定核酸的OD需要一定的pH和盐浓度,本产品就是根据这一特点开发的、专门用于溶解和稀释核酸样品的溶液。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
·FTA卡血液样品DNA提取试剂盒
编号:BTN130933
英文名称:FTA blood sample DNA extraction kit
规格:50次
测定核酸的OD需要一定的pH和盐浓度,本产品就是根据这一特点开发的、专门用于溶解和稀释核酸样品的溶液。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
·Denhardt溶液(非同位素探针)
编号:BTN91104B
英文名称:Denhardt Solution
规格:250mL
本产品是最经典的、用于核酸膜杂交时降低膜对标记探针的非特异结合的试剂,早在Southern杂交出现前10年由Denhardt发明,该产品可用与Southern(含单拷贝基因)、Northern、非同位素杂交(B型规格),与硝酸纤维素膜、尼龙膜等各种常用的核酸杂交介质兼容。A和B分别适用于同位素和非同位素探针。
储存条件:低温运输、-20℃保存、有效期一年。
·NP-40裂解液
编号:BTN131009
英文名称:NP-40 Lysis Buffer
规格:100mL
NP-40裂解液是一种比较温和的细胞组织裂解液。NP-40裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP和co-IP等。
产品特点:
1. 本产品裂解能力强度温和,对膜蛋白的处理能力一般;对核蛋白的提取能力较好;对胞浆蛋白、胞浆磷酸化蛋白和各种转录因子处理效果很好。
2. 本产品含有各种蛋白酶和磷酸蛋白酶抑制剂,能有效防止各种蛋白酶对目的蛋白的降解。
3. 本产品的主要成分为50mM Tris(pH7.4),150mM NaCl,1% NP-40以及sodiu*(代"m") pyrophosphate,β-glycerophosphate,sodiu*(代"m") orthovanadate,sodiu*(代"m") fluoride,EDTA,leupeptin等多种抑制剂,可以有效抑制蛋白降解。
4. 用NP-40裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA法蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
对于培养细胞样品:
1. 融解NP-40 裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
2. 对于贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。对于悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成50-100万细胞/管,然后再裂解。
3. 充分裂解后,10000-14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明 :通常6孔板每孔细胞加入150 微升裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200 微升或250 微升。
对于组织样品:
1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解NP-40 裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
3. 按照每20 毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4. 用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5. 充分裂解后,10000-14000g离心3~5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
备注:
1. 为取得最佳的使用效果,尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
2. 裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
BAL 31核酸酶怎么卖关键词:BAL 31 Nuclease,BAL 31核酸酶,BTN120409
·Bradford法蛋白定量试剂盒
编号:BTN80814
英文名称:Bradford Protein Assay Kit
规格:100mL
Bradford法测定蛋白质浓度是最为常用的蛋白检测方法之一,在酸性条件下,考马斯亮蓝染料能与蛋白质结合形成复合物,其最大吸光值也由465nm转移到595nm,通过颜色的强弱测定蛋白质浓度的高低。本产品是基于Bradford法蛋白检测原理开发的产品。
产品特点:
1.快速,10-20个样品只需要10分钟即可完成测定。
2.稳定,加样混匀后2分钟既可测定,1小时内吸光度变化不超过10%。
3.线性范围在 50~1000μg/mL。
4.最小测量体积为1-20μL,最低测量蛋白量为0.5μg。
5.即开即用,不需要单独购买每个成分再配制。
6.有常规和微量两种检测模式。
7.不受绝大部分样品中的化学物质的影响。巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM。
8.但受略高浓度的表面活性剂影响,各种蛋白质与染料的结合效率可能有差异。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 100ml |
| BSA标准(2mg/mL) | 1ml |
| 滤纸 | 20张 |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输和保存,BSA 标准-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、常规检测流程:
此方法在蛋白浓度30-1000μg/mL范围内呈现R2 = 0.996的直线线性回归,可精确定量蛋白浓度在此范围内的蛋白样品。
1.制备 1×工作液。溶液A与无菌水按1:4 比例充分混合即为1×工作液(例:4mL溶液A+ 16mL 无菌水 = 20mL 1×工作液)。
2.滤纸过滤。过滤后的工作液室温条件下可稳定使用1-2 星期。
3.检测:蛋白样品与1×工作液按1:50 比例混合(例:100μl蛋白样品 + 5mL 1×工作液,适用于3mL的比色杯;40μl蛋白样品 + 2mL 1×工作液,适用于1mL的比色杯;20μl蛋白样品 + 1mL 1×工作液,适用于平底透明96孔板)。
4.加样后,充分混匀。
5.室温放置5分钟。
6.检测吸光度。波长设定 = 595nm。
注意事项:
1.不同型号、规格的滤纸,具有不同的孔径,导致可通过的分子各不相同。请使用本公司指定提供的滤纸,否则会导致不同的测定结果。
2.检测样品之前,应首先制备蛋白标准曲线。一般可使用BSA。
a)常规检测:建议使用下述浓度的BSA。
0μg/mL、31.25μg/mL、62.5μg/mL、125μg/mL、250μg/mL、500μg/mL、750μg/mL、1000μg/mL
b)微量检测:建议使用下述浓度的BSA。
0μg/mL、2.5μg/mL、5μg/mL、7.5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL。
3.检测细胞提取物或纯化蛋白样品,应使用相应的缓冲液制备蛋白标准曲线。
4.用 96孔板测定时,应确保没有气泡,否则会绝对增加吸光度的读数。
5.此检测试剂不受绝大部分样品中的化学物质的影响。巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略高浓度的表面活性剂影响。若SDS高于0.1%,TritonX-100高于0.1%,Tween20,60,80高于0.06%,可取少量样品加水稀释到适当浓度,再行测定。
二、微量检测流程:
此方法在蛋白浓度1~20μg/mL范围内呈现R2=0.992的直线线性回归,可精确定量蛋白浓度在此范围内的蛋白样品。
1.蛋白样品与溶液A按4:1比例混合,例:
| 蛋白样品 | 溶液A | 适用性 |
| 400μL | 100μL | 平底透明96孔板 |
| 2mL | 0.5mL | 1mL的比色杯 |
| 4mL | 1mL | 3mL的比色杯 |
2.加样后,充分混匀。
3.室温放置5分钟。
4.检测吸光度。波长设定= 595nm。
注意事项:
1.Bradford蛋白浓度测定的显色反应受许多去污剂的影响。应避免使用SDS,Triton X-100,Tween等溶解蛋白样品。对于难溶解的蛋白样品,可用1MNaOH 溶解和稀释。
2.Bradford蛋白浓度测定的显色反应依赖于蛋白中精*酸残基的数目,因此不同蛋白间测定的差异可能较大。
3.标准品曲线配制时,如果吸量不准确或者加样枪不精确会造成标准曲线相关系数减小,可根据需要使用倍比梯度稀释的方法来配制,或者使用精确度高的加样枪。
4.由于Bradford法在蛋白浓度增高到一定时候,颜色反应并不成比例增加,因此得到的标准曲线只是在一定范围内可以近似看成直线,每次应按照实际测得的标准曲线计算出相对精确的蛋白浓度。
5.不像其它一些蛋白浓度测定方法(包括Lowry法),Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中巯基乙醇的浓度可高达1M,二流苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略高浓度的去垢剂影响。需确保SDS低于0.125%,Triton X-100低于0.125%,Tween 20低于0.06%,可以考虑用超纯水稀释,透析/除盐,ACETONE/TCA沉淀蛋白后重溶于超纯水等方法来消除干扰物质的影响。
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