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HB101 化学感受态细胞0.1mL×10直销

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  • 上海一研
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  • 2025年07月13日
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      HB101 化学感受态细胞0.1mL×10直销

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      上海一研

    HB101 化学感受态细胞0.1mL×10直销注意事项:
    1.从少量样品(1-10mg组织或102-104细胞)中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品,沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来,糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成,也不影响PCR反应。
    2.匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
    3.分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机,2600×g离心30-60分钟。
    HB101 化学感受态细胞0.1mL×10直销技术优势
    1. 能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。
    2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并最大限度的降低RNA污染。
    3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物
    4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切等后续实验之中。
    5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。
    HB101 化学感受态细胞0.1mL×10直销操作步骤:
    1. 匀浆处理:a.组织 将组织在液氮中磨碎,每50-100mg组织加入1ml TRIzol,用匀浆仪进行匀浆处理。样品体积不应超过TRIzol体积10℅。
    b.单层培养细胞 直接在培养板中加入TRIzol裂解细胞,每10cm2面积(即3.5cm直径的培养板)加1ml,用移液器吸打几次。TRIzol的用量应根据培养板面积而定,不取决于细胞数。TRIzol加量不足可能导致提取的RNA有DNA污染。
    c.细胞悬液 离心收集细胞,每5-10×106动物、植物、酵母细胞或1×107细菌细胞加入1ml TRIzol,反复吸打。加TRIzol之前不要洗涤细胞以免mRNA降解。一些酵母和细菌细胞需用匀浆仪处理。
    2.将匀浆样品在室温(15-30℃)放置5分钟,使核酸蛋白复合物完全分离。
    3.可选步骤:如样品中含有较多蛋白质,脂肪,多糖或胞外物质(肌肉,植物结节部分等)可于2-8℃10000×g离心10分钟,取上清。离心得到的沉淀中包括细胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。处理脂肪组织时,上层有大量油脂应去除。取澄清的匀浆液进行下一步操作。
    5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml氯仿,剧烈振荡15秒,室温放置3分钟。
    6. 2-8℃10000×g离心15分钟。样品分为三层:底层为黄色有机相,上层为无色水相和一个中间层。RNA主要在水相中,水相体积约为所用TRIzol试剂的60℅。
    7. 把水相转移到新管中,如要分离DNA和蛋白质可保留有机相,进一步操作见后。用异丙醇沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml异丙醇,室温放置10分钟。
    8. 2-8℃10000×g离心10分钟,离心前看不出RNA沉淀,离心后在管侧和管底出现胶状沉淀。移去上清。
    9. 用75℅乙醇洗涤RNA沉淀。每使用1ml TRIzol至少加1ml 75℅乙醇。2-8℃不超过7500×g离心5分钟,弃上清。
    10.室温放置干燥或真空抽干RNA沉淀,大约晾5-10分钟即可.不要真空离心干燥,过于干燥会导致RNA的溶解性大大降低。加入25-200μl无RNase的水或0.5℅SDS,用枪头吸打几次,55-60℃放置10分钟使RNA溶解.如RNA用于酶切反应,勿使用SDS溶液。RNA也可用100℅的去离子甲酰胺溶解,-70℃保存。
    二(2-羟基)亚胺基三(羟基)烷(100GM)    bis-TRIS, CAS# 6976-37-0; MW 209.2; Molecular Biology Grade
    L-丝氨(1KG)    L-Serine, CAS# 56-45-1; MW 105.09; ≥98.5%
    无水磷氢二钾(500GM)    Sodium Pyruvate, Sodium Pyruvate
    细胞膜荧光探针DiOC3(3),碘化物    DiOC3(3) iodide [3,3-Dipropyloxacarbocyanine iodide]
    德州红酰肼[磺基罗丹明101磺酰肼]    TR hydrazide [Sulforhodamine 101 sulfonyl hydrazide]
    ReadiView 生物素 马来酰亚胺    ReadiView Biotin maleimide
    FDGlcU [荧光素 2-β-D-葡糖苷]    FDGlcU [Fluorescein di-beta-D-glucuronide]
    钙离子荧光探针Fluo-2,五钾盐 超级    Fluo-2, pentapotassium salt UltraPure grade
    iFluor 610琥珀酰SE    iFluor 610 succinimidyl ester
    Annexin V-mFluor Violet 450偶联物    Annexin V-mFluor Violet 450 conjugate
    Cyanine 7酰肼 [相当于Cy7酰肼]    Cyanine 7 hydrazide [equivalent to Cy7 hydrazide]
    SEM-HRP偶联物[用于ELISA]    Semicarbazide (SEM)-HRP Conjugate
    Salsalate (100 g)    2-hydroxy-2-carboxyphenyl ester-benzoic acid; Disalcid|Salflex|NSC 49171|Nobacid|Salina|Sasapirin; Salsalate
    MAM2201 N-(5-chloropentyl) analog-d5 (500 ug)    (1-(5-chloropentyl)-1H-indol-3-yl)(4-methylnaphthalen-1-yl-2,4,5,6,7-d5)methanone; JWH 122 N-(5-chloropentyl) analog-d5; MAM2201 N-(5-chloropentyl) analog-d5
    3-methyl-2-Quinoxalinone (500 mg)    3-methyl-2(1H)-quinoxalinone; NSC 17798|NSC 38589|NSC 149824; 3-methyl-2-Quinoxalinone
    Resorcinolnaphthalein (10 mg)    3’,6’-dihydroxy-spiro[1H,3H-naphtho[1,8-cd]pyran-1,9’-[9H]xanthen-3-one; NSC 354317; Resorcinolnaphthalein   汁酵母 Saccharomyces uvarumMA, 小鼠星形胶质细胞
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    HB101 化学感受态细胞0.1mL×10直销公司的RNA/DNA提取目录有下面10个系列,5000余种产品
    1、RNA纯化系列产品
    2、DNA纯化系列产品
    3、电泳及回收系列产品
    4、探针标记及检测系列产品
    5、核酸扩增系列产品
    6、克隆表达系列产品
    7、基因组研究系列产品
    8、蛋白质研究系列产品
    9、细胞生物学研究系列产品
    10、即用型溶液、质粒库、菌种库等等

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