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- HCCL-018
- 2025年07月14日
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- 供应商：
上海研谨生物
货号：HCCL-018
细胞特性
- 来源：血管平滑肌
- 形态：上皮细胞样，贴壁生长
- 含量：>1x106 个/mL
- 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
- 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
细胞接受后的处理：
- 收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
- 请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
- 弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的完全培养基。
- 如果细胞长满（90%以上）请及时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
- 接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。
细胞用途：仅供科研使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
一．培养基及培养冻存条件准备：
- 准备DMEM培养基(DMEM，GIBCO，货号11995-065)，90%；优质胎牛血清，10%。
- 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
- 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
- 细胞处理：
- 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
- 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
- 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
- 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。
- 轻轻吹打后吸出，移入15ml离心管中，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养液后吹匀。
- 移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。
注意事项：
1. 收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
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文献和实验培养了快一个月的细胞了，今天终于鉴定出是我想要的血管平滑肌细胞。我养的是大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞,采用的是组织贴块法培养。10天后传第一代（图1），16天后第二代（图2），22天后第三代（图3），并做a－actin免疫细胞化学鉴定（图4）。 图1图2图3 图4典型的血管平滑肌细胞生长"hill and valley"现象。
The multiple copies of the HA epitope present in the HAT tag can be detected by the mouse monoclonal antibodies 12CA5 (Boehringer) and 16B12 (MMS101R; BAbCO, Richmond, California) (see Table 1). On Western blots against yeast protein
Anti-HA Immunocytology The multiple copies of the HA epitope present in the HAT tag can be detected by the mouse monoclonal antibodies 12CA5 (Boehringer) and 16B12 (MMS101R; BAbCO, Richmond, California) (see Table 1). On Western blots
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