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Taq DNA Polymerase (5U/μl, Buf

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  • YANJIN
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  • 2025年07月14日
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      500

    • 供应商

      上海研谨生物

    • 规格

      500U

    介:
    Taq DNA Polymerase
     
    Taq DNA Polymerase 是通杆菌表达化的重组酶,其基因来源于 Thermus aquaticus polymerase蛋白分子量 94 kDa,具有 5′→ 3′DNA 聚合活性和 5′
    → 3′外切核酸活性,无 3′→ 5′外切核酸活性,增得到的 PCR 3′端附有一个
    “A”碱基,因此可直接用于  T/A  克隆。本品具有延伸速度快、增效率高的特点,主要适用于 PCR DNA 片段、DNA 序列定等实验

     

    成:

    Taq DNA Polymerase(5U/μl)
    10×Taq PCR Buffer
    500U
    1 ml
    1000U
    2×1ml
    1
    -20℃
    -20℃
     

    位定用活性化的大精子 DNA 模板 / 引物,在 74℃30 内,将
    10nmol 脱氧核苷酸入到酸性不溶物所需的量定义为 1 个活性位(U),5U/ul

    控:经过多次柱化,SDS-PAGE 检测度大于 99%经检测无外源核酸活性;
    PCR 方法检测无宿主残余  DNA;能有效地增人基因中的基因;室温存放一个月, 无明活性改

    操作步骤(供参考)
    以下 PCR 体系和反条件,实际操作中根据模板、引物构和目的片段大小不同行相的改化。
    1. PCR 体系(50μl)
     
    试剂 加入量 终浓
    10×Taq PCR Buffer 5μl
    dNTP Mix2.5 mM each 4μl 200μM each
    Forward Primer10μM 2μl 0.4μM
    Reverse Primer10μM 2μl 0.4μM
    Template DNA <1μg <1μg/reaction
    Taq DNA Polymerase(5U/μl) 0.25μl  

     


    RNase-Free Water          up to 50μl
    注意:
    a、引物终浓 0.1-1.0μM  为设定范的参考,增效率不高的情况下,可提高引物的度;生非特异性反应时,可降低引物度。
    b、本品的 10×Taq PCR Buffer 中含离子(MgCl2 20mM),无需独配制。
    1. PCR 条件
     
    步骤 温度 时间  
    预变性 94℃ 2min  
    变性 94℃ 30s  
    退火 54-65℃ 30s 25-35 个循环
    延伸 72℃ 30s  
    终延伸 72℃ 2min  
     

    注意事

    1、一般退火温度比增引物的熔解温度 Tm 5℃,无法得到理想的增效率,适当降低退火温度;生非特异性反应时,提高退火温度,由此化反条件。
    2、延伸时间应根据所增片段大小定,本Taq DNA Polymerase 增效率
    1kb/30s
    3 可根据物的下游定循数。如果循次数太少,增量不足;如果循次数太多,配机率会增加,非特异性背景重;在保证产物得率的前提下尽量减少循次数。
    4、避免反复冻融,否效率会降低;10×Taq PCR Buffer 可以分装成小份使用。
    5了您的安全和健康,穿实验服并戴一次性手套操作。

    有效期:Taq DNA Polymerase -20℃ 36 个月有效; 10×Taq PCR Buffer -20℃ 12 个月有效。
    货号 品牌/规格/主要参数 市场价 货期  
    R23149-500U   ¥60.00元 2-3天  
    R23149-1000U   ¥108.00元 2-3天  

     

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