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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
阴凉干燥
- 保质期:
长期
- 英文名:
T4 DNA ligase
- 库存:
533
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括北京现货T4连接酶品牌在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:北京现货T4连接酶品牌
英文名:T4 DNA ligase
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
本T4 DNA Ligase是从表达T4 DNA Ligase 基因的大肠杆菌经诱导表达后分离纯化而来的,催化相邻DNA链的5’磷酸基团和3’羟基基团以磷酸二酯键结合反应。该酶可催化平末端或粘性末端DNA之间的连接,还可修复双链DNA、RNA、DNA/RNA杂交双链中的单链切口。本品可应用于DNA插入片段和载体DNA的粘性末端和平末端的连接,以及线性DNA的自身环化。
产品组分:
T4 DNA ligase (5U/μl)————————100 U (20μl)
10×T4 DNA Ligation Buffer——————0.2 ml
50%PEG Solution————————————0.15 ml
活性定义:此酶的活力单位为Weiss Unit。1个Weiss Unit相当于约200个粘性末端连接单位(cohesive-end ligation unit, CEU)。1个CEU单位定义为在20μl的连接反应体系中,在16℃30分钟内,能使50%的经HindIII消化的λDNA片段连接所需的酶量。
注意事项:
1、T4 DNA Ligase的最终用量不要超过推荐的用量,否则影响连接效率。
2、PEG可以极大提高平末端的连接效率,我们推荐加入终浓度为5% PEG Solution以提高平末端的连接效率。
3、为了提高转化效率,转化时建议所加入连接产物的量不要超过感受态细胞体积的10%。
4、由于T4 DNA Ligase中含有甘油,比较粘稠容易挂壁,建议使用前短暂离心将液体收集到管底,取样时枪头尽量不要深入液面太深以免粘在枪头上造成损失。
储存条件:-20℃。
北京现货T4连接酶品牌极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·5×加A反应液
编号:RFT097
英文名称:5×A-plus MasterMix
规格:20次(200μl)
本品由pfu、Pwo、Vent或KOD等有3’→5’外切酶活性的高保真DNA聚合酶扩增的PCR产物为不带A尾的平末端DNA片段,如该平末端DNA片段需要和T载体相连接,需要先利用加A反应液在平末端片段后加上A尾后才能与T载体的T头互补连接。本MasterMix提供了加A尾需要的所有成分,可以在20分钟左右完成整个过程。用于平末端片段的加A反应。
使用方法:
1、平末端PCR产物用PCR产物纯化试剂盒(无非特异扩增;货号RTP2202)或凝胶回收试剂盒纯化(有非特异扩增,货号RTP2201)回收。
2、纯化后的平末端DNA片段按照以下反应体系加A,全量为50μl:
平末端DNA片段——————0.5~5μg
5×加A反应液-——————10μl
ddH2O——————————up to 50μl
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期一年。
·λDNA/HindIII(125~23130bp)
编号:RFT026
英文名称:5×A-plus MasterMix
规格:100次(2×25μg/2×250μl)
本产品是由λDNA经HindIII完全酶切而成,适用于琼脂糖凝胶电泳中DNA条带的分析。产品浓度为0.1μg/μl,已含有1×loading buffer,可直接取2-5μl上样,使用方便。8条带的大小分别为125,564,2027,2322,4361,6557,9416,23130bp。
使用方法:
1.65℃加热5分钟,立即冰浴3分钟,取2-5μl本产品加入到琼脂糖凝胶的加样孔中。
注:根据梳子的厚度和宽度进行上样。每1mm×1mm(厚度×宽度)加样孔上样1μl。窄齿梳子(一般为1mm×2mm)上样2μl;宽齿梳子(一般为1mm×5mm)上样5μl。如果使用厚齿梳子或宽于5mm的梳子,可以适当调整上样量。
2. 建议电泳条件:凝胶浓度为1.0%,凝胶长度10cm,电泳电压4-10v/cm,电泳时间45分钟。
3. 通过EB染色后紫外灯下观察条带。
注意事项:
1. λDNA酶切Marker的末端容易由COS末端结合在一起,电泳前65℃预热5分钟能解开结合的COS末端,得到更清晰的电泳图像。如果不预热,23130bp和4361bp会结合形成27491bp的额外片段,同时电泳后4361bp亮度会明显弱于其他片段。
2. 琼脂糖的质量对DNA的电泳有很大影响,电泳时请尽量使用质量优等的琼脂糖。
3. 请使用新鲜配制的电泳缓冲液和新鲜配制的琼脂糖凝胶进行电泳,以保证Marker良好的分离效果。
储存条件:-20℃,有效期1年。
北京现货T4连接酶品牌关键词:T4 DNA ligase,RFT168,T4连接酶
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北京现货T4连接酶品牌关键词:T4 DNA ligase,RFT168,T4连接酶
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