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上海三抒生物科技有限公司
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3844-45-9
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上海三抒生物科技有限公司是一家从事于生物化学行业 的企业,公司致力于为实验室分析领域提供一站式服务,为用户提供专业、快捷、可靠的全方位服务。 公司能为广大用户提供各种技术平台服务。我们提供的产品主要有:生化试剂(elisa试剂盒、生化试剂盒)、通用试剂、抗体、细胞、中间体、培养基、对照品/标准品、实验室耗材等,同时我司能以优惠的价格为您提供各种进口的生物化学试剂、抗体以及仪器设备等。
上海三抒生物科技有限公司将一直致力于生物、化学、医药、精细化工、食品工业、现代农业、地质矿产、生命科学、环境保护、疾病控制、新能源等领域的长远发展,一如既往地秉承专业的服务精神,真诚的服务理念和客户至上的服务宗旨,更好地服务于全体用户,为用户提供性价比最高的产品和最专业的技术服务!
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文献和实验一、目的 学习和掌握考马斯亮蓝G-250 测定蛋白质含量的原理和方法。二、原理 考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250 在游离状态下呈红色,最大光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在595nm 波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白
间接法免疫荧光组织化学染色步骤 1.检测抗原法以单层细胞培养标本为例介绍此法的染色步骤: (1)取出细胞贴附生长的小盖片,用预热的PBS冲洗2次; (2)4%多聚甲醛(或冷丙酮)固定5~10分钟,晾干; (3)0.01MPBS(pH 7.4)漂洗3次,每次5分钟。 (4)0.3%Triton X-100孵育,室温20分钟,PBS漂洗2次(细胞膜抗原可省略此步骤); (5)非免疫血清(或15%小牛血清)孵育,室温10分钟; (6)滴加特异性一抗(如小鼠
加三蒸水定容至500ml,使用前加PMSF至1%。 1.2 蛋白提取(此步在冰上进行) 组织称重,切碎,以每克组织加3ml RIPA裂解液,冰上以匀浆器匀浆,转到小离心管中,冰上放置40分钟,使其蛋白质充分裂解。4?C ,10000rpm,离心10min,取上清,转入小tube管中,-20 ℃贮存备用。 1.3 蛋白定量 Bradford 法定蛋白的原理:考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种
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