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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
常温运输
- 保质期:
一年
- 英文名:
Red Cell Lysis Solution,Type B
- 库存:
662
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")红细胞裂解液B型(流式细胞分析用)价格厂家,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:红细胞裂解液B型(流式细胞分析用)价格厂家
规格:250mL
编号:BTN90309
品牌:百奥莱博
本品用于快速裂解哺乳动物全血中的红细胞而基本不破坏白细胞和其他淋巴细胞的完整性和生物学活性。由于红细胞是血液的主要细胞成份,不含DNA和RNA,其所含血红素能抑制PCR反应,所以先用本产品裂解红细胞,再提取基因组DNA或RNA 有助于提高所得样品纯度。
产品特点:
1.可以处理人全血、小鼠全血、脾细胞中的红细胞。
2.高效,一次处理能裂解80%以上的哺乳动物红细胞,能回收90%左右的白细胞。一般样品最多只需要处理两次。
3.扩容性好,可以一次处理多达几十毫升的样品,也可以处理100μL的血液。
4.基于NH4Cl 裂解法,得到的白细胞主要用于流式细胞分析。
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
用去离子水将本产品(10×)稀释为1×工作液(1mL 本产品加9mL去离子水),待温度回到室温或37℃加热到37℃的时候再使用。工作液不能长期放置,只能现配现用。
一.裂解哺乳动物全血中的红细胞
1.离心哺乳动物抗凝血液后弃血浆部分,按每1mL 哺乳动物抗凝血液细胞沉淀加10mL 1×工作液的比例加入红细胞裂解液B型的1×工作液。
2. 轻柔吹打充分混匀。
3.室温放置 15分钟(注意:放置时间不要超过15分钟)。
4. 4℃1000rpm离心10分钟,吸弃红色的上清液。
5. 如果红细胞裂解不完全,可以重复第 1-4 步。
6. 用适当的自备缓冲液(如Hanks溶液)重悬白细胞沉淀。
7. 用于细胞计数和流式细胞分析等后续试验。
二.裂解组织细胞中的红细胞
1. 按标准方法用自备的胰酶将组织消化成单个细胞悬液,离心弃上清。
2. 按 1:10的比例向细胞沉淀中加入红细胞裂解液B型工作液,轻柔吹打均匀。
3.室温放置 15分钟(注意:放置时间不要超过15分钟)。
4. 4℃ 1000rpm离心10分钟,吸弃红色的上清液。
5. 如果红细胞裂解不完全,可以重复第 2-4 步。
6. 用适当的自备缓冲液(如 Hanks溶液)重悬白细胞沉淀。
7. 用于细胞计数和流式细胞分析等后续试验。
除红细胞裂解液B型(流式细胞分析用)价格厂家外,我公司正在打折促销以下产品:
盐*(代"酸")黄连素 Methyl 4-(aminomethyl)benzoate hydrochloride 633-65-8
BL1283 酚:*仿:异戊醇 125:24:1(PH<5.0)
OED60K型发酵工业通用消泡剂 Z-D-Leu-OH
J0315 山羊抗人IgG(H+L)抗血清
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BL1377 20×SSC PH5.3
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BTN130514 硅基磁珠 Magnetic beads,Silicic
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·粪便DNA提取试剂盒
编号:BTN70601
英文名称:Stool DNA extraction kit
规格:100次
本试剂盒是专门用于从各种动物粪便中提取高质量的DNA的试剂。动物粪便中夹杂着许多脱落的肠道上皮细胞和肠道病原菌,因此通过PCR 对粪便DNA进行分析是诊断肠道遗传病(如大肠癌等)和传染病的重要材料,具有比常规的结肠镜检测和大便隐血实验更高的特异性和灵敏度。通过PCR 对粪便DNA进行分析还可以对濒危物种进行遗传分析。但粪便中成分复杂多变,常含有对PCR等后续反应有极大的抑制作用的不明成分,所以从粪便中提取高纯度的DNA十分棘手。
产品特点:
1. DNA 纯净,OD260/280一般都在1.8以上,得到的DNA样品原液或稀释液可以直接用于PCR等后续反应。
2. 每次微量提取可以处理100-300mg左右的样品,能得到5μg左右DNA,片段长度在30Kb左右。
3.可以同时提取到肠道上皮细胞和肠道病原菌的DNA。
4. 操作过程简单快速,只需要30分钟。
5.扩容性好,既可以在1.5mL离心管中微量提取,也可以在50mL离心管中进行大规模制备。
