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- MLCL-005
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海研谨生物
- 细胞形态：
上皮细胞样
- 器官来源：
结肠癌
小鼠结肠癌细胞(MC-38)
货号：MLCL-005
细胞特性
- 来源：结肠癌
- 形态：上皮细胞样
- 含量：>1x106 个/mL
- 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
- 规格：T75瓶或者1mL冻存管包装
运输和保存：使用含有优质胎牛血清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞后，可在1000RPM，常温条件下，离心5min后，于洁净操作台弃去上清，加入推荐使用的培养基后转移至10cm培养皿或者T75培养瓶中培养，传代达到细胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供科研使用。
细胞培养步骤
一．培养基及培养冻存条件准备：
- 准备DMEM培养基(DMEM，GIBCO，货号11965-092)，90%；胎牛血清，10%。
- 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
- 冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
- 细胞处理：
- 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
- 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
- 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
- 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
- 按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
- 将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
注意事项：
1. 收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
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文献和实验oliver1981 我想知道结肠癌细胞系都有哪些？以及他们的区别是什么？哪个公司或科研机构卖的细胞系最全？急等回信！ yhwangcams 结肠癌细胞系多的很，他们都有各自的特点和不同的基因突变，在ATCC上有相关介绍，也可以搜索相关文献得到更多信息。可以直接从ATCC订货，比较贵。 根据ATCC有以下： http://www.lgcstandards-atcc.org
【求助】测试p38功能变化仅测磷酸化的P38就可以了，为何还要测总P38呢？
伽利略 我一直都不太明白，请达人解释下，谢谢 bigbang_0_0 蛋白质功能上的变化包括质变和量变两种，所以要检测总的p32蛋白水平。 George2 测总P38是为了了解P38的表达背景，以估测激活的P38占总量的比例。 伽利略 我是这样想的，请问有何问题 P38磷酸化水平若增高不论是否P38总量变化，都能说明P38活跃或者激活，不测P38
yzzaici888 大家好，本人最近一直在做p-p38的磷酸化，但是一直都做不好。希望各位大侠帮助解决： 蛋白上样量80-100ug，半干转膜70min，5%BSA封闭70min，一抗CST（#9211） 1：500加，4℃孵育过夜，二抗1:8000加室温70min。曝光出的结果很不好，杂带很多，也分析不出那条是目的条带，且没有趋势，见下图 15001046419
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