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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
4℃,12个月
- 保质期:
4℃,12个月
- 英文名:
liquid reagent
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现货
- 供应商:
柯雷生物
- 规格:
0.5ml
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文献和实验转染的定义是“将具生物功能的核酸转移或运送到细胞内并使核酸在细胞内维持其生物功能”。其中,核酸包括DNA (质粒和线性双链DNA ),反义寡核苷酸及RNAi(RNA interference)。基因转染技术已广泛应用于基因组功能研究(基因表达调控,基因功能,信号转导和药物筛选研究)和基因治疗研究。基因转染需要一定的转染试剂将带有目的基因的载体运送到细胞内。早期的磷酸钙转染法转染效率很低,且对很多细胞株无效,因此不能满足很多科研工作的需要。目前,最常用的转染试剂是阳离子脂质体和阳离子聚合
本次实验采用的脂质体是promega公司的TransFast脂质体试剂,它是一种阳离子脂质体和中性脂质体的混合物,是对于本次实验中采用的293T细胞优化的转染试剂。 三、实验材料与器材 1、材料 293T细胞 MyoD表达质粒和EGFP表达质粒 DMEM培养基 链霉素/青霉素(双抗) FCS(小牛血清) PBS(磷酸盐缓冲溶液) 胰酶/EDTA消化液 转染试剂(TransFast2、器材 20ul/200ul/1ml微量移液器和Tip头 酒精
了。 最后就是平时可能会忽略的转染试剂本身的脱靶效应 off-target effect,转染试剂本身对基因表达水平(高表达或低表达)的影响,有时候可能会造成假阳性的结果。 一般的细胞,用脂质体 2000 和 fugeneHD 转染效率相差不大,虽然有文献说脂质体 2000 脱靶效应很高,但国内在乎的人貌似不多;但是干细胞,原代细胞和肿瘤细胞等一些比较难转的细胞系,Fugene HD 比较温和,细胞毒性很低,转染效率明显要好;悬浮细胞,各有千秋,要是都不行,就电转。
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