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质量可靠——提取所得的质粒纯度好,回收率高;
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文献和实验winniw214 小提的质粒(自己配的S1、S2和S3,不是试剂盒,但是师姐用过没问题的) 结果质粒浓度很低。菌液是37度,250rpm摇了11h的,应该够浓。 想问一下有没有什么改进的方法? 另外,关于加过S1、S2和S3之后的操作(剧烈混匀、颠倒……),我查过问过有好多不同的说法。不知道亲们平时怎么做的,哪种效果比较好? 谢谢 qijilaile s1,s2,s3混匀
CRISPR/Cas9 基因敲除实验-- sgRNA 及引物设计
来看一下。提交订单,等待引物到达:华大基因的速度非常快,大约在 2 - 3 个工作日即可拿到,在等待期间需要准备好:LB + 抗生素抗性平板;感受态细胞及相应培养基;无内毒素的 Cas9 载体质粒;BbsI 限制性内切酶;质粒小提试剂盒;常规限制性内切酶。
pl198242:请问各位大侠:用质粒提取试剂盒从大肠杆菌中提取质粒后,想用于细胞转染,还需要另外的操作来除菌么? 另外是否还需要纯化?丁香园网友boboyuan认为:不需要,当然,前提是你提取质粒时操作是规范的。提完的质粒放-4度保存,转染的时候直接用就行了。丁香园网友hzh_0796认为:看你是用什么方法提得,纯度如何我用小提的时候发现,最后一步用洗脱液洗时将吸附柱放进一个新的EP管时盖子居然盖不上,硬着头皮这样拿去离心,自己都不放心用。后面测了下浓度好低,只有89微克每毫升。看来小提
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