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miRNA First Strand cDNA Synthesis Kit
长期
北京百奥莱博科技有限公司
低温运输,-20℃保存。使用方法:一、对miRNA 3´末端进行加Poly(A)处理1.在冰上预冷RNase-Free的反应管内加入以下试剂至总体积20μL。注意需要最后加入E.coli Poly(A)聚合酶。<table width=450 border=1 style="border-collapse:collapse;text-align:center;border:black;"><tr style="text-align:center;font-weight:bold;border-bottom:3px solid;background-color:#D7D1F8;"><td>试剂组份<td>体积<tr><td>自备的Total RNA(见注)<td>1μg<tr><td>10× Poly(A)聚合酶反应液<td>2μl<tr><td>ATP溶液,1mM<td>2μl<tr><td>RNase-Free水<td>补水至20μL<tr><td>E.coli Poly(A)聚合酶(5U/μL)<td>0.4μL(2U)</table>注:在反应中使用的Total RNA必须含有miRNA。也可以直接使用miRNA(建议加入量为2–5μL,需根据目的miRNA的丰度决定)。2. 移液器轻轻混匀上述配制的反应液,短暂离心后在37℃反应60 min。所得的反应液可以直接进行下游实验(注意:只能把2μL 直接用于后续的RT反应,多于2μL 则需要先乙醇-乙酸钠沉淀,再将加尾后的miRNA 溶于水,然后再取所需量用于RT。如果不经过沉淀,带入的残留的poly(A)聚合酶反应液将会干扰RT反应),也可以放置-20℃短暂保存。如需长期保存建议存放于-80℃。二、对带Poly(A)尾巴的miRNA进行逆转录反应3. 按照下表设置20μL体系的RT反应:<table width=450 border=1 style="border-collapse:collapse;text-align:center;border:black;"><tr style="text-align:center;font-weight:bold;border-bottom:3px solid;background-color:#D7D1F8;"><td>成分<td>体积<tr><td>Poly(A)反应产物(来于上步)<td>2μl<tr><td>RNase-Free水<td>10μl<tr><td>Oligo(dT)-Tag引物<td>1μl<tr><td>4×RT Buffer(含dNTP)<td>5μl<tr><td>MMLV 逆转录酶(含RI)<td>2μl</table>4. 移液器轻轻混匀上述配制的反应液,短暂离心后在42℃反应60 min。5. 70℃保温10 min 终止反应。6. 合成的cDNA反应液可放置于-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博供应的miRNA cDNA第一链合成试剂盒价格用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多miRNA cDNA第一链合成试剂盒等核酸扩增(PCR)产品请联*(代"系")我司咨询订购。
名称:miRNA cDNA第一链合成试剂盒价格
编号:BTN130911
规格:25次
英文名:miRNA First Strand cDNA Synthesis Kit
品牌:百奥莱博
产地:北京
本试剂盒采用在miRNA 3´末端加多聚A 尾的方法来使miRNA 具有Poly(A)尾,之后再使用Oligo(dT)-Tag引物进行逆转录反应,最终合成miRNA 对应的第一链cDNA。其反应流程如下:
产品特点:
1. 两步式操作,先进行Poly(A)加尾,再进行逆转录反应。
2. 只需要1μg的total RNA。
3. 所得cDNA可用于检测多种miRNA,不仅减少了误差、节约了样品,同时还实现了检测的高通量。
4.与miRNA荧光定量PCR 检测试剂盒兼容。
5.特异性好,独特的miRNA引物及反应体系避免了Pre-miRNA的非特异扩增。
试剂盒组成:
成分 | 规格 |
E.coli Poly(A)聚合酶(5U/μL) | 10μl |
10×Poly(A)聚合酶反应液 | 50μl |
ATP溶液,1mM | 50μl |
Oligo(dT)-Tag引物(0.5ug/μL) | 25μl |
MMLV 逆转录(含RI) | 50μl |
4×RT Buffer(含dNTP) | 125μl |
RNase-free 水 | 1ml |
试剂组份 | 体积 |
自备的Total RNA(见注) | 1μg |
10× Poly(A)聚合酶反应液 | 2μl |
ATP溶液,1mM | 2μl |
RNase-Free水 | 补水至20μL |
E.coli Poly(A)聚合酶(5U/μL) | 0.4μL(2U) |
成分 | 体积 |
Poly(A)反应产物(来于上步) | 2μl |
RNase-Free水 | 10μl |
Oligo(dT)-Tag引物 | 1μl |
4×RT Buffer(含dNTP) | 5μl |
MMLV 逆转录酶(含RI) | 2μl |
成分 | 规格 |
溶液A | 50ml |
酸洗玻璃珠,400μm | 25g |
溶液B | 15ml |
溶液C | 50ml |
离心吸附柱 | 50套 |
通用洗柱液 | 50ml |
RNA洗脱液 | 10ml |
说明书 | 1份 |
北京百莱博科技有限公司是核酸扩增(PCR)产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购miRNA cDNA第一链合成试剂盒价格。
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