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- HZbscience
- 中国/美国
- 11647HZ70
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
冰袋运输。-20℃保存
- 保质期：
1年
- 英文名：
Lentivirus ERSE Luciferase Reporter
- 库存：
大量
- 供应商：
上海沪震实业有限公司
- 规格：
μg/盒
ERSE报告基因慢病毒是沪震生物自主研发的用于检测ERSE转录活性水平为目的的报告基因慢病毒颗粒。ERSE充当一个顺式作用元件调节内质网应激反应的转录应答。ERSE是包含NF-Y/CBF 和YY1转录因子结合位点的三重核苷酸序列。内质网应激反应元件结合因子（ERSF）复合体也是与ERSE核苷酸序列相互作用的。内质网应激在一些多发性疾病中具有关键的作用。
ERSE报告基因慢病毒主要用于检测ER Stress信号通路、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分子等。
pGMLV-ERSE-Lu是在pGMLV-Lu慢病毒载体的多克隆位点插入了多个ERSE结合位点，可以高灵敏度地检测ERSE的激活水平。采用慢病毒作为报告基因的优点在于它能够感染多种难感染的细胞，比如原代细胞，干细胞，神经元细胞等。而且慢病毒能够将外源基因插入细胞基因组内，实现稳定转染。
质粒图谱
ERSE-Luc报告基因慢病毒颗粒使用说明
ERSE报告基因慢病毒颗粒采用慢病毒转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒检测。
运输和保存方法
干冰运输。-80℃保存，有效期6个月，如保存时间过长，使用前请重新检测病毒滴度。
注意事项
1）病毒操作时最好使用生物安全柜，如使用普通超净工作台操作病毒，请不要打开风机。
2）病毒操作时请穿实验服，带口罩和乳胶手套。
3）操作病毒时必须特别小心，不要产生气雾或飞溅。如操作时超净台有病毒污染，立即用10%次氯酸钠溶液搽拭干净。接触过病毒的枪头、离心管和培养板等需用10%次氯酸钠溶液浸泡1h以上后弃去。
4）用显微镜观察细胞感染情况时应遵从以下步骤：拧紧培养瓶或盖紧培养板。用70%乙醇清理培养瓶外壁后到显微镜处观察拍照。离开显微镜试验台前，用70%乙醇清理实验台。
5）病毒操作完成后，用肥皂清洗双手。
6）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验自己测滴度吗? 答：我们是在HT1080细胞株中对纯化的慢病毒进行滴度测定的。常用有4种方法进行慢病毒滴度测定，分别是： (1)通过ELISA对病毒颗粒中的p24蛋白进行检测; (2)通过定量PCR对病毒颗粒的RNA进行检查; (3)通过定量PCR对整合到基因组DNA中的病毒序列进行检测; (4)通过FACS对荧光蛋白的表达水平进行检测。 我们用基因组DNA定量PCR的方法进行慢病毒滴度的检测。前两种方法并不能区分病毒颗粒是否有活性
载体，可以通过梯度稀释侵染HeLa或者293，NIH3T3细胞来确定其滴度;不含报告基因的可通过测定病毒颗粒中相关病毒蛋白的活性或者含量来确定其滴度，比如使用p24gag的ELISA试剂盒。一般来说，每4-60 x 103个病毒载体含1ng p24gag。然而这种方法测出来的滴度并不准确，不同的病毒载体类型，不同的储存方式，都会导致p24gag和病毒载体颗粒的比值变化较大。甚至是不同的实验室测出来的都会有差异。亦可使用PCR法测定滴度，其引物设计针对病毒颗粒的通用cDNA区域，因此不受外源插入片段的影响，也不需
hairpin RNA, shRNA), 载体包含位于RNA聚合酶Ⅲ启动子和4～5T转录终止位点之间的茎环结构序列，转录后即可折叠成具有1~4 个U 3 ’ 突出端的茎环结构，在细胞内进一步加工成siRNA。构建载体前通常要通过合成siRNA的方法，寻找高效的siRNA，然后从中挑选符合载体要求的序列，将其引入siRNA表达载体。 Q:如何生产病毒? A:载体质粒和辅助质粒转染293细胞后收获病毒上清，通过超滤和超速离心进行纯化和浓缩获得高滴度和高纯度的慢病毒颗粒。 Q
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