相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
39
- 英文名:
Colorimetric TUNEL Apoptosis Assay Kit
- 保质期:
详见说明书
- 供应商:
上海研生
- 保存条件:
低温冷藏
- 规格:
20次|50次
培养操作步骤:
1.TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法)哪家好用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
中文名称:TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法)哪家好
英文名称:Colorimetric TUNEL Apoptosis Assay Kit
产品规格:20次|50次
发货周期:1~3天
本试剂盒提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于待检测的细胞或组织样品,经过生物素标记和后续的DAB显色等步骤,即可在普通光学显微镜下观察到凋亡细胞。本试剂盒足够检测20个样品。
试剂盒组分
TdT酶———————————40μl
Biotin-dUTP————————960μl
TdT酶稀释液(选用)—————500μl
Streptavidin-HRP——————22μl
Streptavidin-HRP稀释液———1ml
DAB显色液A————————6ml
DAB显色液B————————6ml
标记反应终止液——————6ml
细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNAladder。基因组DNA断裂时,暴露的3'-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)的催化下加上生物素(Biotin)标记的dUTP(Biotin-dUTP),随后和辣根过氧化物酶(HRP)标记的Streptavidin(Streptavidin-HRP)结合,最后在HRP的催化下通过DAB显色来显示凋亡细胞,从而可以通过普通光学显微镜检测到凋亡的细胞,这就是TUNEL(TdT-mediateddUTPNick-EndLabeling)法检测细胞凋亡的原理。
本试剂盒有如下优点
(1)高灵敏度背景染色极低,阳性染色强,可以在单细胞水平检测到细胞凋亡,同时由于凋亡早期就有DNA断裂,可以检测到早期的细胞凋亡。
(2)特异性好TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞,而不容易标记坏死细胞。
(3)快速仅需约2-3个小时即可完成。
(4)应用范围广可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况,也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。
TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂,但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。这样一方面可以把凋亡和坏死区分开,另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。
极少数细胞凋亡时没有DNA断裂,此时不适用TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。在需要严格判断细胞凋亡的情况下,最好同时检测多个凋亡指标。
储存条件-20℃。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
注意事项:
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
以下是公司正在热销产品:
2-基二苯酮碳酸钴/碱式碳酸钴/碳酸亚钴/碳酸钴(II)/Coblltous carbonate
D-酒石酸二酯苯并咪唑/苯并二唑/1H-苯并咪唑/1,3-苯并二氮唑/Benzimidazole
愈创木酚磺酸钾2-氨基噻唑/2-氨基-1,3-硫氮唑/2-氨基-1,3-硫氮杂茂/2-Aminothiazole
基二酸二酯2-氨并噻唑/2-苯并噻唑胺/2-苯基噻唑胺/2-Aminobenzothiazole
6-基哒嗪-3[2H]-酮2-氨并咪唑/α-氨基间二氮茚/1H-苯并咪唑-2-胺/2-Aminobenzimidazole
2-[2-(1-嗪基)氧基]醇3-氨基-9-基/3-氨基-N-基/AEC
化亚铜盐酸左旋咪唑/(S)-6-苯基-2,3,5,6-四-咪唑(2,1-B)噻唑单盐酸盐/左旋咪唑/L-2,3,5,6-四-6-苯基(2,1-B)噻唑盐酸盐/左咪唑/左旋四唑/驱虫速/(S)-(-)-6-苯基-2,3,5,6-四咪唑并2,1-b噻唑盐酸盐/Levamisole hydrochloride
2,4-二氧硼酸1-基咪唑/1-基-1H-咪唑/N-基咪唑/1-基甘噁啉/1-Methylimidazole
4-硼酸咪唑/甘噁啉/1,3-二氮唑/间二氮茂/1,3-二氮杂茂/1H-咪唑/甘恶啉/咁噁啉/1,3-二氨杂环戊/1-(2-基基)-4--1H-咪唑并(4,5-c)/Imidazole
3,4,5-三腈1,4-双(5-苯基-2-恶唑)苯/1,4-双(5-苯基-2-噁唑基)苯/2,2-(1,4-亚苯基)双(5-苯基恶唑)/POPOP
TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法)哪家好少突胶质前体细胞分化培养基 规格20mg Mouse Cystatin C ELISA Kit
雪旺细胞培养基 规格20mg Mouse CrossLaps ELISA Kit
星形胶质细胞培养基 规格20mg Mouse Bone-specific Alkphase-B ELISA Kit
小胶质细胞培养基 规格20mg Mouse Osteocalcin ELISA Kit
成纤维细胞培养基 规格20mg Mouse Osteocalcin(OT)ELISA kit
成纤维细胞培养基 规格20mg Mouse Bone morphogenetic protein receptor II ELISA Kit
成纤维细胞培养基 规格20mg Mouse Bone morphogenetic protein receptor 1A ELISA Kit
成纤维细胞培养基-2 规格20mg Mouse Bone morphogenetic protein 7 ELISA Kit
扁桃体上皮细胞培养基 规格20mg Mouse Bone morphogenetic protein 6 ELISA Kit
口腔角质细胞培养基 规格100mg Mouse Bone morphogenetic protein 4 ELISA Kit
肺泡上皮细胞培养基 规格20mg Mouse Bone morphogenetic protein 4 ELISA Kit
支气管上皮细胞培养基 规格20mg Mouse Bone morphogenetic protein 3 ELISA Kit
小气道上皮细胞培养基 规格20mg Mouse Bone morphogenetic protein 2 ELISA Kit
骨骼肌细胞培养基 规格20mg Mouse Bone morphogenetic protein 2 ELISA Kit
上皮细胞培养基 规格20mg Mouse Osteoprotegerin ELISA KIT
1.TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法)哪家好用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
中文名称:TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法)哪家好英文名称:Colorimetric TUNEL Apoptosis Assay Kit
产品规格:20次|50次
发货周期:1~3天
本试剂盒提供了一种高灵敏度又快速简便的细胞凋亡检测方法。对于待检测的细胞或组织样品,经过生物素标记和后续的DAB显色等步骤,即可在普通光学显微镜下观察到凋亡细胞。本试剂盒足够检测20个样品。
试剂盒组分
TdT酶———————————40μl
Biotin-dUTP————————960μl
TdT酶稀释液(选用)—————500μl
Streptavidin-HRP——————22μl
Streptavidin-HRP稀释液———1ml
DAB显色液A————————6ml
DAB显色液B————————6ml
标记反应终止液——————6ml
细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检测,可以发现180-200bp的DNAladder。基因组DNA断裂时,暴露的3'-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)的催化下加上生物素(Biotin)标记的dUTP(Biotin-dUTP),随后和辣根过氧化物酶(HRP)标记的Streptavidin(Streptavidin-HRP)结合,最后在HRP的催化下通过DAB显色来显示凋亡细胞,从而可以通过普通光学显微镜检测到凋亡的细胞,这就是TUNEL(TdT-mediateddUTPNick-EndLabeling)法检测细胞凋亡的原理。
本试剂盒有如下优点
(1)高灵敏度背景染色极低,阳性染色强,可以在单细胞水平检测到细胞凋亡,同时由于凋亡早期就有DNA断裂,可以检测到早期的细胞凋亡。
(2)特异性好TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞,而不容易标记坏死细胞。
(3)快速仅需约2-3个小时即可完成。
(4)应用范围广可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况,也可以检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。
TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂,但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同)。这样一方面可以把凋亡和坏死区分开,另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。
极少数细胞凋亡时没有DNA断裂,此时不适用TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。在需要严格判断细胞凋亡的情况下,最好同时检测多个凋亡指标。
储存条件-20℃。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
注意事项:
尽管经测试Annexin V-FITC反复冻融5次对于其检测效果无显著影响,但为取得良好的使用效果,3-6个月内推荐4℃保存,并适当注意避免反复冻融。
如果有细菌或真菌污染,会严重影响检测效果。
