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- 2025年07月14日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
60
- 英文名：
Hoechst 33342 Staining Solution
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海研生
- 保存条件：
低温冷藏
- 规格：
10ml|50ml
一、Hoechst 33342染色液规格分离与培养：
1、无菌条件下，取出1-3d 龄SD大鼠心房组织，然后用PBS将此组织块清洗2次，最后将组织剪成1mm3左右大小；
2、往组织块中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶），混悬10s，置37℃条件下消化10min，之后用滴管吹打制成单细胞悬液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置；
3、剩下的组织再加入3～4mL酶消化液，混悬10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置，重复此步骤2-3次，直至组织完全被消化；
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液，1200r/min 离心10min，弃去上清，沉淀细胞用含有10％ FBS DMEM/F12培养基混悬，接种于25cm2培养瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培养箱中培养；
5、差速贴壁1h后，吸出培养基，按实验需要接种于6孔板中继续培养；
二、免疫荧光鉴定：
1、待心房肌细胞生长至80%融合时，弃去培养基，用温育的PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后用4%在室温条件下固定细胞15min；
2、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在4℃条件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS冲洗细胞2次，每次10min，然后在室温条件下，用4% BSA封闭细胞30min；
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗，然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜；
5、PBS冲洗细胞3次，每次10min，按1：150的比例稀释抗α-actin的二抗， 37℃条件下放置1h；
6、用PBS冲洗3次，每次10min，最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称：Hoechst 33342染色液规格英文名称：Hoechst 33342 Staining Solution
产品规格：10ml|50ml
发货周期：1～3天
本Hoechst33342染色液可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色，也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。Hoechst33342是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料，对细胞的毒性较低。
Hoechst33342染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst33342也常用于普通的细胞核染色，或常规的DNA染色。
Hoechst33342的最大激发波长为346nm，最大发射波长为460nm；Hoechst33342和双链DNA结合后，最大激发波长为350nm，最大发射波长为461nm。
CAS23491-52-3
分子式C27H28N6O·3HCl·3H2O
分子量615.99
储存条件-20℃避光，有效期一年。
注意事项：
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响，但为取得良好的使用效果，3-6个月内推荐4℃保存，并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
以下是公司正在热销产品：
1-(3-羟基-4-氧基)-3-基-1-酮磷酸烯醇酮酸单环己铵盐/磷酸烯醇酮酸单环胺盐/磷酸稀醇酮单环已铵盐/磷酸烯醇酮酸/2-(膦酰氧基)烯酸环胺盐/磷酸酮酸一环己铵盐/PEP
三正基膦钼酸铵/四水合钼酸铵/钼酸铵四水合物/七钼酸铵/仲钼酸铵/Ammonium molybdate tetrahydrate
酸橙花酯四正基化铵/四基化铵/化四铵/N,N,N-三基-1-铵化物/TBAI
烯酸烯酯四正基化铵/N，N，N-三基-1-铵化物/四基化铵/化四铵/TBAC
N,N-二基对四基铵/三基-1-铵物/四基铵/Tetrabutyl ammonium hydroxide
2--4-氨基-5-氧基嘧啶四基化铵/化四基铵/N,N,N-三基-1-铵化物/Tetramethylammonium iodide
4-(三氟基)哒嗪-3,5-二醇磷酸三酯/三基磷酸盐/TEP
磷脂酰甘油 PG亚酸三酯/亚磷正酯/亚三正酯/Tributyl phosphite
KN-62硼酸三正酯/硼酸三酯/三氧基烷/硼酸酯/Tributyl borate
甘草提取物（粉）酸正酯/酸酯/Propyl phenylacetate
Hoechst 33342染色液规格溶剂橙86 1,4-Dihydroxyanthraquinone1,4-二羟基-9,10-蒽二25克实习级，90%
任氏任氏5克BR，90%
卢戈卢戈25克BR
离子交换剂Ⅴ离子交换剂Ⅴ500克BR，
离子交换剂Ⅲ离子交换剂Ⅲ100克98.5%
苦杏仁苷酶β-Glucosidase from almondsβ-糖苷酶5克BR；1250
糊精化酶中温淀粉酶25克BR，4000u/g
成套缓冲剂成套缓冲剂100克CP
ε-PL聚赖1克BR，95%
γ-MDH麦芽糖酶1克BR，20u/ul
γ-Linolenic acid methyl esterγ-亚麻酯1公斤99.5%
γ-Linolenic acidγ-亚油1克CP，75%
γ-L-Glutamyl-β-naphthylamideγ-L-谷酰-2-酰1克BR，
γ-L-Glutamyl-α-naphthylamideγ-L-谷酰-1-酰10克BR，
γ-Globulins from bovine blood牛种球蛋白10kuBR，1000u/mg
培养操作步骤：
1．用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出，用无菌丝绸布擦拭干净，不要用纱布；
2．将盖玻片轻轻放入6孔培养板（每孔一片）或培养皿中（每个平皿可放置2-3片）；
3．在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时；
4．将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中，使盖玻片完全浸在培养液中；
5．将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时，将培养板取出，用盖片镊轻轻取出盖玻片，用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
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文献和实验韶光逐浅 我想问一下Hoechst凋亡染色试剂盒国产的哪个公司的好啊？ yunitongxing 原装进口试剂 韶光逐浅 好的，多谢啦 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号：shixiongcoming
%乙醇中浸泡5分钟或更长时间，无菌超净台内吹干或用细胞培养PBS或0.9%NaCl等溶液洗涤三遍，再用细胞培养液洗涤一遍。将盖玻片置于六孔板内，种入细胞培养过夜，使约为50%-80%满。B. 刺激细胞发生凋亡后，吸尽培养液，加入0.5ml固定液，固定10分钟或更长时间（可4℃过夜）。C. 去固定液，用PBS或0.9%NaCl洗两遍，每次3分钟，吸尽液体。洗涤时宜用摇床，或手动晃动数次。D. 加入0.5ml Hoechst 33258染色液，染色5分钟。也宜用摇床，或手动晃动数次。E. 用PBS
Hoechst33258（或Hoechst33342）染色法检测细胞凋亡
Hoechst33258 （或Hoechst33342）染色法检测细胞凋亡 【材料与试剂】 Hoechst33258染液：称取Hoechst33258（或Hoechst33342）1mg，用20ml蒸馏水溶解，过滤，4℃避光保存。用时用蒸馏水10倍稀释成染色液，pH7.0。 固定液：4%多聚甲醛。 荧光显微镜。 【操作方法】 将制备好的石蜡切片按常规脱蜡、水化，用PBS洗5min； 或冰冻切片用冰丙酮固定15min，吹干，用PBS洗5min； 或细胞
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