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- 英文名:
T4 DNA Ligase
- 库存:
大量现货
- 供应商:
上海研谨生物
- CAS号:
9015-85-4
- 规格:
1KU
| 货号 | 产品名称 | 英文名称 | CAS号 | 产品特征 |
| Js10129-1ku | T4 DNA连接酶 | T4 DNA Ligase | 9015-85-4 | BR |
| Js10128-1000u | T4 RNA连接酶 | T4 RNA Ligase | BR,10u/ul |
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T4 DNA连接酶—BR
英文名: T4 DNA Ligase
别名:
CAS号: 9015-85-4
MDL: MFCD00163508
T4 DNA连接酶常用于催化双链DNA平末端或互补粘性末端之间的 连接反应,也能催化双链RNA 5´ -磷酸末端和3´ -羟基末端间的连 接。还可以修复双链DNA、RNA或DNA/RNA杂交双链中的单链切口。以上 反应均需消耗ATP。 随酶附带10×T4 DNA Ligation Buffer及独特配方的2×Quick Ligation Buffer提供给您更多的选择:而使用10×T4 DNA Ligation Buffer,16℃过夜连接可获得最**高的连接效率;使用快连Buffer在室 温(25℃)下,仅需5分钟即可完成粘性末端或平滑末端DNA片段的连接 反应。
使用建议:粘末端的连接反应:插入片段和载体的摩尔浓度比特别重要,此比例在2-6之间为好,低于2:1就会导致较低的连接效率,高于6:1则会导致多个插入。摩尔比请按载体与插入片段DNA浓度及分子大小来计算。
平滑末端的连接反应:平滑末端的连接反应与突出末端相比反应较慢(其Km值约为突出末端的100倍)。进行平滑末端的连接反应时,可提高DNA浓度,将使用酶量增加到突出末端量的2~5倍左右。 向粘粒或噬菌体进行连接反应:可使载体和插入DNA的摩尔比调整为1:1,同时增大DNA浓度以便取得良好效果。(0.05~0.1μg/μl以上)
反应温度: 该酶的最适温度为37℃,由于热稳定性较差,因此 长时间反应时通常需在16℃下进行。若反应1-2小时左右的话也可在室 温下进行反应。
抑制剂:T4 DNA连接酶要求Mg2+,因此螯合Mg2+的EDTA的存在会阻碍反应。将溶解于含有高浓度EDTA缓冲液中的DNA准备作为样品使用 ,先用灭菌蒸馏水或TE缓冲液进行置换。
储存条件: -20℃
用途: DNA片段和载体DNA的连接
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【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
因为看到园子中使用NEB T4 DNA连接酶的老师和同学比较多,也经常就一些连接的问题进行讨论和沟通。今天发一个关于NEB T4 DNA连接酶的一个专题,就使用过程中一些常见问题跟大家讨论一下。也希望各位老师同学能够踊跃参与,如果大家有什么疑问或者好的建议欢迎。 一、关于NEB M0202 T4 DNA 连接酶的使用方法和常见问题及解答 1、产品特性和使用方法 产品说明:该酶催化契合的双链DNA或RNA的5'-磷酸末端和3'-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平滑
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