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SuperSYBR One Step RT-qPCR Kit(High ROX)
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖WE0139型一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒(高含量ROX校正染料)折扣价在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:WE0139型一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒(高含量ROX校正染料)折扣价
产地:国产|进口
英文名:SuperSYBR One Step RT-qPCR Kit(High ROX)
品牌:百奥莱博
编号:WE0139
本试剂盒是一步法Real-Time RT-qPCR专用试剂盒。所含的SYBR Green I荧光染料可以与所有的双链DNA相结合,使该产品可以用于多种不同靶序列的检测而不需合成特异性标记探针。使用本产品进行Real Time RT-qPCR反应,逆转录和定量PCR在同一反应体系中进行,反应过程中无需添加试剂,无需打开管盖,避免了污染的同时提高了实验效率。全新高效逆转录酶RNase H活性缺失,减少了逆转录反应中RNA的降解。该酶逆转录效率高,可对少量 RNA模板进行良好的逆转录反应。与RNA亲合性高,能通读GC含量高,二级结构复杂的RNA模板。全新高效热启动酶,在常温下酶的活性被封闭,从而有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增,极大提高了荧光定量PCR反应的精确性。所包含的缓冲系统使以上两种酶同时发挥最大功效,提高效率。本产品灵敏度高,特异性高,线性范围广,对目的基因定量更准确。
ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同,因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器:(WE0137)
Roche LightCycler 480,Roche LightCyler 96,Bio-rad iCyler iQ,iQ5,CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器:(WE0138)
ABI Prism7500/7500 Fast,QuantStudio® 3 System,QuantStudio® 5 System,QuantStudio® 6 Flex System,QuantStudio® 7 Flex System,ViiA 7 system,Stratagene Mx3000/Mx3005P,Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器:(WE0139)
ABI Prism7000/7300/7700/7900,Eppendorf,ABI Step One/Step One Plus等。
试剂盒组成:
组份 | WE0137-100次 | WE0138-100次 | WE0139-100次 |
2×SuperSYBR One Step Buffer | 1.4ml | 1.4ml | 1.4ml |
SuperSYBR One Step EnzymeMix | 50μl | 50μl | 50μl |
50×Low ROX | - | 50μl | - |
50×High ROX | - | - | 50μl |
RNase-Free Water | 1.5ml | 1.5ml | 1.5ml |
试剂 | 25μl反应体系 | 终浓度 |
2×SuperSYBR One Step Buffer | 12.5μl | 1× |
Forward Primer,10μM | 0.5μl | 0.2μM |
Reverse Primer,10μM | 0.5μl | 0.2μM |
SuperSYBR One Step EnzymeMix | 0.5μl | |
RNA Template | Xμl | 10 pg~100ng |
50×Low ROX or High ROX(optional) | 0.5μl | 1× |
RNase-Free Water | up to 25μl |
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
反转录 | 45℃ | 10 min | |
PCR预变性 | 95℃ | 5 min | |
变性 | 95℃ | 10 s | 30-40个循环 |
退火/延伸 | 60℃ | 45 s | |
融解曲线分析 | 95℃ | 15 s | |
60℃ | 1 min | ||
95℃ | 15 s | ||
60℃ | 15 s |
步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
反转录 | 45℃ | 10min | |
PCR预变性 | 95℃ | 5min | |
变性 | 95℃ | 15s | 30-40 个循环 |
退火 | 56℃-64℃ | 30s | |
延伸 | 72℃ | 30s | |
融解曲线分析 | 95℃ | 15s | |
60℃ | 1min | ||
95℃ | 15s | ||
60℃ | 15s |
组份 | 20次 |
pUC-T(50ng/μl) | 20μl |
Control Insert(50ng/μl) | 10μl |
Quick T4 DNA Ligase | 20μl |
2×Quick Ligation Reaction Buffer | 120μl |
成分 | 反应体系 | 对照体系 |
pUC-T | 1μl | 1μl |
DNA 插入片段 | 0.1 -0.3 pmol | -- |
Control Insert DNA | -- | 1μl |
2×Quick Ligation Reaction Buffer | 5μl | 5μl |
Quick T4 DNA Ligase | 1μl | 1μl |
RNase -Free Water | 补足至10μl | 补足至10μl |
北京百莱博科技有限公司专业生产核酸扩增(PCR)产品,欢迎来电咨询选购WE0139型一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒(高含量ROX校正染料)折扣价。
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