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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
冰袋运输。-20℃保存
- 保质期:
1年
- 英文名:
pGM-CMV Luciferase Reporter Plasmid Positive Control
- 库存:
大量
- 供应商:
上海沪震实业有限公司
- 规格:
μg/盒
pGM-CMV-Luc是以CMV作为启动子,启动Luciferase在细胞内的表达,主要用于萤火虫荧光素酶(Firefly Luciferase)报告基因的阳性对照和动物的活体成像实验等。通过对质粒上可以被预测出的转录因子结合位点全部进行适当的突变处理,在不改变质粒功能的情况下,使质粒对转录因子的非特异结合降到了最低。
质粒图谱
质粒元件信息
冰袋(wet ice)运输。收到产品后放到-20 ºC保存。
使用说明
pGM-CMV-Luc可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。
注意事项
1) 本质粒未经沪震生物允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2) 为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
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文献和实验【求助】关于构建目的基因启动子序列的虫荧光素酶报告基因重组质粒的问题请教
longgyin8341 最近想做虫荧光素酶报告基因,但是从来没有做过,想求院子里高手指教: 我是要观察一种药物是否能作用于细胞内的几种核受体(NFkB,PPAR,ER(目前还不清楚究竟是哪个,需要分别试验))的启动子区域,影响这几个核受体的转录水平,从而影响细胞的一些功能(比如凋亡等)。计划将这三种核受体的启动子区域分别扩增出来,然后与虫荧光素酶(或其他报告基因)构建重组质粒。再分别转染细胞,加入药物处理,观察荧光素酶的活性,以探索药物是否
测试的均值。图9 pRL-TK载体的环形图。附加描述:内含子的位置,Rluc ,编码Renilla荧光素酶的cDNA,Ampr,在E.coli中编码氨苄抗性,ori, 在E.coli中质粒复制起始区。Rluc和Amp r基因中的箭头表示转录的方向。小 结在双遗传报告基因的应用中,一个报告基因活力的改变,与基因表达的特定实验条件相关,而第二个报告基因的组成性活力提供了内对照,使实验值可以规一化。Promega的新的双报告基因测试系统,在单管中测试两个荧光素酶报告基因,此两个荧光素酶报告基因具有兼容的化学
型启动子(CMV、Ubi等)终止转录的情况。载体系统也分多种,包括慢病毒载体、腺病毒载体、质粒载体等。瞬时过表达方式主要是经过人工化学修饰的运用化学方法合成的双链RNA,能模拟细胞中内源性成熟miRNA的高水平表达,以增强内源性miRNA的调控作用,进行功能获得性研究。只需直接转染进入细胞,即可检测功能变化,快速,方便。miRNA靶位点鉴定:目前最为常用的miRNA靶位点鉴定方法是荧光素酶报告基因法。其基本原理是首先构建荧光素酶表达载体,将希望鉴定的miRNA靶基因的3′UTR构建到荧光素酶
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