通用型Western Blot电泳电转缓冲液北京厂家

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北京百奥莱博专业生产供应通用型Western Blot电泳电转缓冲液北京厂家，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：通用型Western Blot电泳电转缓冲液北京厂家
规格：1L
产地：国产|进口
英文名：Universal Electrophoresis and Transfer Buffer (for Western Blot)
品牌：百奥莱博
编号：SY0360
Western blot实验首先需要进行电泳分离目的蛋白，然后将分开的蛋白从凝胶转移到固相基质如硝化纤维素膜或PVDF膜上，从而进行随后的免疫印迹检测。Tris-甘*酸是最通用的电泳和转膜缓冲液配方，本品是改进的缓冲液配方，以干粉的形式提供，使用时只需要用去离子水溶解即可。

使用方法：将本品溶解于1 L去离子水中，混匀，即形成1×电泳缓冲液；取800 ml的1×电泳缓冲液加入200 ml乙醇即得到湿转及半干通用电转缓冲液。

注意事项
不建议反复使用或长期放置缓冲液，否则会降低电泳及转膜效果。
储存条件：室温密封

通用型Western Blot电泳电转缓冲液北京厂家正在火爆热销，除此之外，为您推荐下别热销产品：

·小鼠抗Flag-Tag单克隆抗体(DYKDDDDK)
编号：SY0649
英文名称：Monoclonal Flag-Tag (DYKDDDDK), Mouse mAb
规格：20μl(＞50次)
本品为小鼠抗Flag-Tag单克隆抗体，小鼠抗Flag标签单克隆抗体。推荐稀释比例：WB（1:5000），IF（1:1000），IP（1:100）。

标签抗原由于其分子量小，对融合蛋白的活性没有影响等特点，已被广泛应用于重组蛋白在后续免疫印迹、免疫沉淀和免疫技术的检测中。Flag标签是重组蛋白研究中应用较为广泛的一种，该标签系统利用一个短的亲水性八*基酸肽（DYKDDDDK）融合到目标蛋白的N-端或者C-端，且该标签可被后续肠激酶去除。

Flag抗体可以用于检测和Flag标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位，以及纯化、定性或定量检测Flag融合表达蛋白等。

免疫原：KLH-多肽交联物（DYKDDDDK）
反应性（Reactivity）：All
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。



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·矿物油
编号：SY0051
英文名称：Mineral oil
规格：100ml
Polymerase Chain Reaction (PCR)过程中常使用矿物油封液，以避免由无热盖PCR仪器或PCR管盖密封不严对扩增造成的影响，防止液体挥发。

·碱性磷酸酶活性检测试剂盒
编号：SY0467
英文名称：Alkaline Phosphatase Activity Detection Kit
规格：100T
本品为碱性磷酸酶活性检测试剂盒，可快速、便捷地检测细胞或组织裂解液/匀浆液、血清、血浆、尿液、纯化酶等样品中的ALP活性。该试剂盒包括标准品和空白对照，可进行达100个样品的检测。

碱性磷酸酶（Alkaline Phosphatase，简写为ALP或AKP），又称碱性磷酸酯酶，是一组同工酶，目前已发现六种ALP1-ALP6。广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织，是经肝脏向胆外排出的一种酶。碱性条件下可催化磷酸酯键的水解，从而将底物分子上的磷酸基团去除，转化为羟基。此类底物包括核酸（DNA、RNA）、蛋白、生物碱等。常见的有肠道碱性磷酸酶、非组织特异性碱性磷酸酶、胎盘碱性磷酸酶等；生物学中碱性磷酸酶（ALP）水平的变化及其活性的高低常被作为一种检测组织行为的指标，如：1）作为iPS成功诱导的标志；ALP在大多数细胞类型中均有表达，但是在iPS细胞内的表达水平明显升高；2）结肠癌细胞分化程度定性和定量的指标；3）血清中碱性磷酸酯酶的升高可导致高碱性磷酸酶血症，常被认为和恶性胆管阻塞，原发性硬化胆管炎，肝癌，肝硬化等肝胆疾病密切相关；4）血清中碱性磷酸酶活性升高还和骨骼损伤导致的骨生成，以及骨骼疾病如纤维骨炎、佝偻病、成骨不全等密切相关；5）碱性磷酸酶水平也会出现一些病理性降低的情况，多见于重症慢性肾炎、儿童甲状腺机能不全、贫血等。对于正常成人来说，血清内ALP的范围为40-150U/L。

对硝基*(代"*")磷酸（p-nitrophenyl phosphate, pNPP）是一种常用的磷酸酶显色底物，碱性条件下，可在ALP作用下生成对硝基*(代"*")酚（p-nitrophenol, pNP），后者在碱性环境下呈黄色产物，并在405nm处可检测到最大吸收峰。产物黄色越深，说明ALP活性越高，反之则活性越低。因此，通过检测OD405吸光值即可计算ALP活性水平。

产品规格：

 

ALP反应缓冲液 ALP Assay Buffer	15ml	-20℃
显色底物 pNPP Substrate	2管	-20℃避光
pNP标准品溶液p-nitrophenol Standard	100ul (10mM)	-20℃避光
反应终止液 Stop Solution	12ml	-20℃

