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- 详细信息
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
5×10⁵cells/T25
- 供应商:
沪震实业
- 肿瘤类型:
否
- 细胞类型:
原代细胞
- 品系:
原代细胞
- 组织来源:
脂肪
- 相关疾病:
否
- 物种来源:
人
- 免疫类型:
否
- 细胞形态:
电询
- 是否是肿瘤细胞:
不是
- 器官来源:
人
- 运输方式:
干冰
- 年限:
5-10年
- 生长状态:
良好
- 规格:
5×10⁵cells/T25
| 原代细胞 | 细胞株 |
| 生长较快(5-7天铺满单层) | 较快 |
| 高 | 低 |
| 高 | 低 |
| 有限 | 较多 |
| 饱满且旋涡状排列 | 单薄且多颗粒物质 |
| 阳性反应强 | 阳性反应弱 |
| 细胞生长稳定良好 | 易发生形态生理变化 |
1.产品名称:人前脂肪细胞
2.组织来源:脂肪组织
3.产品规格:5×10^5cells/T25细胞培养瓶
人前脂肪细胞4.细胞简介:
人前脂肪细胞分离自脂肪组织;脂肪组织主要由大量群集的脂肪细胞构成,聚集成团的脂肪细胞由薄层疏松结缔组织分隔成小叶;贮存的脂肪,在需要时可迅速分解成甘油和脂肪酸,经血液输送到各组织以供利用。它们影响胰岛素敏感性、血压水平、内皮功能、纤溶活动及炎症反应,参与多种重要病理生理过程;脂肪组织已由过去单纯作为能量储存的器官而成为一个极其重要的内分泌系统。脂肪组织在体内含有两种主要的细胞:一种是在胞浆内积聚脂滴的成熟脂肪细胞;另一种是虽未在胞浆内积聚脂滴但有这种潜能的前脂肪细胞。前脂肪细胞呈梭形,有分裂和增殖的能力;成熟的脂肪细胞呈圆形,已经失去了分裂及增殖的能力。由于前脂肪细胞是一类具有增殖和向脂肪细胞分化能力的特异化前体细胞,与肥胖有着非常密切的关系。前脂肪细胞是一种类成纤维细胞,在演变的过程中不断吸收脂质,最终成为成熟的脂肪细胞。前脂肪细胞对外界机械损伤的抵抗力较强,可望成为软组织缺损的有益填充物。
本公司生产的前脂肪细胞采用胶原酶消化法制备而来,细胞总量约为5×10^5cells/瓶;细胞经油红O染色鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
人前脂肪细胞5.培养基信息:
DMEM-F12、FBS、Penicillin、Streptomycin等
我们推荐使用HZbscience人前脂肪细胞专用完全培养基作为体外培养人前脂肪细胞的培养基。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
在HZbscience技术部标准操作流程下,人肾动脉内皮细胞可传3-5代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2-1:3适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察;之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
人前脂肪细胞四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和HZbscience技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
5. 该细胞只可用于科研。
备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考
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文献和实验吸管反复吹打使组织块分散,然后通过孔径25μM(200目)的筛网过滤,收集滤液和未过滤的组织块。5、将滤液以600g离心5分钟弃上清,加入原代培养的基础培养基制成细胞悬液。6、将未滤过的组织按照上述过程再处理一次,将俩次获得的细胞悬液混匀计数,按照104个/cm2的密度接种于培养瓶里,于37度,5%CO2培养箱中培养。接种12-16小时基本贴壁。在增殖状态下的前脂肪细胞可以使用胰蛋白酶消化的方法传代,并且可以冻存和复苏。
组织,洗净血污。称取脂肪垫的重量; 2. 分离细胞; ① 将脂肪垫剪成1mm3 左右的小块,转入50ml锥形离心管中; ② 每0.1g组织块加入3—4ml消化液。在37℃水浴摇床上以60r/min的转速轻微振荡,消化1h。其间每隔10min取出离心管,摇动,使组织块与消化液充分混匀; ③ 消化完后,用吸管反复吹打消化液,分散组织块,制成细胞悬液; ④ 用孔径为250µm的尼龙网筛过滤细胞悬液,除去未分散的组织块,收集滤液。将滤过液再用孔径为80µm的尼龙网筛过滤,除去大部分成熟脂肪细胞
WB 实验是最简单最基础最直观检测目标蛋白的手段,所以做生物研究的几乎都要接触,做好WB,就成了大家必修的一课。凡事预则立,不预则废。WB实验前,先在头脑里预演一下将要进行的WB实验,实操时就会免去过度的手忙脚乱。
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