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- 百奥莱博
- 北京
- JN0067-NFM
- 2025年07月06日
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长期
- 英文名：
T4 Polynueleotide Kinase
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249
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")T4多聚核苷酸激酶(T4 PNK)北京现货促销，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。
名称：T4多聚核苷酸激酶(T4 PNK)
英文名：T4 Polynueleotide Kinase
规格：200U×5
编号：JN0067
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
该酶能够催化磷酸在γ-位和双链/单链DNA或RNA的5´-羟基末端以 及3´-单磷酸核苷间进行转移和交换：5´-OH + NTP 5´-P + NDP;
该酶还具有3´磷酸酶活性，将3´-磷酸基团从寡核苷酸的3´磷酸 末端、脱氧3´-单磷酸核苷和脱氧3´-二磷酸核苷上水解掉。
产品组成：
| 组份 | 体积 |
| T4 PNK（10U/μl） | 20μl |
| 10×T4 PNK Reaction Buffer | 1ml |
| 10mM ATP | 50μl |
产品用途：
1、引物或PCR产物的5´末端磷酸化以便进行连接反应。（参见实验方案）
2、合成DNA接头 (Linker) 的5´末端磷酸化以便进行连接反应。
3、DNA及RNA 5´末端的标记，用作寡核苷酸探针。
使用建议：
1、1×T4 PNK反应缓冲液中不含ATP，需在反应体系中加入终浓度为1mM的ATP，也可以使用T4 DNA连接酶的反应液代替。
2、铵离子强烈抑制T4 PNK活性，故DNA应溶于不含铵盐的溶液中。
活性定义：以Micr℃℃cal Nuclease处理的小牛胸腺DNA为底物，在37℃，pH7.6的条件下，30分钟内使1 nmol 的[γ-32P]ATP掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量定义为1个活性单位（U）。
质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留，无核酸内、外切酶污染。
关键词：T4多聚核苷酸激酶(T4 PNK),T4 Polynueleotide Kinase,JN0067
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文献和实验用 T4 标记的 5’ 末端 1． 无菌的 1.5ml 为了离心管置冰浴上顺序混合下列组分： 50 pmol 合成的寡核苷酸 2.5 μ l 10 ×反应缓冲液 10 μ l γ -[32 P]ATP （ 33pmol ） 1.5 μ l T4 多核苷酸激酶（ 15U ） 灭菌双蒸水加至 25 μ l 2． 37 ℃温育 30min 。 3． 当反应物正温育时，以 2000 × g 离心 2min 制备
【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
液： 1X T4 DNA Ligase Buffer: [50 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 10 mM DTT, 1 mM ATP, 25 µg/ml BSA, (pH 7.5 @ 25°C)]。推荐DNA浓度(0.1 - 1 µM 的5′末端)。 使用注意：ATP是反应必须的辅因子。这一点与要求NAD作辅因子的大肠杆菌DNA连接酶不同。 如在反应体系中补加1 mM的ATP，连接反应还可以在NEB提供的四种限制性内切酶缓冲液(NEBuffers)或在T4 DNA多聚核苷酸激酶
。在这些情况下，仅有约10％的放射性标记物被转移，但实际上每个寡核苷酸分子都被标记。 2） 在反应混合液中加入8单位（约1 μl）T4噬菌体多核苷酸激酶。 充分混匀，于37 ℃温育45分钟。人该反应液中另取0.5 μl 加至另一装有10 10mmol/LTris.Cl(pH8.0)的反应管中，搁置一旁留备步骤3）使用。于68 ℃将其余的反应液加热10分钟，以灭活T4噬菌体多核苷酸激酶。 3） 按下列方法（Stawinski等，1977;Narang等，1980
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