- ¥460
- YANJIN
- 国产/进口
- YDH101-01
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
室温储存
- 保质期：
18个月
- 英文名：
Midi Purification Kit
- 库存：
500
- 供应商：
上海研谨生物
- 规格：
100次
Midi Purification Kit
产品介绍：
在高离序盐存在的情况下，DNA 片断选择性的吸附于离心柱内的硅基质膜上，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，漂洗
液将引物、核苷酸、蛋白、酶等杂质去除，最后用低盐、高 pH 值的洗脱缓冲液将纯净 DNA 从硅基质膜上洗脱。
产品特点：
- 离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的
- 使用了优质溶胶液，不含传统溶胶液的碘化那和高氯酸盐，不抑制回收后酶切、连接克隆等下游反应。
- 溶胶液调制成为了黄颜色，便于观察溶胶效果和监测 pH 值变化从而达到最理想结合效果，大大提高回收效率。
- 注意事项:
- 所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在 37℃水浴加热几分钟，即可恢复
- 储存于低温（4℃或者-20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃-25℃）进行。
- 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH 值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
- 溶胶液中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要立即用大量清水或者生理盐水冲洗。
- 回收纯化的DNA片段一般在100bp到40kb之间，过长、过短片段的回收效率降低。
- 回收DNA的量和起始DNA的量、洗脱体积、DNA片断大小有关。一般1-20μg， 100bp-5kb的DNA片段，回收率可高达85%-95%。
- 切胶回收时，紫外灯观察对DNA片段有损坏作用，应该尽可能使用能量低的长波紫外线，并且尽可能的缩短紫外线下处理的时间。
- pH值≤7.5时，吸附膜吸附DNA的效率最&&高。如果切下来的凝胶中含有电泳缓冲液太多，造成溶胶后溶胶液pH偏高，会导致回收率降低。溶胶后，如果溶胶液依旧保持黄色，说明pH正常；如果变成橘红色或者淡紫色，说明pH偏高，可在胶充分溶解后加5-10μl
- 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA， 不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱， 但应该确保pH大于7.5， pH过低影响洗脱效率。用水洗脱，DNA片段应该保存在-20℃。DNA片段如果需要长期保存，可以用TE缓冲液洗脱（10mM Tris-HCl，1mM EDTA， pH 8.0），但是EDTA可能影响下游酶切反应，使用时可以适当稀释。
提示：第一次使用前请先在漂洗液 WB 中加入指定量无水乙醇，加入后请及时打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!
- 在长波紫外灯下，用干净刀片将所需回收的 DNA 条带切下，尽量切除不含 DNA 的凝胶，得到凝胶体积越小越好。
- 将切下的含有 DNA 条带凝胶放入 1.5ml 离心管，称重。
- 加 3 倍体积溶胶液 DD。（凝胶重为 100mg，则加入 300μl 溶胶液）
如果凝胶浓度大于 2％，应加入 6 倍体积溶胶液。
4.56℃水浴放置 10min（或直至胶完全溶解）。每 2-3min 涡旋震荡一次加速溶解。- 可选,：每 100mg 最初的凝胶重量加入 150μl 的异丙醇，震荡混匀。
- 将上一步所得溶液加入吸附柱 EC 中（吸附柱放入收集管中），室温放置 1min，12,000rpm 离心 30-60sec，倒掉收集管中的废液。
- 加入 500μl 漂洗液 WB （请先检查是否已加入无水乙醇!），12,000rpm 离心 30sec，弃掉废液。
- 重复操作步骤 7。
- 将吸附柱 EC 放回空收集管中，12,000rpm 离心 2min，尽量去除漂洗液，以免漂洗液中残留的乙醇抑制下游反应。
11.在吸附膜的中间部位滴加洗脱缓冲液 EB（洗脱缓冲液事先在 65-70℃水浴中加热效果更好），室温放置 2min，12,000rpm 离心
1min。如果需要较多量 DNA，可将得到的溶液重新加入吸附柱中，离心 1min。(注意：洗脱体积不应小于 30μl，体积过少影响回收效率)
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文献和实验Recoveries10078700711000772027474361359416322313029Millipore先进的膜技术使得Millipore纯化系列其实在自动化高通量领域有相当好的口碑，价格实惠质量可靠。4.经济实惠的国产之选 在普通级胶回收中应该提及的是一些国产品牌，毕竟在现今胶回收技术成熟并得到了广泛应用的基础上，一些国产品牌也提供了经济实惠的胶回收试剂盒，比如天根，杭州维特洁，深圳天地人，等等。低廉的价格，使得平时用起来也挥洒自如不心疼，如果说进口产品打开的实验自由化之门，那么跟进的国产产品则实实在在让国内科研经费紧张的实验室也能分享简化实验的快乐，穷人的孩子也有春天
国产产品的对比，当然，参数是厂家提供的，标准有差别的。 品牌 天根（天为时代） 杭州 维特洁（已被Axygen收购）深圳天地人Omega产品普通琼脂糖凝胶回收试剂盒AxyPrep DNA凝胶回收试剂盒小量胶回收试剂盒琼脂糖凝胶回收试剂盒回收片段大小100bp-10kb75bp-10kb50bp-20kb回收率>80%（100 bp的DNA片段回收率为50 %以上）60�85%（根据长度不同）85%产品描述可以高效、专一结合DNA的硅基质材料和独特的缓冲
江janice 求助：用的是天根 的胶回收试剂盒，11管PCR产物，差不多500微升的总体积，上四个孔电泳，电泳后用天根的盒子回收到四个EP管，每管40微升，取5微升电泳，居然没有成功，又取10微升电泳还是没有任何条带，不知道可否有人用天根的盒子，是否遇到这方面的问题，一般100微升的PCR产物，回收到多少体积比较恰当，纠结啊，回收了好几次电泳都没有目的条带，盒子是刚买的新盒子，谢谢好心人帮助 大鹏鸟 天根的盒子还是很好
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