染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
如果细胞收集过程中使用了胰酶,需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC,导致染色失败。
荧光物质均易发生淬灭,在进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
用于流式细胞仪检测时,如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞,并且通过调整相关设置和参数也无法改善,可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测,这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。
需自备PBS。
本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
以下是公司正在热销产品:
2-基二苯酮碳酸钴/碱式碳酸钴/碳酸亚钴/碳酸钴(II)/Coblltous carbonate
D-酒石酸二酯苯并咪唑/苯并二唑/1H-苯并咪唑/1,3-苯并二氮唑/Benzimidazole
愈创木酚磺酸钾2-氨基噻唑/2-氨基-1,3-硫氮唑/2-氨基-1,3-硫氮杂茂/2-Aminothiazole
基二酸二酯2-氨并噻唑/2-苯并噻唑胺/2-苯基噻唑胺/2-Aminobenzothiazole
6-基哒嗪-3[2H]-酮2-氨并咪唑/α-氨基间二氮茚/1H-苯并咪唑-2-胺/2-Aminobenzimidazole
2-[2-(1-嗪基)氧基]醇3-氨基-9-基/3-氨基-N-基/AEC
化亚铜盐酸左旋咪唑/(S)-6-苯基-2,3,5,6-四-咪唑(2,1-B)噻唑单盐酸盐/左旋咪唑/L-2,3,5,6-四-6-苯基(2,1-B)噻唑盐酸盐/左咪唑/左旋四唑/驱虫速/(S)-(-)-6-苯基-2,3,5,6-四咪唑并2,1-b噻唑盐酸盐/Levamisole hydrochloride
2,4-二氧硼酸1-基咪唑/1-基-1H-咪唑/N-基咪唑/1-基甘噁啉/1-Methylimidazole
4-硼酸咪唑/甘噁啉/1,3-二氮唑/间二氮茂/1,3-二氮杂茂/1H-咪唑/甘恶啉/咁噁啉/1,3-二氨杂环戊/1-(2-基基)-4--1H-咪唑并(4,5-c)/Imidazole
3,4,5-三腈1,4-双(5-苯基-2-恶唑)苯/1,4-双(5-苯基-2-噁唑基)苯/2,2-(1,4-亚苯基)双(5-苯基恶唑)/POPOP
TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法)哪家好少突胶质前体细胞分化培养基 规格20mg Mouse Cystatin C ELISA Kit
雪旺细胞培养基 规格20mg Mouse CrossLaps ELISA Kit
星形胶质细胞培养基 规格20mg Mouse Bone-specific Alkphase-B ELISA Kit
小胶质细胞培养基 规格20mg Mouse Osteocalcin ELISA Kit
成纤维细胞培养基 规格20mg Mouse Osteocalcin(OT)ELISA kit
成纤维细胞培养基 规格20mg Mouse Bone morphogenetic protein receptor II ELISA Kit
成纤维细胞培养基 规格20mg Mouse Bone morphogenetic protein receptor 1A ELISA Kit
成纤维细胞培养基-2 规格20mg Mouse Bone morphogenetic protein 7 ELISA Kit
扁桃体上皮细胞培养基 规格20mg Mouse Bone morphogenetic protein 6 ELISA Kit
口腔角质细胞培养基 规格100mg Mouse Bone morphogenetic protein 4 ELISA Kit
肺泡上皮细胞培养基 规格20mg Mouse Bone morphogenetic protein 4 ELISA Kit
支气管上皮细胞培养基 规格20mg Mouse Bone morphogenetic protein 3 ELISA Kit
小气道上皮细胞培养基 规格20mg Mouse Bone morphogenetic protein 2 ELISA Kit
骨骼肌细胞培养基 规格20mg Mouse Bone morphogenetic protein 2 ELISA Kit
上皮细胞培养基 规格20mg Mouse Osteoprotegerin ELISA KIT
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验相关实验
=1&tpg=16&age=0 [求助]流式细胞仪分析细胞凋亡时,绿色荧光蛋白会不会影响监测结果? 大家好,我们最近用轮流式细胞仪检测细胞凋亡时,发现即使是对照组荧光信号也有些异常。我们的细胞中有几分是转染了绿色荧光蛋白基因的,不知道是否与这有关。不知道大家是否也遇到过此类问题,希望大家给与指导。谢谢! http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=65&id=5068488&sty=1&tpg=16&age=0 [求助]有没有研究Eph/Ephrin系统与血管
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法)哪家好
询价









