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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格:
50 µg
蛋白名称:ORP150蛋白, ORP150 protein
蛋白构建:A DNA sequence encoding the C-terminal segment of human HSP12A (NP_001124463.1) (Met 695-Leu 994) was expressed, fused with a polyhistidine tag at the C-terminus and a signal peptide at the N-terminus.
表达宿主:HEK293 Cells
蛋白纯度:> 97 % as determined by SDS-PAGE
蛋白活性:0
蛋白内毒素:< 1.0 EU per μg of the protein as determined by the LAL method
预测N端:Met 695
蛋白分子量:The recombinant human HSP12A consists of 311 amino acids and predictes a molecular mass of 35.2 kDa. In SDS-PAGE under reducing conditions, the apparent molecular mass of rh HSP12A is approximately 55-65 kDa due to glycosylation.
蛋白NP号:NP_001124463.1
蛋白氨基酸序列:Met695-Leu994
蛋白标签:C-His
蛋白保存条件:Store it under sterile conditions at -20℃ to -80℃. It is recommended that the protein be aliquoted for optimal storage. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
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文献和实验标签,用什么亲和纯化策略,his 或GSH还是染料抑或是IgG-ProteinA亲和,LAB的IMPAC-TWIN,还是别的如转铁蛋白等,亲和层析的策略也有很多, 3。最终产物是否有必要将亲和标签去掉,如用蛋白酶切掉标签,或 IMPAC-TWIN会自己切掉,用因子X切掉HIS, 4。表达的部位,是可溶性表达还是包涵体表达,是周质表达还是分泌表达还是分泌表达。 5。是否加入开关诱导、或是加入IPTG诱导噬菌体T7系统。 6。你表达的蛋白质是否会与细菌
酶(RNA-inducedsilencingcomplex,Dicer)切割成21~26nt长的siRNA,通过siRNA指导形成RISC蛋白复合物(RNA-inducedsilencingcomplex)降解与siRNA序列互补的mRNA而引发RNA沉默。而miRNA途径中miRNA是含量丰富的不编码小RNA(21~24个核苷酸),由Dicer酶切割内源性表达的短发夹结构RNA(hairpinRNA,hpRNA)形成。miRNA同样可以与蛋白因子形成RISC蛋白复合物,可以结合并切割特异的mRNA
苯甲磺酰氟化物(PMSF)也能清除蛋白水解酶活力,但不是全部,而且应该在破碎的同时多加几次;另外,还可通过选择pH、温度或离子强度等,使这些条件都要适合于目的物质的提取。 这是标准配方: 裂解液:50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml溶菌酶。(溶菌酶在这个pH范围内比较好发挥作用) 但我个人的经验是:如果你裂解细菌是为了提取蛋白的话,而且蛋白的分子量又小于20kd的话,尽量减少溶菌
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