储存条件：-20℃，有效期一年。

注意事项
1） 如果进行酶活力的绝对定量，进行酶反应时必须注意精确计时。此时推荐孵育30min等较长时间，以减小操作过程中的时间误差。如果样品中酶活性较高，则可以预先适当稀释样品。
2）样品溶液中须避免出现EDTA、*离子、柠檬酸盐等碱性磷酸酶抑制剂。
3）ALP反应缓冲液和p-nitrophenol标准品溶液对人体有害，请注意适当防护。反应终止液有腐蚀性，请小心操作。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

1. 试剂准备
将所有试剂取出，恢复至室温使用。
1） 显色底物溶液：取一管显色底物，溶解于2.5ml的ALP反应缓冲液中，充分溶解和混匀，冰上放置。注意：新鲜配制的显色底物溶液需在数小时（≤ 6h）内使用。
2） 标准品工作液：取10μl p-nitrophenol标准品溶液(10mM)，用ALP反应缓冲液稀释至0.2ml，使得终浓度为0.5mM。

2．样品准备
1） 细胞或组织裂解液的准备：采用适当细胞或组织裂解液裂解细胞和组织，如果有必要需进行适当匀浆，随后离心取上清，用于ALP活性的检测。注意：裂解液中不能含有磷酸酶抑制剂。样品可以-80℃冻存，避免反复冻融。
2） 血浆、血清和尿液的准备：血浆和血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，但为了消除样品本身颜色的干扰，需设置加了血浆或血清但不加底物的对照。注意：血浆制备不能用含EDTA和柠檬酸盐的抗凝管。尿液通常也可以直接用于测定。上述样品可以-80℃冻存，避免反复冻融。
3） 样品的稀释：若样品中含有较高活性的ALP，可以使用原有的裂解液或PBS等进行稀释，也可以采用试剂盒中的ALP反应缓冲液进行稀释。若使用上述反应缓冲液进行稀释，需保留足够的缓冲液用于试剂盒的检测过程。

3．加样
参考下表使用96孔板设置空白对照孔、标准品孔和样品孔。标准品的用量分别为4、8、16、24、32和 40μl，样品通常可以直接加50μl。如果样品中的碱性磷酸酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。

表1 各组分加样数据表

	空白对照（Blank）	标准品（Standard）	样品（Sample）
ALP反应缓冲液	50μl	(100-x)μl	(50-y) μl
显色底物	50μl	－	50μl
样品	－	－	yμl
标准品工作液	－	xμl	－

4. 混匀：用枪头轻轻吹打混匀，也可借助摇床进行混匀。

5. 孵育：37℃孵育5-10min。（待测样品中ALP活性较低时，可适当延长孵育时间至30min）

6. 终止：每孔加入100μl反应终止液终止反应。此时，标准品或有ALP活性的孔会呈现不同深浅的黄色。

7. 检测：405nm测定吸光度。如果不能测定405nm，也可以在400-415nm范围内检测吸光度。如果不能立即测定，可以在数小时内完成测定，所显现的黄色在数小时（≤ 6h）内稳定。

8. 结果分析
碱性磷酸酶活性单位的定义：在pH9.8的二乙醇胺（diethanolamine, DEA）缓冲液中，37℃条件下，每分钟水解pNPP显色底物产生1μm p-nitrophenol所需的ALP量定义为一个酶活力单位，也被称作一个DEA酶活力单位。在pH9.6的甘*酸缓冲液中，25℃条件下，每分钟水解pNPP显色底物产生1μm p-nitrophenol所需的ALP量定义为一个酶活力单位，也被称作一个甘*酸酶活力单位。一个甘*酸酶活力单位约相当于3个DEA酶活力单位。本试剂盒测定的是DEA酶活力单位。

最后，根据酶活性单位的定义，计算出样品中的碱性磷酸酶活性。


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·兔抗GFP-tag多克隆抗体
编号：SY0661
英文名称：GFP-tag, Rabbit pAb
规格：20μl(＞40次)  
本品为兔抗GFP-tag多克隆抗体，兔抗GFP标签多克隆抗体。推荐稀释比例：WB（1:2000～10000），IP（1:2000～20000），IF（1:10～100）。

GFP(Green Fluorescent Protein)最早是从一种生活在北太平洋寒冷水域的水母(Aequoria victoria) 体内发现的蛋白，该蛋白在蓝色波长范围的光激发下能发出绿色的荧光，其最大和次大的激发波长是395 nm和470 nm；最大发射波长是509 nm，在540 nm处有一肩峰。

由于GFP具有荧光性质稳定，对细胞无毒害，表达具有光谱性等一系列的优点，常作为报告基因，融合标签和细胞标记物等，应用于分子和细胞生物学领域。

产品类型：兔多克隆抗体（Rabbit Polyclonal, pAb）IgG
反应性：重组蛋白
宿主：Rabbit
应用：ELISA, IF, WB, IP
抗原分子量：26kDa
储存缓冲液：含0.1%叠氮*、50%甘油的PBS，pH7.3
纯化方式：抗原亲和纯化
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。

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