Hoechst 33342 *超级纯*

Hoechst 33342 *超级纯*

产品描述

Hoechst 33342是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低，在嵌入双链DNA后释放强烈的蓝色荧光。Hoechst 系列染料因与DNA结合的特性，也常被用来进行线粒体DNA的观察。

Hoechst33258和Hoechst33342是两种非常相近的Hoechst染料，他们都在紫外段350 nm被激发，发射波长都为461 nm，两种染料经常被用来替代另一种荧光染料DAPI. Hoechst 33342比33258具有更强的亲脂性，因此能更好的透过完整的细胞膜，在部分实验中Hoechst33258的细胞透过性存在明显不足。用于细胞核染色时，推荐的Hoechst 33342工作终浓度为0.5～5 μM，在一些敏感性实验时，最好设置多个染色浓度，以获得最佳染色效果。

订购信息

运输与保存

蓝冰运输。-20℃干燥避光保存，有效期12个月。

产品参数

使用方法

1.        缓冲液制备：用PBS或合适的缓冲液制备10～50 μM Hoechst 33342染色液。李记生物也提供配制好的20 mM Hoechst 33342（货号:AC12L021）产品，既方便存放，以方便稀释备用。

2.        固定的细胞或组织染色：

对于固定的细胞或组织样品，固定后适当洗涤去除固定剂。依次按步骤进行免疫荧光染色，和Hoechst 33342染色。如果不进行免疫荧光染色，则直接按步骤进行Hoechst 33342染色。

(1)     对于贴壁细胞或组织切片：加入适量Hoechst 33342染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞：至少加入待测染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3～5 min。

(2)     吸除Hoechst 33342染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2～3次，每次3～5 min。

(3)     直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350 nm，发射波长461 nm。

3. 活细胞或组织染色：

(1)     细胞培养物中加入适量Hoechst 33342染色液，约1/10细胞培养基体积，必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1 mL染色液，对于96孔板一个孔需加入100 μL染色液。

(2)     在37℃培养细胞10～20 min。

(3)     用PBS或合适的缓冲液洗细胞2次。

(4)     直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350 nm，发射波长461 nm。

注意事项

1.     本产品仅限于科学实验研究使用，不得用于临床诊断、治疗等领域。 

2.     Hoechst 33342溶于水，溶解度可达20 mM(约10mg/ml)。也可直接购买5 mL（20 mM）的液体规格产品（货号:AC12L021）。

3.     Hoechst 33342对人体有一定刺激性，请注意适当防护。

4.     荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。

5.     为减缓荧光淬灭可以使用李记生物的抗荧光淬灭封片剂（货号：AC28L532）。

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