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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
RT/2-8℃/-20℃
- 保质期:
3年
- 英文名:
T4 DNA ligase
- 库存:
999
- 供应商:
北京康瑞纳生物科技有限公司
- CAS号:
15210-559202
- 规格:
1ku
T4 DNA 连接酶 T4 DNA 连接酶
产品名称:T4 DNA 连接酶
产品编号:sl8688
中文别称 T4 DNA连接试剂盒
英文别称 T4 DNA ligase
储存条件 -20℃
产品简介
T4 DNA Ligase(Fast) 由携带 T4 噬菌体 gene 30 的大肠杆菌产生。该酶催化双螺旋 DNA 或 RNA 之间的5'-磷酸基团和3'-羟基之间形成磷酸二酯键。该酶在双链DNA、RNA或者DNA/RNA复合物间可修复单链缺刻 , 并且可以连接有粘性末端或者平末端的DNA片段,但对于单链核酸无活性,主要用于限制性内切酶酶切产物DNA片段克隆、基因定点突变与 PCR产物克隆、线性DNA自环化与修复双链DNA缺刻。T4 DNALigase(Fast) 需要ATP作为辅助因子,在室温下完成粘性末端连接反应仅需10分钟。
酶活单位定义
37℃条件下,1 Weiss unit的酶在20 min内催化1 nmol的[32 PPi]转变为活性炭吸附态。1 Weiss unit等同于约200个粘性末端连接反应单位(CEU),相当于在16℃条件下,30 min内连接50% HindIII 消化后的 λDNA 片段。
酶活检测条件
酶活在如下反应混合物中进行测试:66mM Tris-HCl (pH7.6),6.6
mM MgCl2 ,66μM ATP,10mM DTT,3.3μM [32PPi]。"
特性:高效连接粘性末端和平末端,T/A 克隆 dsDNA 切刻修复构建高丰度克隆文库RNA 和 DNA 的连接
来源:纯化自 E. coli C600 pcl857 pPLc28 lig8。
反应条件:1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液[50 mM Tris-HCl(pH 7.5 @ 25℃),10 mM MgCl2,10 mM DTT,1 mM ATP]。推荐 DNA 5′ 末端浓度为 0.1-1.0 μM,16℃ 温育。
热失活:65℃ 10 分钟。
粘性末端活性包装:包装指在 20 μl 1X T4 DNA 连接酶反应缓冲液中,16℃ 反应条件下,30 分钟能使 50% 的经 HindⅢ 消化的λDNA 片段 [ 5′ 端浓度为 0.12 μM(300 μg/ml)] 连接所需的酶量
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文献和实验Ren L, Liu J, Liu C, Yang T, Wu X, Zhang X, Yang L, Xia J, Li W. AIn Vitro Cell(RAW264.7 cells;100 ng/mL LPS,24 h at 37 °C) RAW264.7 cells were seeded in confocal dishes at a density of 1 × 105 cells per dish. After the culture of 24 h, cells were treated with 100 ng/mL LPS in different media, including a control medium, PACDFe extract, and PACDFe hydrogel extract supplemented with 1 μM LL-37 for another 24 h at 1800 °C. 更多文献信息请详询客服










