LabFect Lipofect5000 transfect

货号：T2123

存储条件：2-8℃保存，有效期一年。每次使用前请先将本品轻轻混匀。 

产品组分：

产品简介:

Labfect5000是一款通用型核酸转染试剂，适用于将质粒DNA转染入哺乳动物细胞。Labfect5000具有非常优异的转染性能，可转染绝大多数贴 壁细胞、原代细胞和悬浮细胞。特别地，对于很多较难转染的免疫细胞和神经细胞如巨噬细胞Raw264.7、神经元细胞Neuro-2a、小胶质细胞BV2、SH-SY5Y等,也能获得较为理想的转染效果。在贴壁培养的AAV293细胞中，Labfect5000对EGFP的转染阳性率可高达90%以上；对于原代大鼠主动脉平滑肌细胞，Labfect5000的转染阳性率可高达 80%；即使对于较难转染的RAW264.7细胞，Labfect5000的质粒转染 阳性率也可高达70%。不同于普通的脂质体类转染试剂，Labfect5000 采用新型可降解纳米材料配制，细胞毒性很低，转染细胞死亡率只有 10%左右，大大降低了因细胞毒性对实验结果的影响，更不需要在转染4-6小时后更换培养液。

Labfect5000转染试剂的特点:

1、卓越的细胞转染性能：配置有Trans Buffer，可完全替代无血清 培养基，能有效提高质粒DNA转染效率，促进蛋白表达，可高效转染绝大多数贴壁细胞、原代和悬浮细胞等，在贴壁细胞中的 转染阳性率可高达90%以上；

2、对于很多较难转染的免疫细胞和神经细胞，如Raw264.7、Neuro-2a、BV2、SH-SY5Y等，能够获得较为理想的转染效果；

3、极低的细胞毒性：使用可降解生物纳米材料研发而成，毒性极低，转染后细胞死亡率只有10%左右，大大降低了因细胞毒性对实验结果的影响；

4、操作简便：无需在转染后4-6小时左右换液，不需要额外购买Opti-MEM，可以正常使用含血清培养基；

5、极高的性价比优势：转染性能显著优于部分国际权威品牌而价格不足其30%

贴壁细胞转染方法步骤(以24孔板转染质粒DNA为例):

A. 细胞接种:

1.转染前一天将细胞铺板(使用不含抗生素的完全培养基)，每孔1.5-2.0x105个细胞左右 ，使转染时细胞密度为80%;

2.最好在转染开始之前更换新鲜的含血清培养基 ，以防转染后孵育阶段细胞密度太大、营养不足导致细胞死亡。

B. Labfect5000/DNA 复合物包装(该步完成后应立即进行转染):

1. 在1.5 ml无菌离心管中加入50ul Trans buffer，并添加适量的DNA(参见附表)，用移液器轻轻混匀成DNA稀释液。 

2. 使用前混匀转染试剂，立即往DNA稀释液中添加适量的转染试剂，用移液器轻轻混匀。

3. 将Labfect5000/DNA复合物室温静置15分钟后，立即转染。

注意：离心管最好使用聚丙烯离心管。

C. 转染:

1. 将步骤B制备的复合物滴加至细胞培养孔中。轻轻晃动培养板以使复合物均匀分布。

2. 培养24小时后即可观察，但最佳观察时间为36小时。如果需要，细胞培养6~24小时后可以更换新鲜完全培养基，但不是必须。

3. 收获细胞，进行后续实验。对于稳定转染，在转染24~48小时后，用选择培养基传代培养。

附表1 ：贴壁细胞培养体系推荐初始转染条件

注意：本产品仅用于科学研究 ，不得用于医学临床用途。