大肠杆菌BL21化学感受态细胞 克隆与表达

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名称：大肠杆菌BL21化学感受态细胞 克隆与表达
编号：BTN140428
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
规格：0.1mL*10
英文名：E.coli BL21 Chemical Competent Cell
本产品是采用大肠杆菌BL21菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。本产品用作表达载体的宿主，适用于毒性蛋白的表达，适用于不是基于T7启动子的表达系统。使用pUC19质粒检测，本产品转化效率可达107。
菌株基因型为：BL21 strain E.coli B F- dcm ompT hsdS(rB- mB-)gal。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μL感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μL无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μL转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养
3. 涂布剩余的。

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·免RNA提取RT-PCR试剂盒(细胞组织裂解物RT-PCR试剂盒)
编号：BTN130957
英文名称：Cell Lysate RT-PCR Mix
规格：100次
本产品是一种免RNA提取的RT-PCR的试剂盒，它使用精心优化的细胞裂解液直接裂解培养细胞和痕量组织块，然后直接在细胞裂解液中进行RT，再用cDNA进行PCR或荧光定量PCR。

产品特点：
1. 免RNA提取，从细胞裂解到得到RT-PCR或real-time RT-PCR结果只需3个步骤约3小时，省略了整个RNA提取过程。
2. 灵敏度不低于常规方法(先提总RNA再进行RT-PCR)，不但可以检测到低拷贝的RNA，还可用于检测miRNA。
3. 整合了去除基因组DNA的步骤，只检测RNA，无需担心基因组DNA的污染。
4. 每次只需要10-10000个培养细胞或含相应细胞数的痕量组织(如LCM样品)，验证过的细胞包括Hela、CHO、293、COS-7等，但不能用于U937细胞系。
5. 两步法RT-PCR，后续使用灵活。得到的cDNA既可用于普通PCR，也可用于基于SYBR的荧光定量PCR，也可用于其他定量PCR(如TaqMan)，非常灵活。
6. 有单管操作和多孔板操作两种模式，前者适用于少量样品，后者适用于平行处理大量样品，适用于高通量筛查。
7. 本产品足够100次50μL体系的RT反应和600次30μL体系的PCR反应。

试剂盒组成：

 

成份	规格
细胞裂解液成分一	3.8mL
细胞裂解液成分二	300μL
细胞裂解液成分三	100μL
Oligo(dT),0.5ug/uL	50μL
随机引物,0.2ug/uL	50μL
MMLV逆转录酶(含RI)	300μL
PCR MagicMix3.0	9mL
RNase-free 水	10mL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。


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·耐热型MMLV逆转录酶(无RNase H活性)
编号：BTN131210
英文名称：Thermal Stable MMLV Reverse Transcriptase (H-)
规格：10000U
本产品为点突变型M-MLV逆转录酶(RNase H缺失)，拥有RNA和DNA聚合酶活性，但由于在RNase H结构域内进行了点突变，该酶缺少RNase H的活性，不会降解第一链CDNA 合成时形成的RNA-DNA 复合物中的RNA，从而可以从长模板中获得高产量的全长cDNA。缺失了RNase H活性的逆转录酶为长cDNA的制备及包含高比例全长cDNA的文库制备提供了更好的选择。

产品特点：
1．温度稳定性，点突变产物的热稳定性可防止与二级结构相关的问题，增强了与模板的亲和力。
2．能够在较宽的温度范围内保持活性，在42-45℃之间具有最佳活性，在温度高达55℃时仍有活性。
3．聚合酶活性增强，本产品与其它缺失突变得到的M-MLV 逆转录酶相比，具有更高的cDNA产率。
4．高产量制备全长的第一链cDNA，最长可达13kb。合成时可掺入带有修饰的核苷酸(例如 Cy3-、Cy5-、罗丹明-、*基烯丙基-、荧光素-标记的核苷酸)。
5．广泛的工作范围：提高了逆转录的性能，使得可以在更广泛的酶浓度和底物浓度的条件下工作。

产品组成：

成分	规格
耐热型MMLV逆转录酶(H-)，200U/μL	50μl
5×RT Buffer	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1．在无RNase的PCR管中加入如下成分：

成分	用量
▶RNA模板
Total RNA 或poly(A)RNA 或specific RNA	0.1ng-5μg 10pg-500ng 0.01 pg-0.5μg
▶引物
Oligo dT18 或随机引物 或基因特异引物	0.5μg(100pmol) 0.2μg(100 pmol) 15-20 pmol
▶RNase-free水	Up to 12.5μL

2．对富含二级结构的高GC RNA模板，65℃保温5分钟后迅速冰浴2-10分钟。
3．离心数秒使反应液聚集于PCR管底部。
4．按顺序向上述反应液中加入下表各成分，反应终体积为20μL：

5×RT Buffer	4μL
RNase Inhibitor	0.5μL(20U)
dNTP Mix，10mM each	2μL(终浓度1mM)
耐热型MMLV逆转录酶(H-)	1μL(200U)

 轻柔混匀，短暂离心。
5．42℃保温60分钟(Oligo dT18或基因特异引物)；如果是随机引物则先在25℃保温10分钟，然后再转移至42℃保温60分钟。对富含二级结构的高GC RNA模板保温温度可以设为55℃。
6．70℃保温10分钟终止反应后置冰上冷却，得到cDNA。该产物可直接用于PCR扩增或-20℃保存。


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65-23-6 维生素B6(盐*(代"酸")吡哆素) VitaminB6
ARB11755 人锚蛋白B(Ank-B)Elisa方法检测 Human ankyrin b,ank-b ELISA KIT
L-酪*酸乙酯 TMAB 949-67-7
ARB13245 小鼠棒状杆菌代做ELISA实验 Mouse coryne*(代"b")acterium ELISA KIT
BTN120930 分子杂交炉 Hybridization Oven
26177-56-6 D－Fructose 6－phosphate D-果糖-6-磷酸二*
BL0939 生物素化羊抗人C3抗体
BL1178 增强型DAB显色试剂盒(20×)
ARB14102 羊激素敏感脂肪酶(HSL)ELISA代测服务 
ARB10363 人未甲基化寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN)Elisa定量检测 Human cpg oligodeoxynucleotide,cpg-odn ELISA KIT
CYB162032 羊抗人C3(抗血清) 0.5ml
聚酰胺-6-薄膜 Methyl gallate 63428-83-1
ARB10072 人CCAAT增强子结合蛋白δ(C/EBPδ)免费代测 Human ccaat/enhancer binding protein deta,c/ebpδ ELISA KIT
ARB12168 大鼠白介素32(IL-32)检测服务 Rat interleukin 32,IL-32 ELISA KIT
ARB12721 大鼠髓磷脂碱性蛋白(MBP)酶标法分析 Rat myelin basic protein,mbp ELISA KIT
62625-32-5 Bromocresol Green sodiu*(代"m") salt *甲*(代"酚")绿
BTN100836 亮抑蛋白酶肽溶液 Leupeptin Solution
PY02-128A  普通琼脂斜面培养基(pH8.0-8.2)  250克  
ARB10323 人内皮型一氧化*(代"氮")合成酶(eNOS)Elisa定量检测 Human endothelial nitric oxide synthase,enos ELISA KIT
L-阿拉伯糖 Gum copal 5328-37-0或87-72-9
D-别异亮*酸 Boc-Arg(Tos)-OH 1509-35-9
磺胺甲基嘧啶 Alcohol Oxidase 127-79-7

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