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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃避光
- 保质期:
一年
- 英文名:
ECL Western Blotting Detection Kit(Mouse/Rabbit IgG)
- 库存:
886
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")北京促销ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠/兔IgG)价格,我公司是生物试剂、化学试剂专业供应商,立足北京,服务全国的高校、研究所、医院、企业科研部门,欢迎各位老师来电垂询订购。
名称:ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠/兔IgG)
英文名:ECL Western Blotting Detection Kit(Mouse/Rabbit IgG)
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
规格:1盒
本试剂盒主要用于western blotting的化学发光显色,含有HRP标记抗小鼠/兔IgG二抗。
SDS-PAGE电泳后,蛋白质按照分子量大小分离,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)后,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶标记的第二抗体起反应,加入发光底物后,能让胶片感光。经显影和定影后,可以在胶片上显示出条带(抗原所在位置)。
试剂盒组分:
封闭试剂———————————30g(可配制400ml)
10倍浓缩抗体稀释液——————50ml
HRP标记小鼠/兔IgG二抗-————0.3ml,效价1:500~1000
ECL显色液-——————————25mlA+25mlB
常规电泳转膜后:
1)清洗转印膜:将膜剥离下后,作好标记,一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T漂洗3次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS,防止影响后面的抗体结合。
2)按5g封闭试剂加100ml双蒸水计,配制膜封闭液,配好的膜封闭液为乳白色悬液,将漂洗过的转印膜放入封闭液内,置摇床孵育,室温封闭30min。用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜,室温漂洗3次每次5min。
3)将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×(10ml,10×抗体稀释液加入90ml双蒸水,混匀,可4℃保存三个月)。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4)用1×的抗体稀释液稀释一抗。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中,加入一抗工作液,封口,4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
注:如果所加一抗不同,可在此步将膜沿电泳方向剪成条,分别作好标记,分开孵育。
5)用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜,室温漂洗3次每次5min。
6)用1×的抗体稀释液稀释二抗。根据用量,按10ml抗体稀释液加入15ul的HRP标记二抗的比例,配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中,加入二抗工作液,封口,37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
7)用TBS-T缓冲液(PH7.6)洗膜,室温漂洗3次每次10min。
8)根据用量,取ECL发光液A、B等量混匀,加在膜正面,暗室显色1~5分种。倾去显色液,小心用纸吸去显色液,在上面盖一层平整的透明纸。再取出感光胶片,做好标记,轻轻的放在膜上,显色30秒到1分钟,取出胶片浸入显影液中,观察显色情况,再放入定影液中1分钟。根据条带强弱,再次感光时可减短或者加长感光时间(从5秒到30分钟)以期达到理想结果。
注意事项:
1.请根据一抗来源选择试剂盒。
2.可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深,可延长膜封闭时间,加长最终漂洗次数与时间。如果
条带过弱,可增加抗体浓度,可延长抗体孵育时间或加长感光时间。
3.TBS-T(0.01M,PH7.6)配制方法:称取NaCl 8.5g,Tris 1.21g,用800ml的双蒸水溶解,用盐*(代"酸")调PH到7.6,再加入0.5ml Tween-20,用双蒸水加至1000ml,混匀即可。(也可按照自己的配制习惯来配制)
储存条件:-20℃避光,有效期一年。
关键词:ECL化学发光法检测试剂盒(小鼠/兔IgG),QN1155,ECL Western Blotting Detection Kit(Mouse/Rabbit Ig
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| 编号 | 名称 |
| QN1169 | SDS-PAGE凝胶制备试剂盒 |
| QN0815 | 对硝基*(代"*")甲*(代"酸")乙酯 |
| QN0293 | DiI标记高密度脂蛋白 |
| QN0078 | 嘌呤霉素 |
| QN0848 | 毒莠啶 |
| QN0417 | 脂肪酶VII |
| QN0119 | 维生素B5(D-泛酸*) |
| QN0603 | 钼酸铵 |
| QN0648 | 偏钒酸* |
| QN0116 | 维生素B3(烟酸) |
| QN0314 | 牛血红蛋白 |
| QN0399 | 中性蛋白酶 5万U/g |
| QN0323 | 牛心细胞色素C |
| QN1074 | 福林酚 |
| QN0326 | 细胞松弛素B |
| QN1281 | 变性蛋白预制胶(8~20%) |
| QN0484 | L-乳酸脱*酶 |
| QN0539 | 尿苷-5"-三磷酸三*盐 |
| QN0735 | 二水槲皮素 |
| QN1301 | *荧光探针(Fluo 3-AM) |
| QN0926 | 总RNA提取试剂盒 |
| QN1225 | SABC免疫组化试剂盒(山羊IgG)(DAB显色) |
| QN0962 | 通用引物 T3 |
| QN0625 | 硫*(代"酸")*七水 |
| QN0089 | 羧苄青霉素溶液 |
| QN0395 | 胰酶 |
| QN0094 | 硫*(代"酸")卡那霉素溶液 |
| QN0279 | 氧化型低密度脂蛋白 |
| QN0930 | 乙酸*(pH5.2) |
| QN0692 | 茉莉酸甲酯 |
| QN0527 | 丙基硫氧嘧啶 Propylthiouracil |
| QN0718 | EDTA二*盐 |
| QN0016 | 泰乐菌素 |
| QN1223 | SABC免疫组化试剂盒(小鼠/兔IgG)(DAB显色) |
| QN1164 | 10%过硫*(代"酸")铵 |
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