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上海三抒生物科技有限公司
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139669-95-7
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公司简介:
上海三抒生物科技有限公司是一家从事于生物化学行业 的企业,公司致力于为实验室分析领域提供一站式服务,为用户提供专业、快捷、可靠的全方位服务。 公司能为广大用户提供各种技术平台服务。我们提供的产品主要有:生化试剂(elisa试剂盒、生化试剂盒)、通用试剂、抗体、细胞、中间体、培养基、对照品/标准品、实验室耗材等,同时我司能以优惠的价格为您提供各种进口的生物化学试剂、抗体以及仪器设备等。
上海三抒生物科技有限公司将一直致力于生物、化学、医药、精细化工、食品工业、现代农业、地质矿产、生命科学、环境保护、疾病控制、新能源等领域的长远发展,一如既往地秉承专业的服务精神,真诚的服务理念和客户至上的服务宗旨,更好地服务于全体用户,为用户提供性价比最高的产品和最专业的技术服务!
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文献和实验。加入甘氨酸可以消除甲醛使交联反应终止。1.1.准备两个长满细胞的150cm2的细胞培养皿(1*107-5*107 个细胞/皿)。将甲醛直接滴入PBS洗过的细胞培养皿中,使其终浓度为0.75%,然后在室温缓慢旋转10分钟,使蛋白和DNA发生交联。1.2 加入甘氨酸使其终浓度为125mM,在室温晃动孵育5分钟。1.3 使用10ml预冷PBS清洗细胞2次1.4 使用细胞刮将细胞收获放入 5ml 预冷PBS中,并转入50ml的管子。1.5.在皿里加入3mlPBS,将剩余的细胞转移到50ml管子里1000g
免疫荧光(immunofluorescence)是一种常用的光学显微术,即用荧光显微镜来观察细胞中的特定生物分子。免疫荧光依赖于抗体抗原的特异性结合,然后通过直接标记或间接标记方法使用荧光分子指征抗体-抗原结合的位置,以确定目标生物分子在细胞中的位置、丰度和分布情况。 免疫荧光实验流程 1. 固定 固定液种类:有机溶剂(甲醇、乙醇、丙酮等);交联剂(4%PFA、10%中性福尔马林),固定液的选择取决于被研究抗原的性质及所用抗体的特性。但针对磷酸化的抗体,不适合用甲醛,会导致磷酸
而导致记号模糊。可以把铝箔放入纱布袋并储存在液氮中。2、在抽提RNA前,先把研钵预冷,往研钵内反复加入液氮,至少4-5次,使研钵充分预冷。从液氮罐中取出样本后,把组织块放入已预冷的研钵中进行研磨,边研磨边加液氮(图1),整个过程都不要使液氮挥干。一次研磨的组织块重量不要超过300mg。图1 用研钵在液氮中把样品研成粉末3、研磨到组织样品成粉末状后(一般需要8-10min的研磨过程),在液氮基本挥发完时,在每个研钵中加2-3ml Trizol试剂。由于此时研钵很冷,Trizol加入后会冻结成固体状(图
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