- ¥130 - 1890
- 百奥莱博
- 北京
- WE0252-CTK
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-80℃
- 保质期：
长期
- 英文名：
DH5α Competent Cell
- 库存：
886
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
DH5α感受态细胞促销是高品质的克隆与表达产品，由北京百奥莱博供应，用于生化科学研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多DH5α感受态细胞等克隆与表达产品请联系我司咨询订购。
名称：DH5α感受态细胞
英文名：DH5α Competent Cell
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
编号：WE0252
本产品是采用大肠杆菌DH5α菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA热击转化。DH5α是一种常用于质粒克隆的菌株，其φ80lacZΔM15基因产物可与载体编码的β-半乳糖苷酶*基端实现α互补，可用于蓝白斑筛选。recA1和endA1的突变有利于克隆DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。使用pUC19质粒检测，转化效率可达108，适用于高效的质粒DNA克隆并能保证高拷贝质粒的稳定复制。
产品组成：
| 组份 | 0.1ml×10支 |
| DH5α Competent Cell | 10×100μl |
| Control DNA pUC19，0.1ng/μl | 10μl |
实验前准备及重要注意事项
1、感受态细胞一定要用干冰运输。感受态细胞应在-80℃下保存，不可反复冻融和放置时间过长，以免降低感受态细胞的转化效率。
2、转化所有步骤均在无菌条件下操作。
3、包装中有0.1ng/μl的pUC19DNA，供对照试验使用。
使用方法：
1、取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2、待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3、42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4、向每个离心管中加入450μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150 rpm振荡培养45分钟使菌体复苏。
5、根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，
倒置培养，37℃培养12-16小时。
注意：
1)涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2)新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3)涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。
储存条件：-80℃。
关键词：DH5α Competent Cell,WE0252,DH5α感受态细胞
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| 编号 | 名称 |
| WE0193 | 超纯RNA提取试剂盒(DNase I) |
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| WE0306 | Western Blot封闭液Ⅰ(BSA) |
| WE0274 | 蛋白标准溶液BSA |
| WE0279 | Tricine-SDS-PAGE凝胶制备试剂盒 |
| WE0161 | 寡聚核苷酸Oligo(dT)15 |
| WE0273 | 微量BCA蛋白定量试剂盒 |
| WE0293 | SDS-PAGE凝胶制备试剂盒 |
| WE0316 | 通用型免疫组化试剂盒(鼠兔源一抗) |
| WE0380 | 山羊抗兔IgG(H+L) |
| WE0139 | 一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒(高含量ROX校正染料) |
| WE0352 | 抗GST标签单克隆抗体 |
| WE0184 | 唾液基因组DNA提取试剂盒 |
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| WE0151 | 快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针) |
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| WE0356 | 抗GAPDH单克隆抗体 |
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| WE0213 | DNase I(不含RNase) |
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| WE0334 | HRP标记抗V5标签单克隆抗体 |
| WE0301 | X光暗盒(12.7cm×17.8cm) |
| WE0402 | 唾液DNA样本保存管 |
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| WE0363 | HRP标记兔抗绵羊IgG(H+L) |
| WE0227 | 人类cDNA |
| WE0299 | NC膜(0.22μM) |
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文献和实验法、 CaCl2、 RuCl等化学试剂法感受态细胞：处理后，细胞膜的通透性发生变化，成为能容许外源 DNA 分子通过时细胞的状态。转化细胞(转化子)：带有异源 DNA 分子的受体细胞( Transformant )。本实验以 E.coli DH5α 菌株为受体细胞，用 CaCl2 处理受体菌使其处于为感受态，然后与 pUC18质粒共保温，实现转化。 pUC18质粒携带有抗氨苄青霉素的基因，因而使接受了该质粒的受体菌具有抗氨苄青霉的特性，用 Apr符号表示。将经过转化后的全部受体细胞经过适应稀释，在含氨
型信息可以判断目的质粒是否可以使用这个感受态细胞来进行扩增，以及是否可以进行目的实验。例如 DH5α基因型：F-, φ80dlacZΔM15, Δ(lacZYA-argF )U169, deoR , recA1 , endA1 , hsdR17 (rK-, mK+), phoA, supE44 , λ-, thi-1, gyrA96 , relA1。基因型信息中有 lacZΔM15，说明其表达产物可以与 PUC 质粒编码表达的β-半乳糖苷酶的α肽段实现α互补，因此可以选择用 DH5α感受态来扩增
4．操作步骤 1）大肠杆菌感受态细胞的制备(CaCl2法) (1) 从新活化的E.coli DH5α菌平板上挑取一单菌落，接种于3～5ml LB液体培养中，37℃振荡培养12h左右，直至对数生长期。将该菌悬液以1:100～1:50转接于100ml LB液体培养基中，37℃振荡扩大培养，当培养液开始出现混浊后，每隔20～30min测一次OD600nm，至OD600nm≤0.5时停止培养；(2) 每组取培养液3个2ml转入2ml离心管中，在冰上冷却20-30min，于4℃，4000r／
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