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见产品包装
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500
- 供应商:
上海研谨生物
- 规格:
200次
植物基因组DNA提取试剂盒(CTAB粗提法)
产品简介:
从植物组织中制备基因组DNA较常采用的方法有氯化离心法、CTAB抽提法等。CTAB抽提法是经典迅速的植物DNA提取法,可以用于多种不同类型植物样品DNA的提取,获得的量很高,但是纯度-般,但是足够用于大多数分子生物学实验。
植物基因组DNA提取试剂盒(CTAB粗提法)是简单快速简便的提取植物总DNA的试剂盒,先将新鲜植物样本研磨破碎细胞壁,加入CTAB抽提液使细胞膜破裂同时将核酸与植物多糖等杂质分开。该试剂盒中CTAB 抽提液的有效成分为CTAB(十六烷基三乙基*溴化铵),经蛋白清除液等去除蛋白,即可获得植物基因组DNA, 可进行酶切、PCR等下游实验。
产品组成:
编号
Storage
名称 50T 100T
试剂(A): CTAB抽提液 250 ml 500 ml RT
试剂(B): 2- ME 5 ml 10ml RT避光
试剂(C): DNA沉淀液 250 ml 500 ml RT
试剂(D): DNA洗涤液 250 ml 500 ml
试剂(E): TE buffer 10 ml 20 ml RT
使用说明书 1份
自备材料:
1、液氮\研钵或匀浆 器
2、离心管
3、恒温 箱或水浴锅
4、氯仿U异戊&&醇(24:1)
5、离心机
操作步骤(仅供参考): .
1、取5ml或适量的CTAB抽提液,按CTAB抽提液: 2- ME=50: 1的比例混匀,置于15ml或其他规格的离心管中,60C预热。
2、称取10~1 5g或适量新鲜植物组织或叶片,用预冷的液氮或干冰冷却研钵或匀浆器,将新鲜植物组织或叶片粉碎成细粉末,将冷冻的组织转移至离心管中。
3、向粉碎后的组织中加入预热的CTAB抽提液,充分混匀,65"C温育30~60 min,并不时混匀。
4、加入等体积氯仿异**&戊醇(24:1),轻轻颠倒混匀,8000g 离心8min,回收.上层水相(即上清液,该上清液中含有所需DNA)。
5、转移上清液至新的离心管中,加入1/2~2/3体积预冷的DNA沉淀液,轻轻混匀,室温静置使核酸沉至管底。如果观察不到沉淀,可在室温下静置数小时至过夜。
6、2000g离心2min,轻轻弃上清液。
7、在松散的DNA沉淀物上加入DNA洗涤液(如果使用15ml离心管,加入1ml洗涤液,如果15ml 离心管,加入8-10ml洗涤液),室温静置20min,4000g离心10min, 轻轻弃.上清液。
8、自然干燥DNA,加入10~201 TE buffer, -20C保存。注意: TE buffer体积越大,
DNA浓度越低。
注意事项:
1、如果每次的使用量很小,可以适当分装后再使用。
2、用于裂解植物组织或叶片越新鲜,裂解越好、收获量越大。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:
12个月有效。
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文献和实验以下操作按照天根产品 DP305 植物基因组 DNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物叶片 研钵 液氮2. 无水乙醇 巯基乙醇3. 移液器及配套无菌枪头(10 μl, 200 μl ,1ml),1.5 ml离心管4. 涡旋振荡器,金属浴/水浴,实验准备-试剂盒准备1:使用前先在漂洗液PW和GD中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。实验准备-试剂盒准备2:准备实验时,将缓冲
/L KAc(4) RNaseA 10mg/ml(5) 异丙醇(6)灭菌ddH2O或TE3. 仪器: 离心机, 恒温水浴, 台式高速离心机,电泳装置二 实验程序1取幼嫩的组织材料1-2g,用蒸馏水冲洗干净,再用灭菌ddH2O冲洗2次,放入经液氮预冷的研钵中,加入液氮研磨至粉末状,用干净的灭菌不锈钢勺转移粉末到加有500μL提取液的离心管中,轻轻混匀。2 向管中加入50μL20%SDS溶液,混匀,不可过于强烈震荡以防基因组DNA断裂 ,65℃保温10min,并不时摇动。3 加入150μL 5mol
以下操作按照天根产品 DP432 植物总 RNA 提取试剂盒的说明书进行,所有反应现象仅适用于该产品及本文所标明的样本量。如使用其它操作流程或产品,样本量不同可能现象与本文有所差异。实验准备:1. 植物样品(10-20 mg),研钵,液氮2. 无水乙醇,β-巯基乙醇3. 一次性无菌注射器(DNase I配置),移液器及配套RNase-Free无菌枪头(200 μl ,1ml) 1.5 ml,2.0ml 离心管(RNase-free)4. 通风橱 涡旋振荡器 金属浴 台式低温离心机本文版权归天
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