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名称:dGTP(100mM) 核酸扩增(PCR)
品牌:百奥莱博
编号:QN0522
产地:国产|进口
本品为dGTP水溶液,浓度为100mM,配合dCTP、dTTP、dATP用于PCR反应。
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·胶原蛋白水解酶Ⅱ
编号:QN0516
英文名称:CollagenaseⅡ
规格:100mg
胶原酶Ⅱ适用于肝脏,骨,甲状腺,心脏和唾液腺组织细胞的分离。
别名:梭菌肽酶 A
CAS号:9001-12-1
来源:溶组织梭菌
纯度:0.5~5.0 FALGPA units/mg solid, ≥125 CDU/mg solid
分子量:68,000~125,000
最适pH:6.3~8.8
性状:黑棕色粉末
激活剂:Ca2+,每摩尔酶需要4g*离子激活
抑制剂:EGTA、还原性谷胱甘肽、β-巯基乙醇、巯基乙酸*、8-羟基喹*(代"啉")、2,2"-联吡*(代"啶")等。
储存条件:-20℃,有效期一年
1 个胶原消化单位(CDU):在 pH 7.4,37℃以及*离子存在的条件下,以每5小时从胶原中 释放的多肽相当于茚三酮显色1微摩尔亮*酸量为一个活性单位。
1FALGPA单位:在 pH7.5、25℃以及*离子存在的条件下,一个 FALGPA 水解单位每分钟 可水解 1.0µmol 呋*(代"喃")基丙*(代"烯")酰基-Leu-Gly-Pro-Ala。
本酶为粗品,用于分离脂肪细胞,也可以用于分离各种组织、肿瘤,尤其是上皮组织。胶原酶能够特异性结合 -R-Pro-8-X-Gly-Pro-R-序列中的中性*基酸(X)和甘*酸之间的肽键。该粗品是溶组织梭菌分泌的 混合酶。主要为胶原酶、中性蛋白酶和梭菌蛋白酶。其中梭菌蛋白酶是被氧化的、最不活泼的酶, 组织的分离必须依靠胶原酶和中性蛋白酶两者共同作用。
胶原酶Ⅱ可以用 TESCA buffer (50 mM TES,0.36 mM *化*,pH 7.4,37℃)配制成 1-2 mg/ml。 也可以用含**的 PBS、含**的 hanks 或不含血清的培养基配制。配完后分装,避免反复冻融。
底物:不同类型的胶原是其天然底物,而一些合成的多肽也可以作为其底物,比如:N-CBZ-gly-pro-gly-gly-pro-ala (Km = 0.71 mM)、N-CBZ-gly-pro-leu-gly-pro、N-(3-(2-furyl)acryloyl)- leu-gly-pro-ala(FALGPA)、4-Phenylazo benzyloxycarbonyl-pro-leu-gly-pro-D-arg、N-2,4-Dinitrophenyl- pro-gln-gly-ile-ala-gly-gln-D-arg。除此之外N-Succinyl-gly-pro-leu-glypro7-amido-4-methylcoumarin是 类胶原酶的肽酶的底物。N-(2,4-Dinitrophenyl)-proleu-gly-leu-trp-ala-D-arg *基酸化合物是脊椎动物 胶原酶的底物。
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文献和实验Protocol for isolating DNA from embryo yolk sacs, or toes, or 2 mm tail for PCR
(not Tris base). The pH is about 5. Don't adjust the pH. For yolk sac/placenta/tail/toes 2. Add 40 µl (100 µl for tail/toe) 25 mM NaOH / 0.2 mM EDTA. 3. Place at 95°C for 20 minutes (in a thermal cycler) 4. Add 40 µl (100 µl for tail/toe) 40 mM Tris
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Troubleshooting for PCR and multiplex PCR
Troubleshooting discussion is based on the PCR protocol as described in the table below. All reactions are run for 30 cycles.* The 10x PCR buffer contains: 500 mM KCl; 100 mM Tris-HCl (pH 8.3); 15 mM MgCl2 (the final concentrations
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