北京现货cDNA第一链合成试剂盒哪里卖

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北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应北京现货cDNA第一链合成试剂盒哪里卖，产品信息：

类别：核酸扩增(PCR)

英文名：BalbScript cDNA Synthesis Kit

产品名	产品编号	包装规格
cDNA第一链合成试剂盒	WE0132	100次

编号：WE0132

规格：100次

英文名：BalbScript cDNA Synthesis Kit

品牌：百奥莱博

产地：北京

  本试剂盒是专为两步法RT-PCR第一步实验配制的cDNA第一链合成试剂盒。该试剂盒中使用的BalbScript逆转录酶是M-MLV由来的新型高效逆转录酶，新颖突变位点大幅提升酶的转录活性，cDNA第一链合成的效率和产量更高，可利用pg级的总RNA或mRNA合成cDNA第一链。点突变消除RNase H活性，酶的延伸性能提高，有效改善逆转录酶与RNA模板的亲和力，可获得长至12 kb的cDNA。精心优化的RT Buffer使逆转录酶应用范围更广，对后续的PCR以及定量PCR实验兼容性高。该试剂盒配备所有逆转录试剂，使用简单方便。适用于第一链cDNA的合成和后续的RT-PCR、RT-qPCR，以及全长cDNA文库的构建等。

 

试剂盒组成：

 

组份	100次
BalbScript，200 U/μl	25μl
5×RT Buffer	120μl
Primer Mix	60μl
dNTP Mix，2.5 mM Each	120μl
DTT，0.1 M	60μl
RNase-Free Water	1ml

 

产品特点

1、高效的逆转录效率：新颖突变位点大幅提升酶活性能，获得更高产量的cDNA。

2、良好的延伸能力：点突变消除RNase H活性，改善逆转录酶与RNA模板的亲和力，可获得长至12 kb的cDNA。

3、灵敏度高：可利用pg级的总RNA或mRNA模板合成cDNA第一链。

4、使用方便：逆转录试剂盒中已配备所有逆转录试剂，仅需准备模板即可轻松完成逆转录。

 

注意事项：

1、在操作过程中应避免RNase污染，防止RNA降解或实验中的交叉污染，建议在专门的区域进行RNA操作，使用专门的仪器和耗材，操作人员带口罩和一次性手套并经常更换手套。

2、实验尽量使用一次性塑料器皿，若使用玻璃器皿，应使用0.1%DEPC(焦碳酸二乙酯)水溶液在37℃处理12小时，并在120℃下高压灭菌30分钟后使用，或者将玻璃器皿在180℃下干热灭菌60分钟后使用。实验中用到的无菌水应使用0.1%的DEPC处理后进行高压灭菌。

3、本试剂盒中的所有试剂使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。所涉及的酶类使用后应尽快放回-20℃，避免反复冻融。

4、若起始RNA的量小于50ng，建议加入RNA酶抑制剂(RNasin)。本试剂盒并未提供，如需要可单独向本公司订购，货号：WE0223。

 

操作步骤：

注意：1ng-5μg总RNA可建立20μl反应体系，如果总RNA量大于5μg，请按比例扩大反应体系。

 

I．逆转录操作步骤：

1、将RNA模板、Primer Mix、dNTP Mix、DTT、RT Buffer、BalbScript和RNase-FreeWater溶解并置于冰上备用。

2、根据以下表格配制反应体系，总体积为20μl。

 

 

试剂	20μl反应体系	终浓度
dNTP Mix，2.5 mM Each	4μl	500μM Each
Primer Mix	2μl
RNA Template	Xμl	50 pg-5μg
5×RT Buffer	4μl	1×
DTT，0.1 M	2μl	10 mM
BalbScript，200 U /μl	1μl
RNase-Free Water	up to 20μl

注意：

1)若起始RNA的量小于50ng，则建议加入RNA酶抑制剂(RNasin)。本试剂盒并未提供，如需要可单独向本公司订购，货号：WE0223。

2)Primer Mix由Oligo(dT)和Random Primer配制而成。

 

3、涡旋震荡混匀，短暂离心，使管壁上的溶液收集到管底。

4、cDNA合成反应条件：

1)若下游进行荧光定量PCR检测，42℃孵育15分钟，85℃孵育5分钟。

2)若下游进行普通PCR检测，42℃孵育30-50分钟，85℃孵育5分钟。

注意：对于二级结构复杂或GC含量高的模板，可以提高逆转录温度至50℃，增强逆转录效率。

5、反应结束后，短暂离心，置于冰上冷却。

6、逆转录产物可直接用于PCR反应和荧光定量PCR反应，或置于-20℃长期保存。

 

