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琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒

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  • 泽叶生物
  • ZY511-100T
  • 中国
  • 2025年07月10日
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    • 英文名

      Agarose gel DNA Recovery Kit

    • 保质期

      一年

    • 供应商

      上海泽叶生物科技有限公司

    • 保存条件

      RT

    • 规格

    琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒

    中文名:琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒

    英文名:Agarose gel DNA Recovery Kit

    CAS:N/A

    级别:N/A

    分子量:N/A

    分子式:N/A

    纯度:N/A

    储存条件:RT
    产品简介

    产品说明: 

    本试剂盒适用于从琼脂糖凝胶电泳中回收100bp-50kb大小DNA片段。其原理是利用溶胶液融化凝胶,然后使用特殊材质制成的吸附柱高效特异的吸附DNA片段,再用TE Buffer或灭菌去离子水洗脱DNA片段。一般可在30分钟内完成操作。本试剂盒的吸附柱的最大吸附量可达40 µg ,DNA回收效率高达85%以上;电泳凝胶不必使用低熔点的琼脂糖;回收的DNA片段纯度较高,可直接用后续的各种酶促反应、DNA连接、DNA测序等。

    操作步骤:

    1. 将琼脂糖凝胶电泳后的单一目的片段切出,放入1.5 ml灭菌离心管中,加入约3倍凝胶量的溶胶液(体积比,0.1 g凝胶视为100 µl),65℃加热5-10分钟使胶块完全融化。

    2. 所得液体(降至室温)加入吸附柱中,室温静置2分钟(特别重要),12,000转/分 离心30秒,弃去离心管中液体。

    3. 向吸附柱中加入500-600 µl洗涤液,12,000转/分 离心 30秒,弃去离心管中液体。重复此步骤一次。

    4. 再于12,000转/分 离心3-5分钟,或置于50℃烘箱彻底烘干。将吸附柱转移至1.5 ml离心管中。

    5. 加入预热65℃-100℃ TE Buffer或灭菌去离子水(pH值7.5-8.0)30-50 µl静置2分钟,12,000转/分 离心2分钟,离心管内的液体即含有目的DNA片段。

    使用中注意事项:

    1. 切胶时尽量减小胶块的体积,胶块过大会影响DNA片段回收的效率;切碎胶块有利于凝胶的融化。 

    2. 胶块完全溶解所需时间因凝胶的浓度、大小不同而不等,凝胶浓度大于2%,适当增加溶胶液的量。

    3. 步骤4务必保证彻底清除吸附柱中的残液。

    4. 步骤5根据回收产物的量,建议适当多加TE Buffer或灭菌去离子水;保证去离子水pH值7.5-8.0。

    5. 为提高回收量,可将步骤5离心所得的溶液重新加入吸附柱中,静置2分钟,再次离心2分钟。

    6. DNA产物应保存在-20℃,以防降解。

    DNA浓度及纯度检测:

    可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度和纯度。DNA在OD260处有显著吸收峰,OD260 值为1相当于50µg/ml双链DNA,40µg/ml单链DNA。OD260 /OD280 比值应为1.7-1.9,如用去离子水洗脱,比值会偏低,但不表示纯度低。

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