- ￥3870
- Sino Biological
- 北京
- 12076-H07E
- 2025年08月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
-20℃ to -80℃
- 保质期：
12个月
- 英文名：
Human HAO1 / GOX1 Protein (His Tag)
- 库存：
99
- 供应商：
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格：
50 µg
蛋白名称：Human HAO1 / GOX1 Protein (His Tag)
蛋白构建：A DNA sequence encoding the native human HAO1 (NP_060015.1) (Leu 2-Ile 370) was expressed, with a polyhistide tag at the N-terminus.
表达宿主：E. coli
蛋白纯度：> 97 % as determined by SDS-PAGE
蛋白活性：0
蛋白内毒素：Please contact us for more information.
预测N端：Met
蛋白分子量：The recombinant human HAO1 consisting of 376 amino acids and migrates as an 42 kDa band in SDS-PAGE under reducing conditions as predicted.
蛋白NP号：NP_060015.1
蛋白氨基酸序列：Leu2-Ile370
蛋白标签：N-His
蛋白保存条件：Store it under sterile conditions at -20℃ to -80℃. It is recommended that the protein be aliquoted for optimal storage. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
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文献和实验His 标签蛋白纯化效果不理想，宝宝心里苦呀。今天，小编来跟大家一起找找原因。 纯化所得组分中没有收集到重组的His标签蛋白。该问题主要可以分为以下两个方面： 1、His标签蛋白没有结合到填料上就流穿了 原因一 超声的功率不对。超声功率过高，容易导致蛋白炭化；功率过低，蛋白释放不出来。 建议 改变超声功率，同时可以在超声前加入溶菌酶。 原因二 结合缓冲液条件不合适。 建议 检查结合缓冲液中是否有影响结合的因素，如：金属离子螯合剂、强还原剂、过高的咪唑浓度。同时，优化缓冲液的pH、盐
行 HIS 标签的捕获。 2、HIS标签蛋白结合了，但是洗脱不充分 原因一 洗脱条件太温和。 建议 增加咪唑的浓度或选择咪唑线性梯度洗脱，或者通过降低 pH 寻找最佳洗脱条件。需要注意的是，pH 低于 3.5 容易导致镍离子脱落。 原因二 蛋白柱上沉淀。 建议 1 降低蛋白浓度。可以减少上样量，或者采用咪唑线性而非步级梯度洗脱，增加蛋白稀释度。 建议 2 试用去污剂或者改变 NaCl 的浓度，或者使用变性剂 (4-6M 盐酸胍或 4-8M 尿素） 在变性条件下洗脱。 原因三 非特异性的疏水或者其他相互
与6′His标签蛋白间形成的二硫键。这在目标蛋白中包含相对多的半胱氨酸时尤其重要。 杂蛋白与6′His标签蛋白的非特异性结合也可能是通过疏水作用产生。在洗脱液中加入以下物质可以减少因此而产生的非特异性：非离子洗涤剂（Trion X-100或Tween 20）;30%的乙醇或甘油。注意，不同的蛋白纯化所需加入的最佳浓度不同，需要试验摸索。 杂蛋白也可能是截断的标签蛋白。这样的杂蛋白可以用Western Blot技术很容易的识别。通过质粒测序，检查出内部的翻译起始位点或成熟前的终止
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