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- 保存条件:
低温
- 保质期:
见产品包装
- 库存:
500
- 供应商:
上海研谨生物
- 规格:
500U
→ 3′外切核酸酶活性,无 3′→ 5′外切核酸酶活性,扩增得到的 PCR 产物 3′端附有一个
“A”碱基,因此可直接用于 T/A 克隆。本产品具有延伸速度快、扩增效率高的特点,主要适用于 PCR 法扩增 DNA 片段、DNA 序列测定等实验。
产品组成:
Taq DNA Polymerase(5U/μl)500U
1 ml
1000U
2×1ml
1 份
-20℃
-20℃
单位定义:用活性化的大马哈鱼精子 DNA 作为模板 / 引物,在 74℃,30 分钟内,将
10nmol 脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为 1 个活性单位(U),浓度:5U/ul
质控:经过多次柱纯化,SDS-PAGE 检测其纯度大于 99%;经检测无外源核酸酶活性;
PCR 方法检测无宿主残余 DNA;能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;室温存放一个月, 无明显活性改变。
操作步骤(仅供参考):
以下举例为常规 PCR 反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
- PCR 反应体系(50μl)
| 试剂 | 加入量 | 终浓度 |
| 10×Taq PCR Buffer | 5μl | 1× |
| dNTP Mix,2.5 mM each | 4μl | 200μM each |
| Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Template DNA | <1μg | <1μg/reaction |
| Taq DNA Polymerase(5U/μl) | 0.25μl |
RNase-Free Water up to 50μl
注意:
a、引物浓度请以终浓度 0.1-1.0μM 作为设定范围的参考,扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度。
b、本产品的 10×Taq PCR Buffer 中含镁离子(MgCl2 20mM),无需单独配制。
- PCR 反应条件
| 步骤 | 温度 | 时间 | |
| 预变性 | 94℃ | 2min | |
| 变性 | 94℃ | 30s | |
| 退火 | 54-65℃ | 30s | 25-35 个循环 |
| 延伸 | 72℃ | 30s | |
| 终延伸 | 72℃ | 2min |
注意事项:
1、一般退火温度比扩增引物的熔解温度 Tm 低 5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。2、延伸时间应根据所扩增片段大小设定,本产品Taq DNA Polymerase 的扩增效率为
1kb/30s。
3 可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重;在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
4、避免反复冻融,否则效率会降低;10×Taq PCR Buffer 可以分装成小份使用。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期:Taq DNA Polymerase -20℃ 36 个月有效; 10×Taq PCR Buffer -20℃ 12 个月有效。
| 货号 | 品牌/规格/主要参数 | 市场价 | 货期 | |
| R23149-500U | ¥60.00元 | 2-3天 | ||
| R23149-1000U | ¥108.00元 | 2-3天 |
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文献和实验This is a protocol from Engelke et.al.(1990)which was modified by Dr.Baron.The enzyme has been used for RT-PCR,genotyping and cloning.Solutions1000X IPTG0.5M IPTG 1.19g IPTGup to 10 ml wih sterile Qfilter and store at -20℃Buffer A50 mM Tris 7.9 25
High Specificity PCR Amplification Using AccuPrime Taq DNA Polymerase
Taq DNA Polymerase 0.25 µl 0.5 µl 1 µl Autoclaved distilled water To 10 µl To 25 µl
Dideoxy Sequencing Reactions Using Taq Polymerase
where ambiguities are frequently found on the gels (see Fig.1 ). Currently several companies have developed sequencing kits using Tuq DNA polymerase. We have tried the TAQenceTM (U.S. Biochemicals, Cleveland, OH) and the Tuq multiwellTM (Amersham, Arlington Heights
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









