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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
Colorimetric TUNEL Apoptosis Assay Kit
- 库存:
210
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法)促销,我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法)促销
编号:YT137
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
规格:20次|50次
本试剂盒提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于待检测的细胞或组织样品,经过生物素标记和后续的DAB显色等步骤,即可在普通光学显微镜下观察到凋亡细胞。本试剂盒足够检测20个样品。
试剂盒组分:
TdT酶———————————40μl
Biotin-dUTP————————960μl
TdT酶稀释液(选用)—————500μl
Streptavidin-HRP——————22μl
Streptavidin-HRP稀释液———1ml
DAB显色液A————————6ml
DAB显色液B————————6ml
标记反应终止液——————6ml
细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNA ladder。基因组DNA断裂时,暴露的3"-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)的催化下加上生物素(Biotin)标记的dUTP(Biotin-dUTP),随后和辣根过氧化物酶(HRP)标记的Streptavidin (Streptavidin-HRP)结合,最后在HRP的催化下通过DAB显色来显示凋亡细胞,从而可以通过普通光学显微镜检测到凋亡的细胞,这就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。
本试剂盒有如下优点:
(1)高灵敏度:背景染色极低,阳性染色强,可以在单细胞水平检测到细胞凋亡,同时由于凋亡早期就有 DNA断裂,可以检测到早期的细胞凋亡。
(2)特异性好:TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞,而不容易标记坏死细胞。
(3)快速:仅需约2-3个小时即可完成。
(4)应用范围广:可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况,也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。
TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂,但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。这样一方面可以把凋亡和坏死区分开,另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。
极少数细胞凋亡时没有DNA断裂,此时不适用TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。在需要严格判断细胞凋亡的情况下,最好同时检测多个凋亡指标。
注意事项:
1. 需自备用于洗涤细胞的PBS或HBSS,用于封片的抗荧光淬灭封片液(YT097)等适当的封片液,用于固定的4%多聚甲醛或向百奥莱博订购免疫染色固定液(YT086),同时需自备含0.1% Triton X-100的PBS或向百奥莱博订购免疫染色洗涤液(YT089)。 需自备过氧化*,除石蜡切片外需自备甲醇。
2. 如果用于石蜡切片的检测,需自备蛋白酶K,二甲*。
储存条件:-20℃。
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·Survivin抗体
编号:YT846
英文名称:anti-Survivin antibody
规格:>20次
本抗体是用经过适当修饰的人Survivin Ser60附近的一段多肽为抗原制备而成的抗Survivin兔单克隆抗体。本抗体如果用于常规的Western检测,至少可以检测20次。
本Survivin抗体可以检测人、小鼠和大鼠蛋白样品,可以检测细胞内源性的Survivin。
Survivin是一种在胚胎发育和重量细胞中高表达的抗凋亡蛋白。Survivin可以结合并抑制Caspase-3,抑制细胞凋亡促进细胞分裂,调控细胞周期G2/M期检验点(checkpoint)。Survivin的Thr34可以被p34 cdc2 kinase磷酸化修饰。Thr34突变的Survivin或Survivin RNAi可以抑制肿瘤生长。
产品组份:
Survivin抗体————20μl
Western一抗稀释液————20ml
抗体参数:
免疫原物种:人
免疫原:人Survivin Ser60附近的一段多肽
克隆性:单克隆
宿主:兔
用途:WB,IP,IC,IHC,IF,FCM
可检测样品:人,小鼠,大鼠
Survivin分子量:16kD
推荐稀释比例:WB(1:1000),IP(1:400),IC(1:400),IHC(1:400),IF(1:1000),FCM(1:400)
注意事项:
1. 在Western实验后,请注意回收稀释的抗体。回收的抗体在进行Western实验时至少可以重复使用10次。稀释后的抗体,包括已经使用过的稀释抗体,4℃保存。
2. 回收后重复使用的抗体,使用方法同新鲜稀释的抗体。如果在重复使用过程中发现抗体出现轻微混浊现象,可以10000g离心1-3分钟,取上清用于后续检测。如果回收的抗体出现明显的絮状物或长霉长菌等情况,则可以考虑废弃该抗体。
3. 对于本抗体,Western检测时一抗要4℃缓慢摇动过夜,如果仅短时间与一抗孵育检测效果较差。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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