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上海研谨生物
大鼠心肌细胞(H9c2)
货号:RDCL-012
细胞介绍
B. Kimes and B. Brandt从源于BD1X大鼠胚胎心脏组织的克隆细胞株亚克隆了H9c2(2-1)细胞株,它表现许多骨骼肌的特性。这个细胞株中的成肌细胞能融合形成多核的肌管,并对乙酰胆碱的刺激发生反应。如果培养基中的血清浓度下降到1%,融合发生得很快。
细胞特性
- 来源:心脏
- 形态:成肌细胞,贴壁生长
- 含量:>1x106 个/mL
- 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
- 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
细胞接受后的处理:
- 收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。
- 请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
- 弃去T25瓶中的培养基,添加6ml本公司附带的完全培养基。
- 如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
- 接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。
细胞用途:仅供科研使用。
本公司的细胞培养操作规程,供参考
一.培养基及培养冻存条件准备:
- 准备DMEM-H培养基(DMEM-H,GIBCO,货号12800017,添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%(注:血清要求为北美或澳洲血清)。(DMEM液体培养基:GIBCO,11995-065)。
- 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
- 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
- 细胞处理:
- 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
- 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
- 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
- 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。
- 轻轻吹打后吸出,移入15ml离心管中,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养液后吹匀。
- 移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。
注意事项:
1. 收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
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文献和实验首先,它肯定不同于原代细胞系的,最大的区别,原代的心肌细胞基本不能分裂,而H9C2可以分裂,最大的区别了吧!原代心肌细胞会跳动,你的H9C2不会吧。虽然都是梭形的,但是H9C2来源于胚胎期心脏,而心肌细胞一般用新生大鼠分离获得。H9C2与原代心肌细胞有那么大区别,当然不能替代它,所以在研究方向上,你要根据自己的实验需求选择自己合适的细胞,一般来讲呢,如果你研究与心脏相关的信号通路,我建议你还是选用细胞系,因为它可以分裂,获得细胞容易,而且,因为H9C2展现一些成肌细胞特性,所以一般文章都说H9C2
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