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文献和实验= 抗原(待测)-抗体 + 抗体-抗原-ED抗体-抗原-ED 具有酶的活性,加底物显色。一类是抗体能增强酶的活性,将甲状腺素(T-)与苹果酸脱氢酶(MDH)共价结合成酶标记物后,MDH活性被抑制;当标记抗原与特异性抗体结合时,被抑制的酶的活性可逆性地恢复;如样品中T4含量增多,竞争结合抗体,MDH活性仍被抑制;酶的活性与待测样品中抗原的量成反比。上述酶标抗原与抗体结合后,酶的活性增强与减弱是由于抗原与抗体的结合位置邻近酶的活性中心。也有用直接与酶活性中心反应的辅助因子或底物等小分子化合物标记
机制比较复杂,不仅需借助苹果酸、草酸乙酸的氧化还原,而且还要借助α酮酸与氨基酸之间的转换,才能使胞液中来的NADH的还原当量转移进入线粒体氧化,具体过程如图6-10。 图6-10 苹果酸-天冬氨酸穿梭� GOT:谷草转氨酸;MDH:苹果酸脱氢酶 当胞液中NADH浓度升高时,首先还原草酰乙酸成为苹果酸,此反应由苹果酸脱氢酶催化,胞液中增多的苹果酸可通过内膜上的二羧酸 载体 系统与线粒体内的α酮戊二酸交换;进入线粒体的苹果酸,经苹果酸脱氢酶
酸和苹果酸脱氢酶(MDH)反应,生成苹果酸,同时将NADH氧化成NAD+;在340n波长处吸光度的降低与样品中HCO3-含量成正比。反应式如下:~ 2标本采集与处理: 21受者准备:病人应处于安静、呼吸稳定的状态,穿刺时应尽量减少病人的疼痛感。坐位与卧位、睡眠后与清醒时、运动后与进餐后都会产生不同的结果。 22静脉采血:除非是卧床的病人,一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布,因此影响测定水平。故在采血前至少应静坐5in。一般从肘静脉取血,使用止血的时间不超过1in,穿刺
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