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- YT398-EXH
- 北京
- 2025年07月13日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
326
- 英文名：
Second Strand cDNA Synthesis Kit
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
10次
特别提示：包括cDNA第二链合成试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：cDNA第二链合成试剂盒
英文名称：Second Strand cDNA Synthesis Kit
产品货号：YT398
产品规格：10次
本试剂盒是一种在合成了cDNA第一链的基础上去除RNA-DNA杂合链中的RNA链并合成cDNA第二链，最终形成双链cDNA的试剂盒。本试剂盒包含了进行cDNA第二链合成所需的各种试剂。
本试剂盒采用RNase H使RNA-DNA杂合链中的RNA产生切口，此时DNA Polymerase I可以通过切口平移(nick translation)反应催化形成cDNA第二链。
使用本试剂盒合成的双链cDNA，可以直接用于后续的常规PCR、real-time PCR、cDNA文库的构建等。
本试剂盒用于体积为20微升的cDNA第一链合成反应的后续反应时，足够进行20个cDNA第二链样品的合成。
产品组份：
RNase H(1U/μl)————————10μl
DNA Polymerase I(10U/μl)———30μl
Reaction Buffer(10X)——————100μl
储存条件：-20℃。
注意事项：
1）进行第二链合成时，dNTP比较适当的最终浓度约为0.2mM。如果最终浓度过低，在反应体系中需要适当补充dNTP。
2）如果希望获得平末端的双链cDNA，可以用T4 DNA Polymerase(YT403)或DNA末端平滑试剂盒(YT404)处理。
3）酶使用时宜存放在冰盒内或冰浴上，使用完毕后宜立即放置于-20℃保存。
我公司销售的cDNA第二链合成试剂盒价格，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验1)离心沉淀cDNA第一链，并重悬在50μl水中，加50μl 2×第二链缓冲液(0.2mol／L Hepes，pH6.9，20m mol／L MgCl2，5 m mol／L DTT，0.14 mol／L KCl，1 m mol／L 4种Dntp)，混合均匀。 2)每微克底物加大肠杆菌DNA聚合酶K1enow片段20～50单位，15℃反应20小时，此酶能识别cDNA 3’末端发卡环，并以其为引物，cDNA第一链为模板，开始第二链的合成。 3)加0.5 mol／L EDTA 2μl
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