6. 试剂无毒无害,环保。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 50ml |
| 溶液B | 50ml |
| 说明书 | 1份 |
注:溶液A和溶液B均为无色液体,溶液A 4℃保存时会产生沉淀,用前需要65℃溶化并混匀。
储存条件:常温运输及保存,有效期一年。
使用方法:
下面的操作步骤为1.5mL塑料离心管中进行的微量提取。如果样品用量增加,需要使用大的离心管,各提取试剂的用量也需要按比例增加。
1. 65℃预热溶液A,待其沉淀溶化后,充分混匀,然后取0.5mL 加入到1.5mL塑料离心管中并放置于65℃待用。最好使用螺旋盖离心管。
2. 取0.1-0.3 g的新鲜或冷冻的动物粪便,加入到含预热溶液A的离心管中,震荡器上剧烈震荡5-10分钟。注意:一定要让管底的样品充分震荡起来。
3. 将离心管置于65℃水浴中保温至少5分钟。
4. 13000-15000g室温离心3分钟,将上清转移到一新的1.5mL塑料离心管中。
5.在上清液中加入等体积的溶液B,上下颠倒30秒使之充分混匀,溶液将呈白色或淡黄色混浊状。
6. 将离心管冰浴至少5分钟。
7. 13000-15000g室温离心3分钟,转移上清到新的1.5mL塑料离心管中。
8. 加入0.2mL的*仿(自备),震荡器上充分振荡30秒混匀。注意:一定要让管底的溶液震荡起来。
9. 13000-15000g室温离心3分钟,小心转移上清到新的1.5mL塑料离心管中。
10. 重复第8 步和第9 步一次。
11. 将上清转移到新的1.5mL离心管时,不要超过0.5mL,否则没有空间加两倍体积的乙醇。如果有多余的可以弃之不用。
12. 加入2倍体积的乙醇(自备),上下颠倒30秒混匀,15000g离心5-10分钟,弃上清,管底将有微小DNA沉淀。注意:最好不要用异丙醇代替乙醇,否则不容易去除带色素的杂质。
13. 加入1mL 75%乙醇(自备),震荡数秒,13000-15000g室温离心3分钟,弃上清。
14. 重复上步清洗一次。注意:75%乙醇洗两次有助于去除PCR 抑制物。
15. 短暂离心,吸弃残留的75%乙醇(约50μL),室温晾干。注意:一定要去除残留的75%乙醇,否则会影响后续反应和电泳上样(样品会飘走)。
16. 加入30μl TE缓冲液溶解沉淀。注意:不知道样品DNA产率前最好不要加过多TE。如果DNA浓度高,可以再加TE 稀释。如果DNA 有颜色,可以使用柱式腐殖酸清除剂(BTN60801)纯化一次。
17. DNA 即可用于电泳、酶切和PCR等反应。最好用原液和稀释液对照做PCR,最好按PCR 终体积的1/10 加入随赠的PCR 抑制物清除剂(BTN60804)。
北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒,更多试剂产品需求,欢迎来电咨询选购红细胞裂解液B型(流式细胞分析用)价格厂家。
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文献和实验细胞类型中,相应抗原的表达量,可以粗略地将抗原分子分为三类: 1. 很容易鉴定、容易区分阴阳性细胞群、阴阳性峰明显分开的抗原。例如:CD3,CD4,CD19 等。 2. 很容易鉴定、较高水平表达、经常连续性表达。例如:CD27,CD28,CD45RA, CD45RO 等。 3. 低水平表达、激活性 Marker、未知但关键。例如:CD25,STAT5,Foxp3 等。 表达量的强弱,可以参考厂家的质检结果,但更多地需要参考文献里具体细胞群体的表达。 第三步、了解实验所用流式细胞仪的配置
。 实验类型:大多数只标明用于WB、IP、IHC、IF、ChIP的抗体都不适用于流式实验(FC,flow cytometry)。选择标明用于FC实验的抗体,并有引用文献和实验数据图。 克隆号:有一些标记物有多个克隆号,选择文献报道中使用多,荧光标记种类多的克隆号。 厂家和批号:不同厂家或同一厂家生产的不同批号的相同荧光的相同标记物的抗体,荧光染料的强度可能有少许差别,不建议一次实验混合使用。 2、流式抗体荧光标记的方式包括直接标记和间接标记两种。 在流式实验过程中,直标抗体一抗上连接有荧光染料,间标
流式细胞技术(Flow cytometry, FCM)是利用流式细胞仪进行的一种单细胞定量分析和分选技术。流式细胞术是单克隆抗体及免疫细胞化学技术、激光和电子计算机科学等高度发展及综合利用的高技术产物,它能有效地从单细胞水平区分异质性细胞群体,检测对象包括但不限于悬浮细胞、贴壁细胞或从实体组织分离的单细胞悬液和其他生物颗粒。 一、细胞表面染色步骤 样本准备 1.1 采集全血或组织(脾,淋巴结,胸腺和骨髓),用细胞染色buffer(或含1%BSA的PBS)制成单细胞悬液。对于体外
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