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- 2026年10月22日
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- 文献和实验
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10 tests
金属染色法主要是银染法，银染法检测凝胶中的蛋白的灵敏性非常髙，可检测到 10 -100ng 的蛋白，比考马斯亮蓝染色法灵敏 100 多倍。
凯基银染染色法检测试剂盒可用于染色丙烯酰氨凝胶和琼脂糖凝胶中的微量蛋白质。
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文献和实验我们做蛋白质电泳的人都知道，银染色很灵敏，有很强的说服力，但通常胶背景较深，不易扫描。在这里介绍一下低背景的蛋白质银染方法。Step Reagent Time/minFix 50%EtOH, 12%HAC, 0.1%HCHO, 38%H2O 60Rinse 50% EtOH 5 min, 3 timesSensitive 0.02% Na2S2O3 1 minRinse Double distilled H2O 1 min, 3 timesSilver 0.5% AgNO3, 0.075
PAGE胶上蛋白质的银染方法有数百种，其原理相似，具体步骤各不相同。银染为蛋白质的非特异性染色，呈“爆炸性”反应模式，用于蛋白定量时准确性差，但其敏感度高、简便易行，仍被广泛应用。下面列举的这三种方法为常用的双向电泳凝胶染色法，可与质谱兼容。其中方法1敏感性最高，方法3背景最低、对比度好。 1. Blam silver staining protocol (Modified) 程序 溶液 时间
基于质谱的蛋白质鉴定，第6节：MALDI-TOF-MS蛋白和肽样品的制备
胶样质谱鉴定过程中，多肽的回收是一个问题。如下图所示，将胶样中同样的20 ng兔骨骼肌肌动蛋白用不同的染色法进行染色：常规银染色（无戊二醛）与锌-咪唑锌阴性染色法。染色后，用胰蛋白酶在凝胶中对蛋白质进行消化，磁珠法对样品进行浓缩，用MALDI-MS进行蛋白质谱鉴定。结果发现，与阴性染色的蛋白质相比，蛋白质的银染色导致胰蛋白酶肽的回收率降低（比较图中左右两边肽的S / N比率）。该影响可通过去除蛋白质染色过程中银染试剂的方式消除。 图注：20 ng (500 fmol)兔骨骼肌肌动蛋白经胰酶
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KGP1101-KGP1103 蛋白银染试剂盒，修订日期：20190316.pdf 附 (下载 1 次)
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