DNATrans转染试剂供应

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北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应DNATrans转染试剂供应，产品信息：

类别：克隆与表达

英文名：DNATrans Transfection Reagent

产品名	产品编号	包装规格
DNATrans转染试剂	WE0255	500μl

编号：WE0255

产地：国产|进口

英文名：DNATrans Transfection Reagent

品牌：百奥莱博

  DNATrans是一种高效的阳离子脂质体转染试剂，适用于多种细胞的DNA转染。对于大多数细胞系包括原代细胞都有较高的转染效率，并且对细胞毒性极低。本转染试剂可应用于瞬时转染、稳定转染、共转染、高通量DNA转染，基因表达和基因功能研究。

 

实验前准备及重要注意事项

1、DNATrans Transfection Reagent使用前应先震荡摇匀。

2、转染效率与细胞密度有很大关系， 不同实验间应保持一个基本的传代步骤，确保转染时细胞没有长满或处于静止期。一般贴壁细胞转染的最佳细胞密度是80%-90%，悬浮细胞的最佳细胞密度为3-5×105细胞/ml，用于转染的最佳细胞度应根据不同的细胞类型或用途而异。

3、转染时不要在培养基中加入抗生素，否则会导致细胞死亡。

 

使用方法：

1、对于大部分的细胞系， DNA与DNATrans Transfection Reagent的比例在1:2至1:3时转染效率较高。为了提高转化效率、表达水平并且减少细胞毒性，实验应在细胞密度较大时进行转染。以下操作以24孔板每孔细胞的DNA转染操作为例。

a. 贴壁细胞：转化前一天，在24孔板的每孔中加入500μl无抗生素的生长培养基，并于每孔中接种0.5-2×105个细胞，待细胞长至80%-90%满时进行转染。

b. 悬浮细胞：在细胞转染之前，在24孔板的每孔中加入500μl无抗生素的生长培养基，并于每孔中接种3-5×105个细胞。

2、转染当天，首先准备转染复合物，对于每孔细胞按照以下用量配制：

a. 取适量DNA，加入25μl无血清培养基，并轻轻的混合均匀。

b. 取适量DNATrans Transfection Reagent，加入25μl无血清培养基，轻轻混匀，并于室温孵育5分钟。

c. 孵育5分钟之后，将稀释的DNA和稀释的DNATrans Transfection Reagent混合(使DNA以及DNATrans Transfection Reagent的终总体积为50μl)，轻轻混合均匀，并在室温下孵育20分钟(溶液可能会出现絮状，但不会影响转染效率)。

注意：该混合物在室温下可以稳定保存6小时。

3、将步骤1中24孔板中培养的细胞生长培养基更换成450μl无血清培养基，然后将步骤2中50μl转染复合物加入到24孔板内，轻轻前后推动24孔板以混匀。

4、将细胞置于含5% CO2，37℃条件下培养4-6小时后，更换成500μl生长培养基。

5、18-48小时后进行转染基因表达的检测。

6、对于稳定的细胞系：在转染24小时后，细胞按照1:10的比例传代，第二天可加入筛选培养基进行筛选。

注意：

1)该说明为一个24孔的用量，若同时转几个孔，配制转染复合物的量需加倍；若转染其他类型孔板，DNA和DNATrans Transfection Reagent用量见附表，该附表用量以293T细胞为转染细胞时的标准用量。

2)转染4-6小时后也可以不更换生长培养基，但由于DNATrans Transfection Reagent具有一定的细胞毒性，作用时间过长可能使某些细胞出现大量死亡现象，建议更换生长培养基。

3)优化条件：想要得到更高的转染效率，应优化转染条件：培养物、DNA浓度、细胞数和细胞与DNA复合物的孵育时间等条件都应进行优化。

 

附表：293T细胞转染参考数据

 

培养板	每孔表面积	铺板用培养基体积	DNA和稀释体积	DNATrans Transfection Reagent和稀释体积
96孔	0.3cm2	200μl	0.13μg至10μl	0.5μl至10μl
24孔	2cm2	500μl	0.8μg至25μl	2μl 至25μl
12孔	4cm2	1ml	1.6μg至50μl	4μl至50μl
35 mm	10cm2	2ml	4.0μg至100μl	10μl至100μl
6孔	10cm2	2ml	4.0μg至100μl	10μl至100μl
60 mm	20cm2	5ml	8.0μg至500μl	20μl至500μl
10 cm	60cm2	10ml	24μg至800ml	60μl至800μl

 

储存条件：2～8℃，避光

DNATrans转染试剂供应专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司

关键词：DNATrans Transfection Reagent,WE0255,DNATrans转染试剂

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编号	类别	名称
WE0350	一抗	抗HA标签多克隆抗体
WE0314	蛋白质研究	免疫组化试剂盒(兔源一抗)
WE0116	核酸扩增(PCR)	2×富含GC PCR MasterMix
WE0218	其他分子生物学试剂	红细胞裂解液
WE0144	核酸扩增(PCR)	实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)
WE0141	核酸扩增(PCR)	快速实时荧光定量PCR预混体系
WE0390	二抗	AP标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
WE0303	蛋白质研究	显影粉
WE0118	核酸扩增(PCR)	结核分枝杆菌基因分型试剂盒(VNTR-9)
WE0332	一抗	抗c-Myc标签单克隆抗体
WE0366	HRP标记抗体	HRP标记驴抗兔IgG(H+L)
WE0323	蛋白质研究	DAB显色试剂盒(WB IHC)
WE0243	核酸电泳和回收	Super DNA Ladder
WE0392	FITC标记抗体	FITC标记山羊抗小鼠IgG(H+L)
WE0229	基因结构和功能	二代测序DNA快速建库试剂盒(Illumina平台)
WE0321	蛋白质研究	一抗稀释液(WB IHC)
WE0209	DNA纯化	磁珠法口腔拭子DNA提取试剂盒
WE0344	一抗	抗V5标签多克隆抗体
WE0110	核酸扩增(PCR)	2×Babuddy MasterMix(含染料)
WE0162	DNA纯化	高纯质粒小提试剂盒
WE0402	DNA纯化	唾液DNA样本保存管
WE0231	基因结构和功能	DNA文库定量试剂盒(Illumina平台)
WE0248	克隆与表达	DNA快速连接试剂盒
WE0359	FITC标记抗体	FITC标记兔抗人IgG(H+L)
WE0106	核酸扩增(PCR)	2×BAmp MasterMix(含染料)
WE0234	基因结构和功能	cfDNA文库定量试剂盒(Illumina平台)

 

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