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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温
- 保质期:
12个月
- 供应商:
凯基生物
- 规格:
100ml×2
实验类型: 辅助试剂
检测方法: Western Blot
保存条件: 常温保存12个月
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文献和实验。 电转移缓冲液通常用Tris glycine系统,如果是转膜后有部分样品要蛋白测序 ,最好用CAPS缓冲液,减少甘氨酸对测序的污染。 半干电转移(Semi-Dry)用经过缓冲液饱和的滤纸代替传统转移槽,非常节约试剂,而且效果也好。由于不用“泡”在缓冲液中,半干转不单可用均一缓冲体系,也可以做非均一转移缓冲体系(配方下面有,还可以加 20 % (v/v) 甲醇,据说有助于增加转膜效率和减少胶变形的,但据说也有可能影响抗体识别)。半干转可以在30分钟内完成转膜(每平方厘米电流2.5—
影响转膜的。最后浸没入缓冲液里平衡。甲醇处理PVDF不要超过15秒。以后的步骤中不要让膜干涸了。 6. 电转移缓冲液通常用Tris glycine系统,如果是转膜后有部分样品要蛋白测序,最好用CAPS缓冲液,减少甘氨酸对测序的污染。 7. 半干电转移(Semi-Dry)用经过缓冲液饱和的滤纸代替传统转移槽,非常节约试剂,而且效果也好。由于不用“泡”在缓冲液中,半干转不单可用均一缓冲体系,也可以做非均一转移缓冲体系。半干转可以在30分钟内完成转膜(每平方厘米电流2.5-3.5mA,恒流
1. 溶液准备:转印缓冲液:0.025M Tris base , 0.192 M甘氨酸 , 30%甲醇10×TBST:250mM Tris-HCl ( pH 8.0 ) , 1.25M NaCl , 0.5%Tween20封闭液:1×TBST , 3%脱脂奶粉洗涤液:1×TBST2. 实验程序:A. 膜的准备:将PVDF膜切成条浸在甲醇中,室温条件下在摇床上摇1min,去除甲醇后加入1×TBST备用。B. 膜转印:1. 细胞或组织裂解液进行SDS-PAGE电泳2. 用夹心法电转至PVDF