II．若逆转录效率低，或RNA模板二级结构复杂、GC含量高时，建议采用以下步骤：

1、将RNA模板、Primer Mix、dNTP Mix、DTT、RT Buffer、BalbScript和RNase-FreeWater溶解并置于冰上备用。

2、根据以下表格配制反应体系，总体积为13μl 。

 

 

试剂	20μl反应体系	终浓度
dNTP Mix，2.5 mM Each	4μl	500μM Each
Primer Mix	2μl
RNA Template	Xμl	50 pg-5μg
RNase-Free Water	up to 13μl

 

3、70℃孵育10分钟，迅速冰浴2分钟。

4、短暂离心，使管壁上的溶液收集到管底。

5、继续向以上反应液中加入以下试剂：

 

 

试剂	20μl反应体系	终浓度
5×RT Buffer	4μl	1×
DTT，0.1 M	2μl	10 mM
BalbScript(200 U/μl)	1μl

注意：

1)若起始RNA的量小于50ng，则建议加入RNA酶抑制剂(RNasin)。本试剂盒并未提供，如需要可单独向本公司订购，货号：WE0223。

2)Primer Mix由Oligo(dT)和Random primer配制而成。

 

6、进行cDNA第一链合成：

1)若下游进行荧光定量PCR检测，50℃孵育15分钟，85℃孵育5分钟。

2)若下游进行普通PCR检测，50℃孵育30-50分钟，85℃孵育5分钟。

7、反应结束后，短暂离心，置于冰上冷却。

8、逆转录产物可直接用于PCR反应和荧光定量PCR反应，加入量应小于PCR反应体系的1/10，或置于-20℃长期保存。

 

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

北京现货cDNA第一链合成试剂盒哪里卖专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

关键词：cDNA第一链合成试剂盒,BalbScript cDNA Synthesis Kit,WE0132

我公司依托国内外技术研发人才的优势，公司的销*(代"售")额保持高速增长，企业规模不断扩大，拥有专业的技术研发团队，长期致力于ELISA试剂盒、生物试剂(包括)的研发，为客户提供引物设计与合成、免疫组化、PCR定量服务等一系列实验代测服务。

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编号	类别	名称
WE0300	蛋白质研究	PVDF膜(0.22μM)
WE0133	核酸扩增(PCR)	cDNA第一链合成试剂盒(去除基因组DNA)
WE0109	核酸扩增(PCR)	Babuddy超保真DNA聚合酶
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WE0149	核酸扩增(PCR)	一步法逆转录实时荧光定量PCR试剂盒(低含量ROX校正染料)
WE0371	生物素化抗体	生物素化驴抗人IgG(H+L)
WE0341	一抗	HRP标记抗His标签多克隆抗体
WE0179	DNA纯化	口腔拭子基因组DNA提取试剂盒
WE0211	核酸电泳和回收	6×UltraStain上样缓冲液
WE0116	核酸扩增(PCR)	2×富含GC PCR MasterMix
WE0330	免疫检测	抗His标签抗体琼脂糖介质
WE0170	DNA纯化	DNA产物快速纯化试剂盒
WE0281	蛋白质研究	蛋白银染试剂盒
WE0141	核酸扩增(PCR)	快速实时荧光定量PCR预混体系
WE0279	蛋白质研究	Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒
WE0200	RNA纯化	植物RNA提取试剂盒(含DNase I)
WE0191	RNA纯化	TRIzon试剂(总RNA提取)
WE0119	核酸扩增(PCR)	结核分枝杆菌基因分型试剂盒(HV-3)
WE0171	DNA纯化	固定组织基因组DNA提取试剂盒
WE0247	克隆与表达	TA快速连接试剂盒(pUC-T Simple)(含载体，连接酶)
WE0376	HRP标记抗体	HRP标记山羊抗人IgM(Fc5μ)
WE0138	核酸扩增(PCR)	一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒(低含量ROX校正染料)
WE0265	蛋白质研究	细胞核/浆蛋白抽提试剂盒
WE0329	免疫检测	抗c-Myc标签抗体琼脂糖介质

 

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